Selbstentnahme zur Untersuchung von COVID-19

3.1.1 Studienpopulation: Die Forscher werden Patienten in eine größere klinische Validierungsstudie des iAMP®-Tests gegen den Goldstandard (den von der CDC empfohlenen Test) aufnehmen, bis wir voraussichtlich insgesamt 100 positive Fälle gesammelt haben. Die aktuelle Positivität in der Region liegt bei etwa 20 %, daher werden etwa 500 Proben benötigt. Die Einschlusskriterien lauten wie folgt: Patienten, die älter als 18 Jahre sind und sich für einen COVID-19-Test vorstellen, in der Lage sind, Nasopharyngealabstriche zu vertragen und den Anweisungen zur Selbstentnahme zu folgen. Ausschlusskriterien sind wie folgt: Unfähigkeit oder Wille, eine informierte Einwilligung und/oder verlässliche Kontaktinformationen bereitzustellen.

3.1.2 Klinischer Besuch: Symptomatische Patienten werden von einem Studienanbieter angesprochen, der PSA trägt. Die Studie wird erklärt und wenn der Patient zustimmt, wird er eingewilligt. Den Patienten ist es gestattet, nur für die beiden Nasopharyngealabstriche oder für alle fünf Abstriche zuzustimmen. Nach der Einwilligung wird jeder Patient einer Untersuchung unterzogen, bei der gleichzeitig zwei Nasopharyngealabstriche von einem Arzt für die groß angelegte klinische Validierung durchgeführt werden. Einer wird trocken in einem Röhrchen gelagert und einer wird in ein Virussammelmedium gegeben. Patienten, die der Selbstentnahmestudie zustimmen, werden zur Entnahme von drei verschiedenen Proben in einen privaten Bereich gebracht. Nachdem der Patient schriftliche Anweisungen erhalten und sich ein kurzes Anleitungsvideo angesehen hat, wird die Probe aus der Mitte der Nasenmuschel unter Aufsicht eines Klinikers entnommen. Der Arzt geht dann und der Patient entnimmt selbst Proben aus den vorderen Nasenlöchern und dem Speichel. Alle Proben werden trocken gelagert. Wenn der Patient die Proben an den Forschungskoordinator zurückgibt, wird er nach etwaigen Nebenwirkungen oder unerwünschten Ereignissen aus der Probe aus der Mitte der Nasenmuschel gefragt.

3.1.3 Labortests: An zwei der drei iAMP®-Selbstprobenstellen – in der Mitte der Nasenmuschel und an den vorderen Nasenlöchern – wird ein trockener Abstrichtupfer entnommen und in ein Fläschchen mit dem proprietären Puffer (im Folgenden als Probenpuffer A bezeichnet) gegeben. Für Speichel wird zur Probenentnahme ein steriler Sammelbecher verwendet und Probenpuffer A wird direkt in den sterilen Sammelbecher gegeben. Jede der drei Proben mit dem hinzugefügten Probenpuffer A wird 15 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. In einem Reagenzglas wird eine proprietäre Multiplex-Mischung (Mastermix) zubereitet und 10 Mikroliter der Probe aus dem Fläschchen (mittlere Nasenmuschel und Nasenlöcher) oder dem Becher (Speichel) werden in das Reagenzglas gegeben. Das Reagenzglas wird dann in das RT-PCR-Gerät gestellt und bis zum Abschluss des Tests laufen gelassen. Der Test wird entweder als positiv, negativ oder ungültig bewertet (Test muss wiederholt werden) und das Ergebnis wird mit dem anonymisierten Ergebnis des Nasopharyngeal-Testlaufs mit dem von der CDC empfohlenen NAAT-Test verglichen.

Anweisungen für Probanden zur korrekten Entnahme der Abstrichproben an jeder Stelle. [Wattestäbchen sollten geflockt und spitz zulaufend sein].

Mittlere Muschel:

• Hände gründlich waschen und trocknen
• Nehmen Sie ein steriles Wattestäbchen und halten Sie es am Stiel in Ihrer dominanten Hand
• Öffnen Sie das leere iAMP-Sammelgefäß und halten Sie es in der anderen Hand
• Neigen Sie Ihren Kopf nach hinten, sodass das Kinn ungefähr parallel zum Boden ist (~70°).
• Führen Sie das Wattestäbchen bis zur Markierung am Stiel (ca. 2 cm) ein und drehen Sie das Wattestäbchen dreimal vollständig (360°).
• Entfernen Sie den Tupfer und wiederholen Sie den Vorgang auf der anderen Seite mit demselben Wattestäbchen, ohne die Wattespitze zu berühren
• Entfernen Sie den Tupfer aus der Nase, berühren Sie nicht die Wattespitze, und legen Sie den Tupfer mit der Wattespitze voran in die Durchstechflasche
• Brechen Sie den oberen Stiel des Wattestäbchens ab
• Setzen Sie den Deckel wieder auf das Fläschchen und verschließen Sie es fest
• Geben Sie das verschlossene Fläschchen dem Forschungspersonal

Vordere Nasenlöcher:

• Hände gründlich waschen und trocknen
• Nehmen Sie ein steriles Wattestäbchen und halten Sie es am Stiel in Ihrer dominanten Hand
• Öffnen Sie das leere iAMP®-Sammelgefäß und halten Sie es in der anderen Hand
• Führen Sie das Wattestäbchen in ein Nasenloch ein, bis die Wattespitze nicht mehr sichtbar ist (ca. 0,5 Zoll oder 1 cm).
• Drehen Sie es dreimal vollständig (360°) in der Nase und lassen Sie es 10–15 Sekunden lang an Ort und Stelle
• Entfernen Sie das Wattestäbchen und wiederholen Sie den Vorgang im anderen Nasenloch, ohne die Wattespitze zu berühren. Führen Sie dabei das Wattestäbchen wieder nur so weit ein, bis die Wattespitze nicht mehr sichtbar ist, drehen Sie es dreimal und lassen Sie es 10–15 Sekunden lang an Ort und Stelle
• Entfernen Sie den Tupfer, berühren Sie nicht die Wattespitze, und legen Sie den Tupfer mit der Wattespitze voran in die Durchstechflasche
• Brechen Sie den oberen Stiel des Wattestäbchens ab
• Setzen Sie den Deckel wieder auf das Fläschchen und verschließen Sie es fest
• Geben Sie das verschlossene Fläschchen dem Forschungspersonal

Speichel:

• Innerhalb von 30 Minuten nach der Entnahme dürfen Sie nicht essen, trinken, rauchen oder Kaugummi kauen
• Nehmen Sie einen sterilen Urinbecher und spucken Sie wiederholt hinein, bis 2-3 Milliliter Flüssigkeit (ohne Blasen) vorhanden sind. Ein Beispiel für die benötigte Speichelmenge finden Sie im Bild unten
• Halten Sie das Innere des Bechers steril, indem Sie KEINE Gegenstände (Finger, Gegenstände usw.) in den Becher stecken
• Sobald ausreichend Speichel gesammelt ist, setzen Sie den Deckel auf den Becher und verschließen Sie ihn fest
• Geben Sie dem Forschungspersonal einen verschlossenen Becher

3.1.4 Statistische Begründung Unter der Annahme, dass 20 % der mit dem NAAT-Test getesteten Proben COVID-19-positiv sind, ergibt eine Untersuchung von 500 aufeinanderfolgenden Proben 100 durch den NAAT-Test erkannte COVID-19-Fälle. Diese Studie wird in der Lage sein, das in der folgenden Tabelle angegebene 95 %-Konfidenzintervall (KI) für Sensitivität und Spezifität zu schätzen, wobei die tatsächliche Sensitivität und Spezifität zwischen 50 % und 95 % liegt. Die Präzision verbessert sich, je weiter die Sensitivität und Spezifität von 50 % abweichen.

Tabelle 1: 95 %-Konfidenzintervalle zur Erkennung von Sensitivität und Spezifität Wahre Sensitivität Sensitivität 95 %-KI Wahre Spezifität Spezifität 95 %-KI 50 % 39,8 % – 60,2 % 50 % 45,0 % – 55,0 % 70 % 60,0 % – 78,8 % 70 % 65,2 % – 74,5 % 90 % 82,4 % – 95,1 % 90 % 86,6 % – 92,8 % 95 % 88,7 % – 98,4 % 95 % 92,3 % – 96,9 %

3.1.5 Risiken/Sicherheit Das einzige Risiko dieser Studie besteht in der zusätzlichen Exposition des Laborpersonals, das den Test durchführt. Alle beteiligten Laboratorien sind im Umgang mit Infektionserregern wie COVID-19 geschult. Bei der Handhabung der Proben werden alle üblichen Vorsichtsmaßnahmen getroffen, einschließlich der Aliquotierung der Proben in einer Biosicherheitshaube und der Verwendung persönlicher Schutzausrüstung. Die Vertraulichkeit der Patienten wird durch die Anonymisierung der Patientenproben gewährleistet, die zuvor vom MCW IRB genehmigt wurde.

3.1.6 Analyse. Sensitivität und Spezifität werden für jeden iAMP®-Test sowie entsprechende 95 % genaue Konfidenzintervalle unter Verwendung des NAAT-Assays als Referenzstandard geschätzt.

3.1.7 Mögliche klinische Einschränkungen

1. Alternative anatomische Stellen weisen eine geringere Empfindlichkeit auf als Nasopharyngealabstriche. Es ist möglich, dass die selbst entnommenen Abstriche eine deutlich geringere Empfindlichkeit aufweisen als Nasopharyngealabstriche. Dies ist jedoch unwahrscheinlich, da die Viruslast bei diesem neuartigen Virus sehr hoch ist
2. Die Probanden können die Entnahme mehrerer Abstriche verweigern. Patienten können die Abgabe von 5 Proben verweigern. Da es unwahrscheinlich ist, dass die selbst gesammelten Websites Unannehmlichkeiten hervorrufen, gehen wir davon aus, dass die meisten Teilnehmer einer Studienteilnahme zustimmen werden. Auch wenn viele Patienten der Teilnahme nicht zustimmen, stellen sich täglich 700 Patienten mit Symptomen vor, was einen großen Pool potenzieller Teilnehmer darstellt, der es möglich macht, unser Ziel zu erreichen. Die Prüfer müssen möglicherweise mit der Einschreibung fortfahren, bis 100 selbstgesammelte COVID-19+-Probanden vorhanden sind, wenn einige Probanden zusätzliche Tests ablehnen.

3.2 Spezifisches Ziel 2. Bewerten Sie die Häufigkeit unerwünschter Ereignisse in einer selbst entnommenen Probe aus der Mitte der Nasenmuschel. Gemäß der Gebrauchsanweisung (IFU) müssen Abstriche aus der Mitte der Nasenmuscheln unter ärztlicher Aufsicht entnommen werden,13 was die CDC bekräftigt. Es gab mehrere Studien, die gezeigt haben, dass Proben aus der Mitte der Nasenmuschel wirksam zur Erkennung anderer Atemwegserkrankungen sind.14-17 Da die Entnahme aus der Mitte der Nasenmuschel möglicherweise eine höhere Empfindlichkeit aufweist als die Untersuchung der vorderen Nasenöffnungen oder des Speichels, ist es wichtig nachzuweisen, dass die Entnahme ohne klinische Aufsicht sicher erfolgen kann. Obwohl einige Patienten möglicherweise in der Lage sind, über einen telemedizinischen Besuch eine Entnahme aus der Mitte der Nasenmuschel durchzuführen, wäre dies ein Hindernis für eine umfassende Ausweitung. Somit ermöglichen die Forscher den Patienten, mit einem Entnahmetupfer selbst eine Probe aus der Mitte der Nasenmuschel zu entnehmen. Der Abstrichtupfer verfügt über eine Indikatorlinie, die die durchschnittliche Länge bis zum mittleren Nasenmuschelbereich bei Erwachsenen anzeigt (ungefähr 1 Zoll oder 2 cm). Anschließend untersucht der Gesundheitsdienstleister den Patienten auf unerwünschte Ereignisse im Zusammenhang mit der Selbstentnahme des Patienten, wie z. B. Schmerzen und/oder Blutungen. Wenn keine unerwünschten Ereignisse auftreten oder diese nur sehr gering sind (weniger als 5 %) und die Empfindlichkeit der Probe aus der Mitte der Nasenmuscheln höher ist als die der vorderen Nasenlöcher, kann es den Patienten gestattet werden, ohne ärztliche Aufsicht Proben aus der Region in der Mitte ihrer Nasenmuscheln zu entnehmen. Der Anteil der Teilnehmer, bei denen jede Art von unerwünschtem Ereignis auftritt, wird zusammen mit einem entsprechenden genauen 95-Prozent-Konfidenzintervall geschätzt.

4.0 Zusammenfassung Die Covid-19-Pandemie hat eine globale Krise ausgelöst, die alle Bereiche der Gesellschaft betrifft. Um die katastrophalen wirtschaftlichen und gesundheitlichen Auswirkungen dieses Virus zu verringern, ist die Verfügbarkeit sicherer, kostengünstiger und zuverlässiger Tests erforderlich. Dieses Projekt zielt darauf ab, die Selbstentnahme eines kostengünstigen Schnelltests (iAMP®) in drei anatomischen Bereichen – der mittleren Nasenmuschel, den Nasenlöchern und dem Speichel – zu untersuchen, der, wenn er validiert wird, dazu beitragen kann, weit verbreitete Tests zu einer echten Möglichkeit zu machen. Das sekundäre Ziel besteht darin, zu zeigen, dass alle diese Bereiche sicher selbst entnommen werden können, ohne dass eine ärztliche Überwachung erforderlich ist. Der Abbau von Hindernissen für Tests und Verarbeitung von Covid-19 wird dazu beitragen, diese Krise abzumildern und eine Rückkehr zu normalen Aktivitäten zu ermöglichen.