COVID-19 연구를 위한 자체 샘플링

3.1.1 연구 모집단: 조사관은 전향적으로 총 100개의 양성 사례를 수집할 때까지 황금 표준(CDC 권장 테스트)에 대한 iAMP® 테스트의 더 큰 임상 검증 연구에 환자를 등록합니다. 이 지역의 현재 양성률은 약 20%이므로 약 500개의 샘플이 필요합니다. 포함 기준은 다음과 같습니다: COVID-19 검사를 위해 내원하는 18세 이상의 환자, 비인두 면봉 채취를 견딜 수 있고 자가 수집 지침을 따를 수 있는 환자. 제외 기준은 다음과 같습니다: 정보에 입각한 동의 및/또는 신뢰할 수 있는 연락처 정보를 제공할 수 없거나 제공하지 않으려는 경우.

3.1.2 임상 방문: PPE를 착용한 연구 제공자가 증상이 있는 환자에게 접근합니다. 연구에 대해 설명하고 환자가 동의하면 동의하게 됩니다. 환자는 2개의 비인두 면봉 또는 5개의 면봉 모두에 동의할 수 있습니다. 동의 후, 각 환자는 대규모 임상 검증을 위해 임상의가 두 개의 비인두 면봉을 동시에 배치하는 테스트를 받게 됩니다. 하나는 튜브에 건조한 상태로 보관하고 하나는 바이러스 수집 배지에 넣습니다. 자체 샘플링 연구에 동의한 환자는 세 가지 다른 샘플을 수집하기 위해 개인 공간으로 이동합니다. 서면 지침을 받고 짧은 교육 비디오를 본 후 임상의의 감독하에 환자가 중비갑개 샘플을 수집합니다. 그런 다음 임상의는 떠나고 환자는 전방 콧구멍과 타액에서 샘플을 자가 수집합니다. 모든 샘플은 건조한 상태로 보관됩니다. 환자가 샘플을 연구 코디네이터에게 반환하면 중비갑개 샘플의 부작용이나 부작용에 대해 질문을 받게 됩니다.

3.1.3 실험실 테스트: 3개의 iAMP® 자가 검체 채취 부위 중 2곳(중비갑개 및 전방 콧구멍)에서 건식 면봉을 채취하여 독점 완충액(이하 표본 완충액 A라고 함)이 있는 유리병에 넣습니다. 타액의 경우 멸균 수집 컵이 샘플 수집에 사용되며 샘플 버퍼 A가 멸균 수집 컵에 직접 추가됩니다. 샘플 버퍼 A가 추가된 3개의 샘플은 각각 실온에서 15분 동안 배양됩니다. 독점적인 멀티플렉스 혼합물(마스터 믹스)이 시험관에 준비되고 바이알(중비갑개 및 콧구멍) 또는 컵(타액)의 샘플 10마이크로리터가 시험관에 추가됩니다. 그런 다음 테스트 튜브를 RT-PCR 기계에 넣고 분석을 완료할 때까지 실행합니다. 분석은 양성, 음성 또는 무효(반복되는 테스트)로 결과가 나오며 결과는 CDC 권장 NAAT 분석으로 실행된 비인두 테스트의 익명화된 결과와 비교됩니다.

각 부위에서 면봉을 올바르게 수집하는 방법에 대한 피험자 지침. [면봉은 촘촘하고 끝이 가늘어져야 합니다].

중비갑개:

• 손을 깨끗이 씻고 말리십시오.
• 멸균 면봉을 사용하여 자주 사용하는 손으로 줄기 부분을 잡습니다.
• 빈 iAMP 수집 유리병을 열고 다른 손에 들고
• 턱이 지면과 대략 평행(~70º)이 되도록 머리를 뒤로 젖힙니다.
• 줄기의 표시(1인치 또는 ~2cm)에 면봉을 넣고 면봉을 완전히(360º) 3회 회전시킵니다.
• 면봉을 제거하고 면봉을 건드리지 않고 반대쪽도 동일한 면봉으로 과정을 반복합니다.
• 면봉을 코에서 떼고 면봉을 만지지 말고 면봉을 면봉부터 바이알에 넣습니다.
• 면봉의 윗줄기를 꺾어
• 바이알에 캡을 다시 끼우고 단단히 닫습니다.
• 밀폐된 바이알을 연구 인원에게 전달

앞 콧구멍:

• 손을 깨끗이 씻고 말리십시오.
• 멸균 면봉을 사용하여 자주 사용하는 손으로 줄기 부분을 잡습니다.
• 빈 iAMP® 수집 유리병을 열고 다른 손에 들고 있습니다.
• 면봉이 더 이상 보이지 않을 때까지(~0.5인치 또는 1cm) 한쪽 콧구멍에 면봉을 삽입합니다.
• 코 안쪽에서 완전히(360º) 3회 회전시켜 10~15초간 그대로 둔다.
• 면봉을 제거하고 면봉을 건드리지 않은 상태에서 반대쪽 콧구멍에도 과정을 반복하고 다시 면봉을 면봉이 보이지 않을 때까지만 넣고 3회 회전시킨 후 10~15초 동안 그대로 둡니다.
• 면봉을 제거하고 면봉을 만지지 말고 면봉을 면봉부터 바이알에 넣습니다.
• 면봉의 윗줄기를 꺾어
• 바이알에 캡을 다시 끼우고 단단히 닫습니다.
• 밀폐된 바이알을 연구 인원에게 전달

타액:

• 채취 후 30분 이내에는 먹거나 마시거나 담배를 피우거나 껌을 씹지 마십시오.
• 멸균된 소변 컵을 가지고 2-3 밀리리터의 액체(거품 제외)가 될 때까지 반복해서 침을 뱉습니다. 필요한 타액의 양에 대한 예는 아래 이미지를 참조하십시오.
• 컵에 아무것도(손가락, 물건 등) 넣지 않음으로써 컵 내부를 멸균 상태로 유지하십시오.
• 적당량의 타액을 모은 후 컵의 윗부분에 마개를 씌우고 단단히 닫습니다.
• 연구 인원에게 닫힌 컵 제공

3.1.4 통계적 타당성 NAAT 분석으로 검사한 검체의 20%가 COVID-19 양성이라고 가정하면, 500개의 연속 검체를 연구하면 NAAT 분석으로 검출된 COVID-19 사례가 100건이 됩니다. 이 연구는 50%에서 95% 범위의 실제 민감도 및 특이도에 대해 아래 표에 표시된 민감도 및 특이도에 대한 95% 신뢰 구간(CI)을 추정할 수 있습니다. 정밀도는 민감도와 특이도가 50%에서 멀어질수록 향상됩니다.

표 1: 민감도 및 특이도 감지에 대한 95% 신뢰 구간 참 민감도 민감도 95% CI 참 특이도 특이도 95% CI 50% 39.8% - 60.2% 50% 45.0% - 55.0% 70% 60.0% - 78.8% 70% 65.2% - 74.5% 90% 82.4% - 95.1% 90% 86.6% - 92.8% 95% 88.7% - 98.4% 95% 92.3% - 96.9%

3.1.5 위험/안전 이 연구의 유일한 위험은 분석을 수행하는 실험실 직원의 추가 노출입니다. 관련된 모든 실험실은 COVID-19와 같은 감염원을 다루는 훈련을 받았습니다. Biosafety 후드에 샘플을 분주하고 개인 보호 장비를 사용하는 것을 포함하여 표본 취급에 모든 표준 예방 조치가 사용됩니다. 이전에 MCW IRB에서 승인한 대로 환자 샘플을 익명화하여 환자의 기밀성을 보장합니다.

3.1.6 분석. NAAT 분석을 참조 표준으로 사용하여 각 iAMP® 테스트와 해당 95% 정확한 신뢰 구간에 대해 민감도와 특이도를 추정합니다.

3.1.7 잠재적인 임상적 한계

1. 대체 해부학적 부위는 비인두 면봉보다 민감도가 낮습니다. 자가 수집 면봉은 비인두 면봉보다 민감도가 현저히 낮을 수 있습니다. 이 새로운 바이러스의 바이러스 부하가 매우 높기 때문에 그렇지 않을 것입니다.
2. 피험자는 여러 면봉 채취를 거부할 수 있습니다. 환자는 5개의 샘플 제공을 거부할 수 있습니다. 자체 수집 사이트는 불편함을 유발하지 않을 가능성이 높기 때문에 대부분의 참가자가 연구 참여에 동의할 것으로 예상합니다. 많은 환자가 참여에 동의하지 않더라도 하루에 700명의 환자가 증상을 나타내며 우리의 목표를 달성할 수 있는 많은 잠재적 참가자 풀이 있습니다. 조사관은 일부 피험자가 추가 테스트를 거부하는 경우 자가 수집 COVID-19 + 피험자가 100명이 될 때까지 등록을 계속해야 할 수 있습니다.

3.2 구체적인 목표 2. 자가 수집한 중비갑개 샘플에서 부작용 발생률을 평가합니다. 사용 지침(IFU)에 따르면 중비갑개 면봉은 의학적 감독 하에 수집해야 하며13 CDC는 이를 강화합니다. 중비갑개 샘플이 다른 호흡기 질환을 감지하는 데 효과적이라는 여러 연구가 있었습니다.14-17 중비갑개 채취는 전방 콧구멍이나 타액 검사보다 민감도가 높을 수 있으므로 임상 감독 없이 안전하게 채취할 수 있음을 입증하는 것이 중요합니다. 일부 환자는 원격 의료 방문을 통해 중비갑개 수집을 수행할 수 있지만 이는 광범위한 확장에 장벽이 될 것입니다. 따라서 조사관은 환자가 수집 면봉으로 중비갑개 샘플을 자가 수집할 수 있도록 할 것입니다. 면봉에는 성인의 중비갑개 영역에 도달하는 평균 길이(약 1인치 또는 2cm)를 나타내는 표시선이 있습니다. 그런 다음 의료 제공자는 통증 및/또는 출혈과 같은 환자 자가 수집과 관련된 부작용에 대해 환자를 평가합니다. 부작용 발생률이 없거나 매우 낮고(5% 미만) 중비갑개 검체의 민감도가 전비공보다 우수한 경우, 환자는 의료 감독 없이 자신의 중비갑개 부위를 검체 채취할 수 있습니다. 각 유형의 부작용을 경험하는 참가자의 비율은 해당하는 95% 정확한 신뢰 구간과 함께 추정됩니다.

4.0 요약 Covid-19 전염병은 사회의 모든 부문에 영향을 미치는 글로벌 위기를 초래했습니다. 이 바이러스의 치명적인 경제 및 의료 영향을 줄이려면 안전하고 저렴하며 신뢰할 수 있는 검사가 필요합니다. 이 프로젝트는 세 가지 해부학적 영역(중비갑개, 콧구멍 및 타액)에서 저비용 신속 검사(iAMP®)의 자체 수집을 연구하는 것을 목표로 합니다. 이 검사가 검증되면 광범위한 검사를 실제로 가능하게 만드는 데 도움이 될 수 있습니다. 두 번째 목표는 이러한 모든 영역이 임상의의 감독 없이 안전하게 자가 수집될 수 있음을 보여주는 것입니다. Covid-19 테스트 및 처리에 대한 장벽을 낮추면 이 위기를 완화하고 정상적인 활동으로 돌아갈 수 있습니다.