Comparaison de l'évaluation morphométrique à l'aide de la pyronine au vert de méthyle et de la coloration AgNOR du carcinome épidermoïde de la bouche (OSCC)

Le cancer de la bouche, problème de santé mondial majeur, occupe la sixième place mondiale avec une répartition géographique très variable. Il est classé au troisième rang des cancers les plus fréquents dans les pays en développement après les cancers de l'estomac et du col de l'utérus. Parmi les cancers de la bouche, le carcinome épidermoïde de la bouche représente plus de 90 % des cas.

Parmi les pays en développement, le sous-continent Indo-Pak représente un tiers du fardeau mondial du cancer de la bouche. Le carcinome de la cavité buccale au Pakistan, l'un des pays à haut risque, est le deuxième cancer le plus fréquent chez les deux sexes. Avec une répartition différentielle entre les sous-populations, il représente 8,8 % de tous les cas de cancer déclarés. Les facteurs de risque les plus prédominants sont le tabagisme, la mastication du bétel et l'alcool.

Le dépistage et les outils de diagnostic spécifiques sont deux approches innovantes pour la détection précoce du cancer de la bouche. L'examen oral conventionnel et l'évaluation clinique restent le fondement des approches de dépistage, tandis que la biopsie chirurgicale suivie d'une analyse histologique est considérée comme l'étalon-or pour le diagnostic des lésions buccales malignes. De plus, certaines techniques complémentaires peuvent contribuer au diagnostic du cancer de la bouche. Parmi ces colorations vitales, l'analyse de l'ADN, la chimiluminescence, la fluorescence des tissus, les systèmes de détection basés sur la lumière et les biomarqueurs sont désormais au premier plan.

Les biomarqueurs ont été précieux pour révéler des informations supplémentaires sur la pathologie tumorale, y compris l'inactivation des gènes suppresseurs de tumeurs, l'angiogenèse, l'apoptose et la prolifération cellulaire. Les aberrations de la cinétique de prolifération sont le facteur le plus impératif lors de la progression tumorale. Trois principales catégories de marqueurs de prolifération cellulaire comprennent les marqueurs de fraction de croissance comme Ki67, les marqueurs spécifiques au cycle comme PCNA (Proliferating Cellular Nuclear Antigen) et les marqueurs de temps de cycle cellulaire comme AgNOR. Au cours de la malignité, la prolifération et la synthèse des protéines sont principalement contrôlées par le noyau.

Les régions organisatrices nucléolaires (NOR) sont des boucles d'ADN sur les bras courts des chromosomes acrocentriques qui sont vraisemblablement associées à la prolifération cellulaire. Certaines des protéines associées au NOR sont argyrophiles et peuvent être mises en évidence sous forme de points noirs par la technique de coloration à l'argent et les structures ainsi mises en évidence sont appelées AgNOR. Les paramètres quantitatifs AgNOR fournissent des informations sur la vitesse de prolifération cellulaire au cours du cycle cellulaire. La progression néoplasique est davantage affectée par le taux de prolifération cellulaire que par l'activité proliférative en soi.

Bien que la coloration AgNOR et la quantification AgNOR soient des méthodes précieuses dans l'évaluation histopathologique des tumeurs malignes, certaines limitations ont également été associées à cette technique. Ces défauts associés à AgNOR comprennent l'affinité nucléolaire pour la coloration à l'argent obscurcissant les AgNOR individuels en cas de coloration intense, le chevauchement de degré variable entre les tumeurs de haut et de bas grade, la difficulté à discerner les doublets ou les grappes par microscopie optique, le dépôt de colorant mal interprété comme une activité proliférative avec certains problèmes techniques de coloration et de fixation.

La coloration au vert de méthyle pyronine (MGP) est une coloration différentielle utilisée pour la coloration sélective de l'ADN et de l'ARN. Le vert de méthyle se lie spécifiquement à l'acide désoxyribonucléique (ADN), colorant les noyaux en vert, tandis que la pyronine est spécifique de l'acide ribonucléique (ARN), colorant les nucléoles en rouge. La coloration au vert de méthylpyronine a également été utilisée pour faire la distinction entre les noyaux cellulaires proliférants et dédifférenciés non proliférants. De même pour évaluer la dégradation de l'ADN dans les cellules épithéliales folliculaires thyroïdiennes, cette coloration s'est également avérée utile.

La morphométrie a été une avancée significative dans la délimitation de la séquence d'événements responsables de la progression du cancer. Les variations de taille et de forme nucléaires et cellulaires ont des implications plus importantes dans l'évaluation des lésions néoplasiques. La coloration Methyl Green Pyronin (MGP) a attiré l'attention ces derniers temps car elle a été utilisée pour évaluer divers paramètres morphométriques nucléaires dans les néoplasmes du sein. En utilisant la coloration au vert de méthyle-pyronine, non seulement les insuffisances associées à la coloration AgNOR peuvent être atténuées, mais également les paramètres morphométriques pour évaluer les changements dans le noyau et le nucléole pendant la carcinogenèse peuvent être accomplis.

Jusqu'à présent, la coloration AgNOR semble être un outil de diagnostic utile dans le carcinome épidermoïde oral pour l'examen de la structure nucléolaire et des variations de l'activité nucléolaire. D'autre part, la coloration MGP a été utilisée pour évaluer les lésions cancéreuses du sein et de la glande thyroïde et a récemment été étendue aux lésions buccales. Cependant, aucune étude n'a encore été entreprise pour évaluer et comparer les paramètres morphométriques à l'aide de ces deux colorants dans l'épithélium buccal normal et le carcinome épidermoïde de la bouche. De même, très peu d'études ont été entreprises concernant l'application de la coloration au vert de méthyle pyronine dans les pathologies buccales.

Par conséquent, l'étude actuelle a été planifiée pour évaluer les paramètres morphométriques parmi l'épithélium buccal normal et le carcinome épidermoïde oral à l'aide de la coloration au vert de méthyle pyronine ; de plus, ces résultats seront également comparés à ceux de la coloration AgNOR. Dans ce scénario actuel, la coloration au vert de méthyl pyronine et l'analyse morphométrique peuvent aller de pair pour fournir un meilleur diagnostic et une détection précoce du cancer de la bouche.