新型コロナウイルス感染症（COVID-19）研究のための自己サンプリング

3.1.1 研究対象集団: 研究者は、合計 100 人の陽性症例を前向きに収集するまで、ゴールドスタンダード (CDC 推奨検査) に対する iAMP® 検査の大規模な臨床検証研究に患者を登録します。 この地域の現在の陽性率は約 20% であるため、約 500 のサンプルが必要になります。 参加基準は次のとおりです: 新型コロナウイルス感染症検査を受診する 18 歳以上の患者で、鼻咽頭ぬぐい液に耐えることができ、自己採取の指示に従うことができる患者。 除外基準は次のとおりです: インフォームド・コンセントおよび/または信頼できる連絡先情報を提供できない、または提供したくない。

3.1.2 臨床訪問: 症状のある患者には、PPE を着用した研究提供者がアプローチします。 研究内容について説明し、患者様が同意された場合には同意となります。 患者は、2 つの鼻咽頭スワブのみ、または 5 つすべてのスワブについて同意することができます。 同意後、各患者は大規模な臨床検証のために臨床医によって 2 つの鼻咽頭スワブを同時に配置する検査を受けます。 1 つはチューブに入れて乾燥状態で保管し、もう 1 つはウイルス収集培地に入れます。 自己サンプリング研究に同意した患者は、3 つの異なるサンプルを収集するためにプライベートエリアに連れて行かれます。 書面による指示を受け取り、短い説明ビデオを見た後、患者は臨床医の監督の下で中鼻甲介サンプルを採取します。 その後、臨床医は退室し、患者は前鼻孔と唾液からサンプルを自分で採取します。 すべてのサンプルは乾燥した状態で保管されます。 患者がサンプルを研究コーディネーターに返却すると、中鼻甲介サンプルの副作用や有害事象について尋ねられます。

3.1.3 臨床検査: 3 つの iAMP® 自己サンプル部位のうち 2 つ (鼻甲介中央と前鼻孔) から乾燥綿棒を採取し、独自のバッファー (以下、サンプルバッファー A と呼びます) の入ったバイアルに入れます。 唾液の場合、サンプル収集には滅菌収集カップが使用され、サンプル緩衝液 A は滅菌収集カップに直接添加されます。 サンプルバッファー A を加えた 3 つのサンプルはそれぞれ、室温で 15 分間インキュベートします。 独自の多重混合物（マスターミックス）を試験管内で調製し、バイアル（中鼻甲介および鼻孔）またはカップ（唾液）からのサンプル10マイクロリットルを試験管に加えます。 次に、試験管を RT-PCR 装置に置き、アッセイが完了するまで実行します。 アッセイの結果は、陽性、陰性、または無効（テストは再実施される）のいずれかであり、その結果は、CDC 推奨の NAAT アッセイで実行された鼻咽頭検査の匿名化された結果と比較されます。

各部位から綿棒を正しく採取する方法についての被験者への指示。 [綿棒は植毛され、先が細くなっている必要があります]。

中鼻甲介:

• 手をよく洗って乾燥させてください
• 滅菌綿棒を用意し、利き手で柄の部分を持ちます。
• 空の iAMP コレクション バイアルを開け、もう片方の手で持ちます。
• あごが地面とほぼ平行になるように頭を後ろに傾けます（約 70 度）
• 綿棒を軸上のマーク (1 インチ、または約 2 cm) まで挿入し、綿棒を完全に (360 度) 3 回回転させます。
• 綿棒を取り外し、綿棒に触れずに、反対側も同じ綿棒で同じ手順を繰り返します。
• 鼻から綿棒を取り外し、綿の先端に触れないようにし、綿の先端から綿棒をバイアルに入れます。
• 綿棒の上の軸を折る
• キャップをバイアルに戻し、しっかりと閉めます
• 閉じたバイアルを研究担当者に渡します

前鼻孔:

• 手をよく洗って乾燥させてください
• 滅菌綿棒を用意し、利き手で柄の部分を持ちます。
• 空の iAMP® コレクション バイアルを開け、もう片方の手で持ちます。
• 綿棒を片方の鼻の穴に、綿の先端が見えなくなるまで（約 0.5 インチまたは 1 cm）挿入します。
• 鼻の中で3回完全（360°）回転させ、10～15秒ほど放置します。
• 綿棒を取り外し、綿の先端には触れずに、もう一方の鼻孔でも同じ手順を繰り返します。再び綿の先端が見えなくなるまで綿棒のみを挿入し、綿棒を 3 回回転させて 10 ～ 15 秒間放置します。
• 綿棒を取り外し、綿の先端には触れず、綿の先端から先に綿棒をバイアルに入れます。
• 綿棒の上の軸を折る
• キャップをバイアルに戻し、しっかりと閉めます
• 閉じたバイアルを研究担当者に渡します

唾液：

• 採取後 30 分以内は飲食、喫煙、ガムを噛まないでください。
• 滅菌尿カップを用意し、液体が 2 ～ 3 ミリリットルになるまで繰り返し吐き出します (泡は除く)。 必要な唾液の量の例については、下の画像を参照してください。
• カップ内には何も（指、物体など）を入れないで、カップ内を無菌状態に保ちます。
• 唾液が十分に溜まったら、キャップをカップの上にかぶせてしっかりと閉めてください。
• 閉じたカップを研究員に渡す

3.1.4 統計的根拠 NAAT アッセイで検査された検体の 20% が COVID-19 陽性であると仮定すると、連続 500 検体の研究から、NAAT アッセイで検出される COVID-19 症例は 100 件になります。 この研究では、50% ～ 95% の範囲の真の感度と特異度について、以下の表に示す感度と特異度の 95% 信頼区間 (CI) を推定できます。 感度と特異度が 50% から離れるほど精度が向上します。

表 1: 感度と特異性を検出するための 95% 信頼区間 真の感度 感度 95% CI 真の特異性 特異性 95% CI 50% 39.8% - 60.2% 50% 45.0% - 55.0% 70% 60.0% - 78.8% 70% 65.2% - 74.5% 90% 82.4% - 95.1% 90% 86.6% - 92.8% 95% 88.7% - 98.4% 95% 92.3% - 96.9%

3.1.5 リスク/安全性 この研究の唯一のリスクは、アッセイを実施する研究室職員のさらなる曝露です。 関係するすべての研究員は、新型コロナウイルス感染症 (COVID-19) などの感染性病原体を扱う訓練を受けています。 バイオセーフティフード内でのサンプルの分注や個人用保護具の使用など、サンプルの取り扱いにはすべての標準予防措置が適用されます。 患者の秘密保持は、MCW IRB によって事前に承認された患者サンプルの匿名化によって保証されます。

3.1.6 分析。 感度と特異度は、参照標準として NAAT アッセイを使用して、各 iAMP® テストおよび対応する 95% の正確な信頼区間で推定されます。

3.1.7 潜在的な臨床的限界

1. 代替の解剖学的部位は、鼻咽頭スワブよりも感度が低くなります。 自己採取のスワブは鼻咽頭スワブよりも感度が大幅に低い可能性があります。 この新型ウイルスのウイルス量は非常に高いため、これが当てはまる可能性は低いです。
2. 被験者は複数の綿棒の採取を拒否する場合があります。 患者は 5 つのサンプルの提供を拒否することができます。 自己収集されたサイトは不快感を引き起こす可能性が低いため、ほとんどの参加者が研究への参加に同意すると予想されます。 たとえ多くの患者が参加に同意しなかったとしても、症状を呈する患者が 1 日あたり 700 名おり、潜在的な参加者が多数存在するため、目標を達成することが可能です。 一部の被験者が追加の検査を拒否した場合、研究者は、自己収集した新型コロナウイルス感染症陽性被験者が 100 人になるまで登録を続ける必要がある場合があります。

3.2 具体的な目的 2. 自己採取した中鼻甲介サンプルにおける有害事象の発生率を評価する。 使用説明書 (IFU) によれば、中鼻甲介スワブは医師の監督下で採取する必要があり 13、CDC はこれを強化しています。 中鼻甲介サンプルが他の呼吸器疾患の検出に有効であることを証明する研究が複数あります。14-17 中鼻甲介採取は前鼻孔や唾液検査よりも感度が高い可能性があるため、臨床監督なしで安全に採取できることを実証することが重要です。 一部の患者は遠隔医療訪問を通じて中鼻甲介の採取を実行できるかもしれないが、これは大規模なスケールアップの障壁となるだろう。 したがって、研究者らは患者が採取綿棒を使って中鼻甲介サンプルを自己採取できるようにする予定である。 スワブには、成人の鼻甲介中央領域に到達する平均長 (約 1 インチまたは 2 cm) を示す指標線が付いています。 次に、医療提供者は、痛みや出血など、患者の自己採取に関連する有害事象がないか患者を評価します。 有害事象の発生率がないか非常に低く（5%未満）、中鼻甲介サンプルの感度が前鼻孔よりも優れている場合、患者は医師の監督なしで自分の中鼻甲介領域のサンプルを採取することが許可される可能性があります。 各タイプの有害事象を経験した参加者の割合が、対応する 95% の正確な信頼区間とともに推定されます。

4.0 概要 新型コロナウイルス感染症のパンデミックは世界的な危機を引き起こし、社会のあらゆる分野に影響を与えています。 このウイルスによる経済と医療への壊滅的な影響を軽減するには、安全で安価、信頼性の高い検査が利用できることが必要です。 このプロジェクトは、中鼻甲介、鼻孔、唾液という 3 つの解剖学的領域における低コストの迅速検査 (iAMP®) の自己採取を研究することを目的としています。この検査が検証されれば、広範な検査が現実的に可能になります。 第 2 の目的は、これらすべての領域が臨床医の監督を必要とせずに安全に自己採取できることを示すことです。 Covid-19の検査と処理に対する障壁を減らすことは、この危機を緩和し、通常の活動に戻ることを可能にするのに役立ちます。