흡연자의 치주치료 보조요법으로서의 항균 광역학 요법의 평가

재료 및 방법

검색 동의 - 모든 환자는 본 연구의 동의서 양식에 따라 실험에 대한 자세한 정보(목표, 혜택, 위험 및 불편)를 받게 됩니다. 모든 절차는 상파울루 대학교(USP) Ribeirão Preto Dental School(FORP)의 윤리 위원회(CEP)의 승인을 받아야 합니다.

표본 크기 계산 - 표본 크기는 95% 신뢰 구간(a = 0.05)과 1.0mm의 표준 편차(s)로 그룹 간에 1mm(d)의 유의한 차이를 인식하는 80% 검정력을 제공하도록 결정되었습니다. 평균 임상 애착 수준(CAL)의 변화를 주요 결과 변수로 고려하고 [Za(1.96) + Zb(0.84)]2 = 7.84. 크기 계산은 다음 공식을 기반으로 했습니다: n = {2[(s)2/(d)2]} · (Za + Zb)2. 따라서 총 16명의 환자가 필요했다. 그러나 이 연구에 등록된 환자의 수는 일부 환자가 추적 관찰 중에 소실될 수 있다는 점을 고려하여 20명으로 하였다.

실험 설계 -선택된 피험자는 중재 시작 7일 전에 특정 구강 위생 교육과 모든 치아에 대한 치은연상 스케일링을 받게 됩니다. 연구 유형은 임상, 미생물학적 및 면역학적 평가를 위해 프로빙 깊이 ≥ 5 mm를 나타내는 근위 치주 부위가 있는 두 쌍의 반대측 단근 치아가 있는 분할 입입니다. 난수 테이블은 컴퓨터 프로그램에 의해 생성되며, 선택된 치과 쌍 각각은 다음 치료를 받습니다: SRP 또는 SRP + 여러 aPDT 에피소드. 임상적, 면역학적 및 미생물학적 매개변수는 기준선(개입 전)과 비수술적 치주 치료 완료 후 평가됩니다. 치주 임상 시험(중재 전 및 후)은 이 연구의 실험 그룹을 알지 못하는 훈련되고 보정된 단일 검사자에 의해 수행될 것입니다. 검사관은 또한 면역학적 및 미생물학적 분석을 연구할 수 없습니다. SRP 절차 및 aPDT 프로토콜 사용은 이러한 목적을 위해 다른 교육을 받은 작업자가 수행해야 합니다.

알지네이트로 인상을 각 환자에게 실시하여 치열궁의 모델을 얻고 컴퓨터화된 치주 탐침(Florida Probe System, Florida Probe Corporation, Gainesville, Gainesville, 플로리다, 미국). 각 환자의 눈에 보이는 플라크 지수는 이분법적으로 평가되며(O'Leary et al., 1972) 플라크가 있는 치아 표면의 백분율로 결정됩니다. 각 치아의 6개 부위(mesio-buccal, buccal, distobuccal, mesio-lingual, lingual 및 disto-lingual)에서 임상 치주 매개변수를 평가합니다. 교합판 가이드에서 포켓 바닥까지 측정되는 상대 임상 부착 수준(mm); 탐침 시 출혈, 이분법적으로 평가(Ainamo, Bay, 1976), 탐침 깊이를 측정하기 위해 탐침 삽입 후 20초 이내에 출혈의 존재가 나타나면 양성으로 간주됩니다. 이러한 임상 매개변수와 각 환자의 플라크 지수는 비수술적 치주 치료 후 +30일 및 +90일뿐만 아니라 기준선(중재 전 기간)에 기록됩니다.

검사자 보정 - Kappa 지수는 검사자 간 일치를 측정하기 위해 임상 치주 매개변수 수집을 위한 검사자 보정을 평가하는 데 사용됩니다. 세계보건기구(WHO)의 진단 기준에 따르면 허용 가능한 카파 일치 지수는 0.85 이상이어야 합니다(WHO, 1997). 이 동의 수준은 이 프로젝트에서 심사관의 보정에 사용됩니다. 10명의 환자가 선택되며, 근위 부위에서 탐침 깊이가 5mm 이상인 반대측 치아 단근 2쌍 이상입니다. 각 환자는 1차 검사와 2차 검사 사이에 48시간 간격으로 전산화된 치주 프로브(Probe Corporation Florida, Gainesville, FL, USA)를 사용하여 두 번 스캔하여 Kappa를 결정하여 측정할 검사자 내 신뢰도를 얻습니다. 색인.

면역학적 분석 - 비수술 치주 치료 후 기준선 및 +14, +30 및 +90일에 선택한 치아에서 GCF 샘플을 수집합니다. 치은연상 플라크는 이러한 요소를 제거하고 해당 부위를 에어 제트로 부드럽게 건조시킨 다음 멸균 면봉을 사용하여 분리합니다. GCF 샘플은 근심 및 원위 부위에서 Periopaper 스트립(Oralflow Inc., Amityville, NY, USA)을 사용하여 얻습니다. 스트립을 30초 동안 치은 열구의 가장자리에 조심스럽게 배치합니다. 흡수된 잇몸액의 양은 습윤 질량 Periotron(Oralflow Inc., Amityville, NY)의 전자 측정기로 결정됩니다. 스트립은 나중에 사이토카인(pg/ml) TNF-α, IL-1β 및 IL-10의 정량화를 위해 80C의 온도에서 보관될 유형의 멸균 에펜도르프 바이알에 배치됩니다. 사이토카인 수준은 3-플렉스 키트 Millipore(Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) 100TM 및 Luminex 시스템(Luminex, MiraiBio, Alameda, CA, USA)을 사용하여 결정됩니다.

타액 코티닌 분석 - 코티닌은 니코틴에 대한 환자 노출을 모니터링할 수 있는 니코틴의 대사 산물입니다(McGuire et al., 1989). 코티닌 수준은 제조업체의 지침에 따라 타액 내 코티닌의 정량 분석을 위한 키트를 사용하여 면역 효소 분석(ELISA)(Salimetrics Inc., State College, PA, USA)에 의해 기준선에서 확인됩니다.

미생물학적 분석 - 기준선과 +30일 및 +90일에 비외과적 치주 치료를 수행한 후 선택한 치아의 치은연하 플라크 샘플을 근위 치주낭(근심 및 원위)에서 수집합니다. 40개의 치은연하 종의 수는 체커보드 DNA-DNA 혼성화 방법을 사용하여 각 샘플에서 결정됩니다(Birth et al., 2008). 치은연하 플라크 수집을 위해 부위를 멸균 면 롤러로 분리하고 에어 제트로 건조시킵니다. 치은연상 플라크는 멸균 큐렛을 사용하여 조심스럽게 제거됩니다. 이어서 다른 멸균 큐렛을 사용하여 포켓의 가장 깊은 부분에서 시작하여 치은연하 플라크를 수집합니다. 샘플은 멸균된 Eppendorf 바이알로 운반되어 Ribeirão Preto-USP 치과대학의 치과 분자 진단 실험실에서 처리됩니다.

비수술적 치주 치료 - 비수술적 치주 치료 7일 전 모든 환자는 전체 구강에 대한 완전한 치근단 주위 방사선 검사를 수행합니다. 그들은 특정 필요에 따라 구강 위생 프로그램(OHP)으로 그룹화됩니다. 이 프로그램에서 환자는 Bass 기술(Bass, 1954)과 치실 및 치간 칫솔을 사용한 치간 세척에 대한 정보를 포함하여 효과적인 자가 플라크에 대한 지침을 받게 됩니다. 그들은 또한 하루에 한 번 혀를 닦고 전체 실험 기간 동안 사용할 단일 치약을 받도록 권장됩니다(Colgate Total, Anakol Ind. Com. Ltda - Kolynos do Brasil - Colgate Palmolive Co., São Bernardo do Campo, SP, Brasil). 이 구강 위생 프로그램을 완료한 후 환자는 이전에 설명한 임상 치주 매개변수 평가를 받게 되며 선택한 부위에서 치은연하 플라크 및 GCF 샘플을 수집합니다(기준선 - 개입 전 기간). 곧이어 구강의 모든 치아에 관상 고무 컵을 사용하여 치은연상 스케일링 및 연마를 받게 됩니다.

비수술적 치주 치료는 OHP 및 초기 치은연상 스케일링 실행 후 7일 후에 시작됩니다. 치료는 손을 사용하여 치주 질환이 있는 모든 치아의 스케일링(치은연상 및 치은연하) 및 치근 활택에 의해 24시간 간격으로 치주학 전문가에 의해 이루어집니다(Curetas Gracey, Hu-Friedy, Chicago, IL, EUA). 및 초음파 도구. 기기는 구역을 적절하게 청소하고 뿌리 대패질을 할 때까지 사분면에서 사분면으로 유지되며, 이는 탐색기의 도움으로 확인됩니다. 개인은 비외과적 치주 치료 종료 후 최대 3개월까지 격주로 전문적인 청소를 받게 됩니다. Fortnightly 제어 및 평가에서 구강 위생 상태를 확인하면서 연구에 대한 환자 협력을 모니터링합니다.

통계 분석 - 데이터의 정규성과 등분산성을 확인합니다. 서로 다른 시간 간격의 그룹 간 및 그룹 내 비교는 적절한 파라메트릭 또는 비파라메트릭 테스트를 통해 달성됩니다. 모든 통계 분석에서는 5% 유의 수준을 사용합니다. 모든 계산은 SPSS 소프트웨어(SPSS, Chicago IL, EUA)를 사용하여 수행됩니다.