BCG irradiado con γ para entrenar la inmunidad innata

1. INTRODUCCIÓN Y FUNDAMENTO

   La vacuna viva atenuada Bacillus Calmette-Guerin (BCG) protege contra la infección extrapulmonar por Mycobacterium tuberculosis y contra la lepra [1, 2]. Se ha demostrado que la vacunación con BCG también produce efectos protectores no específicos: la administración temprana de la vacuna BCG podría reducir la mortalidad infantil, principalmente como resultado de la reducción de la sepsis neonatal, las infecciones respiratorias y la fiebre. [3-5] Además, BCG también se ha utilizado en pacientes con cáncer de vejiga, para inducir una mejor reacción del sistema inmunitario, lo que evita la progresión del tumor y la muerte. [6] Recientemente, se demostró que la vacunación con BCG puede inducir cambios epigenéticos en los monocitos humanos, lo que da como resultado una mayor respuesta de citocinas proinflamatorias tras la reestimulación con patógenos no relacionados in vitro. [7] Se propone que los efectos observados se deben a la modulación del sistema inmunitario innato humano, en un proceso denominado "inmunidad entrenada". Tras la estimulación con un patógeno, el sistema inmunológico innato se prepara y puede reaccionar más rápido y de manera más eficiente a un estímulo secundario (y no relacionado). [7, 8]

   Teniendo en cuenta estos efectos beneficiosos de BCG en la defensa innata del huésped, es razonable suponer que sería útil generar un "estado de inmunidad entrenada" en huéspedes con inmunidad de células T y B defectuosa, ya que son más vulnerables a las infecciones. Sin embargo, debido a su estado inmunocomprometido, estos pacientes no pueden vacunarse con vacunas vivas atenuadas (p. BCG). [9] Sería posible la vacunación con BCG irradiada con y, pero no se sabe si la vacuna irradiada con γ tiene los mismos efectos protectores no específicos sobre la defensa innata del huésped. En experimentos in vitro recientes, los investigadores han demostrado que el BCG irradiado con y puede entrenar monocitos in vitro (no publicado). Por lo tanto, el objetivo de este estudio es determinar si la BCG irradiada con γ es capaz de entrenar el sistema inmunitario innato humano de voluntarios sanos in vivo, tal como se demostró anteriormente con la vacuna BCG viva atenuada [7].

2. OBJETIVOS

   Objetivo principal: Determinar si la BCG irradiada con γ puede entrenar el sistema inmunitario innato in vivo, comparando la producción de citoquinas tras la reestimulación ex vivo con patógenos antes, 2 semanas y 3 meses después de la vacunación con BCG irradiada con y.

3. DISEÑO DEL ESTUDIO

   Se realizará un estudio de intervención exploratorio con una duración de tres meses. Se reclutarán 15 voluntarios sanos para recibir una vacuna con BCG irradiada con γ. Después del consentimiento informado, se extraerán 40 ml de sangre antes de la vacunación y a las 2 semanas y 3 meses después de la vacunación.

4. POBLACIÓN DE ESTUDIO 4.1 Población Voluntarios sanos, 18 - 55 años. 4.2 Criterios de inclusión Los sujetos deben ser adultos sanos, de 18 a 55 años de edad. 4.3 Criterios de exclusión Se excluyen los sujetos que sean de países endémicos de tuberculosis, que hayan estado en contacto con pacientes tuberculosos o que ya hayan sido vacunados con BCG. Los sujetos están excluidos del estudio si padecen alguna enfermedad, incluidas las infecciones intercurrentes. Los sujetos no pueden usar ningún medicamento, excepto agentes anticonceptivos orales.

   4.4 Cálculo del tamaño de la muestra Este es un ensayo exploratorio, para el cual no es posible calcular el tamaño de la muestra.

5. TRATAMIENTO DE LOS SUJETOS 5.1 Producto/tratamiento en investigación Los sujetos serán vacunados con una vacuna BCG irradiada con y (BCG-Vaccin SSI [Nederlands Vaccin Instituut]), que se adquiere de Radboud Apotheek B.V.

   La irradiación γ de la vacuna BCG será realizada por Synergy Health Ede B.V., Ede, Países Bajos (registrado por el Ministerio holandés de Asuntos Económicos). La vacuna BCG se irradió en el empaque original con una dosis promedio de 32.2kGy en un Irradiador Tote Box JS6500. Esta dosis se basa en una dosis mínima aceptada en la literatura de 25 kGy, que ha demostrado ser suficiente para matar M. tuberculosis [10, 11] . Después de la irradiación, la vacuna se devolverá sin abrir en el embalaje original. Durante la irradiación se incluye un dosímetro, por lo que cada lote irradiado vendrá acompañado de un certificado con la dosis exacta de irradiación utilizada.

   5.2 Uso de cointervención No se permite que los sujetos usen ningún medicamento, excepto anticoncepción oral.

6. PRODUCTO EN INVESTIGACIÓN 6.1 Nombre y descripción del producto o productos en investigación y-Vacuna BCG irradiada (BCG-Vaccin SSI [Nederlands Vaccin Instituut]) cepa danesa 1331.

   6.2 Resumen de los resultados de los estudios no clínicos La eficacia de la eliminación de la vacuna BCG mediante irradiación γ se verificó cultivando la BCG irradiada con y en un medio de cultivo especial para tuberculosis. No se detectó crecimiento después de seis semanas.

   6.3 Resumen de los resultados de los estudios clínicos Ya se ha realizado un estudio relacionado con un marco de estudio comparable, en el que 20 voluntarios sanos fueron vacunados con la vacuna BCG viva atenuada. [7] El estudio de los investigadores utilizará el mismo protocolo de estudio. La única diferencia es que, en lugar de la vacuna BCG viva atenuada, se utilizará una vacuna BCG irradiada con y.

   6.4 Resumen de riesgos y beneficios conocidos y potenciales No hay beneficios claros para los voluntarios. Los riesgos potenciales son muy pequeños, ya que la BCG se considera una vacuna segura. La vacuna BCG puede causar dolor y cicatrices en el lugar de la inyección, así como fiebre y dolor de cabeza, y efectos secundarios muy esporádicos como síncope, convulsiones y reacciones alérgicas. La formación de hematoma local puede ocurrir en el sitio de la extracción de sangre.

   6.5 Descripción y justificación de la vía de administración y dosificación Administrar en la parte superior del brazo lentamente, en unos 10 segundos, por vía intracutánea 0,1 ml de la vacuna suspendida, lo que representa 0,075 mg de Mycobacterium bovis.

7. MÉTODOS 7.1 Parámetros/criterios de valoración del estudio Antes de la vacunación y en dos momentos diferentes después de la vacunación con BCG irradiado con γ (2 semanas y 3 meses), se extraerá sangre de la que se aislarán las PBMC mediante centrifugación de densidad sobre Ficoll-Paque. Los monocitos serán reestimulados ex-vivo con diferentes patógenos (M. tuberculosis (1 µg/ml), S. aureus, C. albicans (ambos 1 x 10^6 microorganismos/ml) y E. coli LPS (10 ng/ml). La producción de citocinas se evaluará después de 24 h (TNFa, IL 1b e IL-6), 48 h (IFN, IL-10) y 7 días (IL-17, IL-22) de estimulación y se comparará con la producción de citocinas antes de la vacunación.

7.2 Procedimientos del estudio Los sujetos serán vacunados con vacuna BCG irradiada con y. Antes y dos veces después de la vacunación, se extraerán 40 ml de sangre.

7.3 Retiro de sujetos individuales Los sujetos pueden abandonar el estudio en cualquier momento y por cualquier motivo si así lo desean sin ninguna consecuencia.

7.4 Reemplazo de sujetos individuales después del retiro Cada sujeto retirado será reemplazado, de manera que en total 15 sujetos completarán el seguimiento.