Valutazione degli esosomi delle celle staminali ingegnerizzate meccanicamente per il trattamento delle lesioni endometriali: uno studio clinico

This study is a prospective, non-randomized controlled clinical trial designed to evaluate the efficacy and safety of mechanically engineered umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosomes (ME-UCMSC-Exo) and conventional umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosomes (UCMSC-Exo) in the treatment of thin endometrium secondary to severe intrauterine adhesions (IUA) seguendo l'adeolisi isteroscopica. L'endometrio sottile è una sfida significativa nella medicina riproduttiva, associata a scarsi tassi di impianto di embrioni, insufficienza ricorrente di impianto (RIF) e aumento del rischio di complicanze della gravidanza. Nonostante le terapie ormonali convenzionali, un'efficace rigenerazione endometriale rimane una sfida clinica.

Le terapie rigenerative emergenti, inclusi interventi a base di esosoma, offrono strade promettenti per migliorare la riparazione endometriale e gli esiti della gravidanza. Gli esosomi, le vescicole extracellulari secrete dalle cellule staminali, svolgono un ruolo cruciale nella rigenerazione dei tessuti fornendo molecole bioattive come proteine, microRNA (miRNA) e fattori di crescita per colpire le cellule. Lo studio mira a determinare se gli esosomi ingegnerizzati meccanicamente, che sfruttano la modulazione biofisica durante il processo di coltura, dimostrano un'efficacia superiore rispetto agli esosomi convenzionali e al plasma ricco di piastrine (PRP), un intervento biologico ampiamente usato per l'endometrio sottile.

Progettazione dello studio Questo è uno studio prospettico, non randomizzato, controllato da paralleli.

I pazienti saranno divisi in tre gruppi:

Gruppo di controllo (gruppo PRP): iniezione endometriale di plasma autologo ricco di piastrine (PRP).

Gruppo di esosomi convenzionali: iniezione endometriale di esosomi derivati ​​da UCMSC. Gruppo di esosomi ingegnerizzato meccanicamente: iniezione endometriale di esosomi derivati ​​da ME-UCMSC.

Endpoint primario: cambiamento nello spessore endometriale. Endpoint secondari: tasso di gravidanza clinica, tasso di impianto, tasso di natalità vivi, tasso di aborto e valutazioni della sicurezza (comprese le reazioni di ipersensibilità, l'infezione e le complicanze a lungo termine).

Dettagli di intervento che ciascun partecipante riceverà una singola iniezione intra-edndometriale usando un ago 17G guidato isteroscopico durante la fase proliferativa (D3-D7 del ciclo mestruale).

Gruppo PRP: 1-1,5 ml PRP per sito di iniezione (autologo). Gruppo UCMSC-Exo: soluzione esosoma convenzionale da 1-1,5 ml per sito. Gruppo ME-UCMSC-EXO: soluzione di esosoma ingegnerizzato meccanicamente 1-1,5 ml per sito. La logica per il PRP come controllo positivo PRP viene utilizzata come controllo positivo a causa della sua efficacia consolidata nel migliorare lo spessore endometriale e gli esiti della gravidanza. Le meta-analisi degli RCT hanno dimostrato che il PRP migliora significativamente lo spessore endometriale (MD: 1,23 mm, IC al 95%: 0,87-1,59, p = 0.000) e migliora i tassi di gravidanza clinica (RR: 2,04, IC al 95%: 1,52-2,76, p = 0.000). Inoltre, il PRP è autologo, sicuro e ampiamente utilizzato nella medicina riproduttiva, rendendolo un intervento comparativo adeguato per valutare l'efficacia terapeutica degli esosomi.

Criteri di ammissibilità

Criteri di inclusione:

1. Femmine di età compresa tra 20 e 40 anni (compresi i valori di confine);
2. Funzione di riserva ovarica normale (criteri: AFC ≥ 7, AMH> 1,1 ng/ml);
3. Storia della resezione transcervicale di aderenze (TCRA);
4. Ricevuto trattamento PRP dopo TCRA;
5. Almeno un ciclo di trasferimento di embrioni (ET) in cui sono stati sottoposti a stimolazione ovarica standard (ciclo fresco) o terapia di sostituzione ormonale standard (ciclo FET), con uno spessore endometriale di <7 mM;
6. Pianificato di continuare la concezione assistita da IVF/ICSI/FET;
7. In grado di accettare e aderire al trattamento e al follow-up e disposto a firmare un modulo di consenso informato.

Criteri di esclusione:

1. Pazienti con gravi malattie sistemiche, controindicazioni chirurgiche o controindicazioni del ciclo;
2. Pazienti con infezioni del tratto riproduttivo, tubercolosi genitale, malattia infiammatoria pelvica o tumori maligni degli organi riproduttivi;
3. Pazienti con malattie sistemiche che causano sanguinamento uterino;
4. Pazienti allergici a qualsiasi farmaco, materiali o componenti utilizzati in questo studio;
5. Pazienti ad alto rischio per tumori ormoni-dipendenti come carcinoma mammario o tumori ovarici;
6. Pazienti con fibromi sottomucosi non trattati di qualsiasi dimensione (FIGO 0/I/II), fibromi uterini ≥5 cm (FIGO III, IV, V, VI, VII), adenomiosi, utero unicornuate, utero bicornuali, o polinri endometriali;
7. Pazienti con idrosalpinx ≥3 cm o idrosalpinx di qualsiasi dimensione con dimissione vaginale significativa;
8. Pazienti con cisti endometriotici ovarici (cisti di cioccolato) ≥4 cm;
9. Pazienti che hanno partecipato ad altri studi clinici entro 3 mesi prima dell'intervento chirurgico o durante il periodo di studio;
10. Pazienti incapaci di tollerare l'anestesia;
11. Pazienti con anomalie genetiche;
12. Altri pazienti ritenuti inadatti alla partecipazione a questo studio da parte dello investigatore.

Considerazioni statistiche e dimensioni del campione stimate Dimensione del campione: 90 pazienti (30 per gruppo). Variabile di esito primario: lo spessore endometriale aumenta il post-trattamento. Calcolo delle dimensioni del campione basato sull'analisi ANOVA e sul test HSD Tukey post-hoc per confrontare tutte le differenze intergruppo controllando il tasso di errore familiare a α = 0,05.

Considerando un tasso di abbandono del 10%, verranno reclutati un totale di 90 pazienti.

Follow-up e valutazione dei risultati

I pazienti saranno monitorati in più punti temporali:

1. Basale (valutazione pre-intervento).

2. Valutazioni di efficacia a breve termine:

   Trasformazione del giorno del progesterone (P) P+7 giorni successivi al ciclo di trasferimento dell'embrione (HCG Trigger Day / FET Cycle Day of Progesterone Start).

3. Risultati della gravidanza:

   Gravidanza biochimica (giorno 15 post-ET). Conferma della gravidanza clinica (settimana 5-6). Tasto di natalità in diretta e complicanze perinatali (fino a 1 anno dopo l'intervento).

   Valutazioni della sicurezza:

4. Reazioni avverse immediate (risposte allergiche, infezioni).
5. Sicurezza a lungo termine (follow-up di 90 giorni e 1 anno inclusi marcatori tumorali, test di funzionalità epatica/renale e valutazioni degli ultrasuoni).

Significato scientifico e clinico Questo è il primo studio clinico a valutare la terapia di esosoma delle cellule staminali derivate dal cordone ombelicale e convenzionale per l'endometrio sottile.

In caso di successo, lo studio stabilirà una nuova terapia rigenerativa senza cellule per i pazienti con endometrio sottile refrattario.

I risultati potrebbero aprire la strada a futuri trattamenti a base di esosomi nella medicina riproduttiva, espandendo le opzioni terapeutiche per le donne con infertilità del fattore uterino.