Vergelijking van morfometrische beoordeling met behulp van Methyl Green Pyronin en AgNOR-kleuring van oraal plaveiselcelcarcinoom (OSCC)

Mondkanker, een belangrijk wereldwijd gezondheidsprobleem, staat wereldwijd op de zesde plaats met een duidelijke variatie in de geografische spreiding. Het is gerangschikt als de derde meest voorkomende vorm van kanker in de derde wereld, na maag- en baarmoederhalskanker. Van de orale kankers is het orale plaveiselcelcarcinoom verantwoordelijk voor meer dan 90% van de gevallen.

Van de ontwikkelingslanden vertegenwoordigt het Indo-Pak-subcontinent een derde van de wereldwijde orale kankerlast. Carcinoom van de mondholte in Pakistan, een van de landen met een hoog risico, is de tweede meest voorkomende vorm van kanker bij beide geslachten. Met differentiële verdeling over subpopulaties vertegenwoordigt het 8,8% van alle gemelde gevallen van kanker. De meest overheersende risicofactoren zijn het roken van tabak, het kauwen van betel en alcohol.

Screening en specifieke diagnostische hulpmiddelen zijn twee innovatieve benaderingen voor vroege opsporing van mondkanker. Conventioneel oraal onderzoek en klinische evaluatie blijven de basis van screeningbenaderingen, terwijl chirurgische biopsie gevolgd door histologische analyse wordt gezien als de gouden standaard voor het diagnosticeren van kwaadaardige orale laesies. Bovendien kunnen sommige aanvullende technieken bijdragen aan de diagnose van mondkanker. Van deze vitale kleuring staan ​​DNA-analyse, chemiluminescentie, weefselfluorescentie, op licht gebaseerde detectiesystemen en biomarkers nu op de voorgrond.

Biomarkers zijn waardevol geweest bij het onthullen van aanvullende informatie over tumorpathologie, waaronder de inactivering van tumorsuppressorgenen, angiogenese, apoptose en celproliferatie. Afwijkingen in proliferatiekinetiek zijn de meest dwingende factor tijdens tumorprogressie. Drie hoofdcategorieën van celproliferatiemarkers omvatten groeifractiemarkers zoals Ki67, cyclusspecifieke markers zoals PCNA (Proliferating Cellular Nuclear Antigen) en celcyclustijdmarkers zoals AgNOR. Tijdens maligniteit worden proliferatie en eiwitsynthese voornamelijk gecontroleerd door de kern.

Nucleolar Organizer Regions (NOR's) zijn DNA-lussen op de korte armen van acrocentrische chromosomen die vermoedelijk geassocieerd zijn met celproliferatie. Sommige van de NOR-geassocieerde eiwitten zijn argyrofiel en kunnen worden aangetoond als zwarte stippen door de zilverkleuringstechniek en de aldus gedemonstreerde structuren staan ​​bekend als AgNOR's. De AgNOR kwantitatieve parameters geven informatie over de snelheid van celproliferatie tijdens de celcyclus. Neoplastische progressie wordt meer beïnvloed door de snelheid van celproliferatie dan door de proliferatieve activiteit op zich.

Hoewel AgNOR-kleuring en AgNOR-kwantificering waardevolle methoden zijn bij de histopathologische evaluatie van maligniteiten, zijn er ook bepaalde beperkingen aan deze techniek verbonden. Dergelijke AgNOR-geassocieerde tekortkomingen omvatten nucleolaire affiniteit voor zilverkleuring die de individuele AgNOR's verduistert in gevallen van intense kleuring, overlapping in variabele mate tussen hoge en laaggradige tumoren, moeilijkheid om doubletten of clusters te onderscheiden met lichtmicroscopie, verkeerd geïnterpreteerde vlekafzetting als proliferatieve activiteit samen met sommige technische problemen van kleuring en fixatie.

Methyl Green Pyronin (MGP)-kleuring is een differentiële kleuring die wordt gebruikt voor selectieve kleuring van DNA en RNA. Methylgroen bindt specifiek aan deoxyribonucleïnezuur (DNA), kleurt kernen groen, terwijl pyronine specifiek is voor ribonucleïnezuur (RNA), kleurt nucleoli rood. Methylgroene pyroninekleuring is ook gebruikt om onderscheid te maken tussen prolifererende en gededifferentieerde niet-prolifererende celkernen. Op dezelfde manier om de afbraak van DNA in folliculaire epitheelcellen van de schildklier te beoordelen, is deze kleuring ook nuttig gebleken.

Morfometrie is een belangrijke vooruitgang geweest bij het afbakenen van de volgorde van gebeurtenissen die verantwoordelijk zijn voor de progressie van kanker. Variaties in nucleaire en cellulaire grootte en vorm hebben grotere implicaties bij de beoordeling van neoplastische laesies. Methyl Green Pyronin (MGP) -kleuring heeft de laatste tijd de aandacht getrokken omdat het is gebruikt om verschillende nucleaire morfometrische parameters in borstneoplasmata te evalueren. Door methylgroen-pyroninekleuring te gebruiken, kunnen niet alleen de tekortkomingen die gepaard gaan met AgNOR-kleuring worden verminderd, maar kunnen ook de morfometrische parameters voor het evalueren van veranderingen in de nucleus en nucleolus tijdens carcinogenese worden bereikt.

Tot nu toe lijkt AgNOR-kleuring een nuttig diagnostisch hulpmiddel te zijn bij oraal plaveiselcelcarcinoom voor onderzoek van de nucleolaire structuur en variaties in nucleolaire activiteit. Aan de andere kant is MGP-kleuring gebruikt bij het beoordelen van de kankerachtige laesies van borst en schildklier en is onlangs uitgebreid naar orale laesies. Er zijn echter nog geen studies uitgevoerd om de morfometrische parameters te evalueren en te vergelijken met behulp van deze twee vlekken in normaal oraal epitheel en oraal plaveiselcelcarcinoom. Evenzo zijn er zeer weinig studies uitgevoerd met betrekking tot de toepassing van methylgroene pyroninekleuring bij orale pathologieën.

Daarom is de huidige studie gepland om de morfometrische parameters van normaal oraal epitheel en oraal plaveiselcelcarcinoom te evalueren met behulp van methylgroene pyroninekleuring; bovendien zullen deze bevindingen ook worden vergeleken met die van AgNOR-kleuring. In dit huidige scenario kunnen kleuring met methylgroen pyronine en morfometrische analyse hand in hand gaan om een ​​betere diagnose en vroege detectie van mondkanker te bieden.