선천적 면역 훈련을 위한 γ-조사 BCG

1. 서론 및 이론적 근거

   약독화된 Bacillus Calmette-Guerin(BCG) 생백신은 Mycobacterium tuberculosis로 인한 폐외 감염과 나병을 예방합니다[1, 2]. BCG 백신 접종은 또한 비특이적인 보호 효과가 있는 것으로 나타났습니다. BCG 백신 접종의 조기 투여는 주로 신생아 패혈증, 호흡기 감염 및 발열 감소의 결과로 아동 사망률 감소로 이어질 수 있습니다. [3-5] 또한 BCG는 방광암 환자에게 사용되어 면역 체계의 반응을 개선하여 종양 진행 및 사망을 예방합니다. [6] 최근 BCG 백신접종은 인간 단핵구의 후생유전학적 변화를 유도할 수 있으며, 이는 시험관 내에서 관련 없는 병원균으로 재자극 시 더 높은 전염증성 사이토카인 반응을 초래한다는 것이 밝혀졌습니다. [7] 관찰된 효과는 '훈련된 면역'이라고 하는 과정에서 인간 선천 면역 체계의 조절로 인한 것으로 제안됩니다. 병원균으로 자극을 받으면 선천적 면역 체계가 준비되어 2차(비관련) 자극에 더 빠르고 효율적으로 반응할 수 있습니다. [7, 8]

   선천적 숙주 방어에 대한 BCG의 이러한 유익한 효과를 고려할 때, 감염에 더 취약한 T 및 B 세포 면역에 결함이 있는 숙주에서 '훈련된 면역 상태'를 생성하는 것이 도움이 될 것이라는 가설을 세우는 것이 합리적입니다. 그러나 면역이 저하된 상태이기 때문에 이러한 환자는 약독화 생백신(예: 비씨지). [9] γ-조사된 BCG로 백신 접종이 가능할 것이지만, γ-조사된 백신이 선천적 숙주 방어에 대해 동일한 보호 비특이적 효과를 갖는지는 알려지지 않았습니다. 최근의 체외 실험에서 연구자들은 y-조사된 BCG가 체외에서 단핵구를 훈련시킬 수 있음을 입증했습니다(게시되지 않음). 따라서 이 연구의 목적은 감마선 조사 BCG가 이전에 약독화된 BCG 생백신에서 보여진 것처럼 생체 내 건강한 지원자의 인간 선천 면역 체계를 훈련시킬 수 있는지 여부를 결정하는 것입니다[7].

2. 목표

   1차 목표: γ-조사된 BCG로 백신 접종 전, 2주 및 3개월 후 병원체와 체외 재자극 시 사이토카인 생산을 비교하여 γ-조사된 BCG가 생체 내에서 선천 면역 체계를 훈련시킬 수 있는지 확인합니다.

3. 연구 설계

   3개월 동안 탐색적 개입 연구가 수행됩니다. 15명의 건강한 지원자를 모집하여 γ-조사된 BCG로 예방접종을 받을 것입니다. 사전동의 후 예방접종 전과 예방접종 후 2주 3개월에 40ml의 혈액을 채취합니다.

4. 연구 인구 4.1 인구 건강한 지원자, 18 - 55세. 4.2 포함 기준 피험자는 18-55세의 건강한 성인이어야 합니다. 4.3 제외 기준 결핵 발병 국가 출신이거나, 결핵 환자와 접촉한 적이 있거나, 이미 BCG 접종을 받은 경우 제외한다. 병발성 감염을 포함하여 어떤 질병을 앓는 경우 피험자는 연구에서 제외됩니다. 피험자는 경구용 항임상제를 제외한 어떤 약물도 사용할 수 없습니다.

   4.4 표본 크기 계산 이것은 표본 크기 계산이 불가능한 탐색적 시험입니다.

5. 피험자의 치료 5.1 연구 제품/치료 피험자는 Radboud Apotheek B.V.

   BCG 백신의 γ-조사는 Synergy Health Ede B.V., Ede, The Netherlands(네덜란드 경제부에 등록됨)에서 수행합니다. BCG 백신은 JS6500 Tote Box Irradiator에서 평균 32.2kGy 선량으로 원래 포장에서 방사되었습니다. 이 선량은 M. tuberculosis [10, 11]를 죽이기에 충분한 것으로 입증된 25kGy의 문헌에서 허용된 최소 선량을 기반으로 합니다. 방사선 조사 후 백신은 원래 포장을 개봉하지 않은 상태로 반환됩니다. 조사 중에는 선량계가 포함되어 있으므로 각 조사 배치에는 정확한 조사 선량이 사용된 인증서가 함께 제공됩니다.

   5.2 공동 개입의 사용 피험자는 경구 피임약을 제외한 어떤 약물도 사용할 수 없습니다.

6. 연구 제품 6.1 연구 제품의 이름 및 설명 y-조사된 BCG 백신(BCG-Vaccin SSI[Nederlands Vaccin Instituut]) 덴마크 균주 1331.

   6.2 비임상 연구 결과 요약 BCG 백신의 γ-조사에 의한 사멸 효능은 γ-조사된 BCG를 특수 결핵 배양 배지에서 배양하여 검증하였다. 6주 후에 성장이 감지되지 않았습니다.

   6.3 임상 연구 결과 요약 건강한 지원자 20명에게 약독화된 BCG 생백신을 접종한 비교 연구 설정 관련 연구가 이미 완료되었습니다. 조사자의 연구는 동일한 연구 프로토콜을 사용합니다. 유일한 차이점은 약독화된 생 BCG 백신 대신에 y-조사된 BCG 백신이 사용될 것이라는 점입니다.

   6.4 알려지거나 잠재적인 위험과 이점에 대한 요약 자원 봉사자가 얻을 수 있는 명확한 이점은 없습니다. BCG는 안전한 백신으로 간주되기 때문에 잠재적 위험은 매우 적습니다. BCG 접종은 발열, 두통과 같이 주사 부위에 통증과 흉터를 유발할 수 있으며 매우 산발적으로 실신, 경련, 알레르기 반응 등의 부작용이 나타날 수 있습니다. 채혈 부위에 국소 혈종 형성이 발생할 수 있습니다.

   6.5 투여경로 및 용량에 대한 설명 및 타당성 Mycobacterium bovis 0.075mg에 해당하는 현탁백신 0.1ml를 약 10초간 천천히 상완에 투여한다.

7. 방법 7.1 연구 매개변수/종료점 백신 접종 전과 γ-조사된 BCG(2주 및 3개월)로 백신 접종 후 두 가지 다른 시점에서 혈액을 채취하고, 이로부터 PBMC를 Ficoll-Paque를 통한 밀도 원심분리로 분리합니다. 단핵구는 다른 병원체(M. 결핵(1µg/ml), S. aureus, C. albicans(둘 다 1 x 10^6 미생물/ml) 및 대장균 LPS(10ng/ml). 사이토카인 생산은 24시간(TNFα, IL-1b 및 IL-6), 48시간(IFN, IL-10) 및 7일(IL-17, IL-22) 자극 후 평가되고 백신접종 전 사이토카인 생산과 비교됩니다.

7.2 연구 절차 피험자는 γ선 조사된 BCG 백신으로 예방접종을 받습니다. 접종 전, 후 2회 혈액 40ml를 채취합니다.

7.3 개별 피험자의 철회 피험자는 어떠한 결과 없이 원하는 경우 언제든지 어떤 이유로든 연구를 떠날 수 있습니다.

7.4 철회 후 개별 피험자 교체 철회된 각 피험자는 총 15명의 피험자가 후속 조치를 완료하기 위해 교체됩니다.