Comparação da Avaliação Morfométrica Usando Pironina Verde de Metila e Coloração AgNOR de Carcinoma de Células Escamosas Oral (OSCC)

O cancro oral, um dos principais problemas de saúde a nível mundial ocupa a sexta posição a nível mundial com uma variação acentuada na sua distribuição geográfica. É classificado como o terceiro câncer mais frequente no mundo em desenvolvimento, depois dos cânceres de estômago e colo do útero. Dentre os cânceres bucais, o carcinoma escamoso oral corresponde a mais de 90% dos casos.

Fora dos países em desenvolvimento, o subcontinente Indo-Pak representa um terço da carga global de câncer oral. O carcinoma da cavidade oral no Paquistão, um dos países de alto risco, é o segundo câncer mais frequente em ambos os sexos. Com distribuição diferenciada entre subpopulações, representa 8,8% de todos os casos de câncer notificados. Os fatores de risco mais predominantes incluem tabagismo, mascar betel e álcool.

A triagem e as ferramentas de diagnóstico específicas são duas abordagens inovadoras para a detecção precoce do câncer bucal. O exame oral convencional e a avaliação clínica continuam sendo a base das abordagens de triagem, enquanto a biópsia cirúrgica seguida de análise histológica é considerada o padrão-ouro para o diagnóstico de lesões orais malignas. Além disso, algumas técnicas auxiliares podem contribuir para o diagnóstico do câncer bucal. Destas colorações vitais, a análise de DNA, quimioluminescência, fluorescência de tecido, sistemas de detecção baseados em luz e biomarcadores estão agora na vanguarda.

Os biomarcadores têm sido valiosos para revelar informações adicionais sobre a patologia do tumor, incluindo a inativação de genes supressores de tumor, angiogênese, apoptose e proliferação celular. As aberrações na cinética da proliferação são o fator mais importante durante a progressão do tumor. Três categorias principais de marcadores de proliferação celular incluem marcadores de fração de crescimento como Ki67, marcadores específicos de ciclo como PCNA (Proliferating Cellular Nuclear Antigen) e marcadores de tempo de ciclo celular como AgNOR. Durante a malignidade, a proliferação e a síntese de proteínas são controladas principalmente pelo núcleo.

As Regiões Organizadoras Nucleolares (NORs) são loops de DNA nos braços curtos dos cromossomos acrocêntricos que presumivelmente estão associados à proliferação celular. Algumas das proteínas associadas a NOR são argirofílicas e podem ser demonstradas como pontos pretos pela técnica de coloração de prata e as estruturas assim demonstradas são conhecidas como AgNORs. Os parâmetros quantitativos do AgNOR fornecem informações sobre a velocidade da proliferação celular durante o ciclo celular. A progressão neoplásica é mais afetada pela taxa de proliferação celular do que pela atividade proliferativa per se.

Embora a coloração de AgNOR e a quantificação de AgNOR sejam métodos valiosos na avaliação histopatológica de malignidades, certas limitações também foram associadas a esta técnica. Tais deficiências associadas ao AgNOR incluem afinidade nucleolar para manchas de prata obscurecendo os AgNORs individuais em casos de coloração intensa, sobreposição de grau variável entre tumores de alto e baixo grau, dificuldade em discernir duplas ou aglomerados por microscopia de luz, deposição de manchas mal interpretada como atividade proliferativa junto com alguns problemas técnicos de coloração e fixação.

O corante Metil Verde Pironina (MGP) é um corante diferencial usado para coloração seletiva de DNA e RNA. O verde de metila liga-se especificamente ao ácido desoxirribonucléico (DNA), corando os núcleos de verde, enquanto a pironina é específica para o ácido ribonucléico (RNA), corando os nucléolos de vermelho. A coloração verde de metil pironina também tem sido usada para distinguir entre núcleos celulares proliferantes e não proliferativos indiferenciados. Da mesma forma para avaliar a degradação do DNA nas células epiteliais foliculares da tireoide, essa coloração também provou ser útil.

A morfometria tem sido um avanço significativo no delineamento da sequência de eventos responsáveis ​​pela progressão do câncer. As variações no tamanho e na forma nuclear e celular têm maiores implicações na avaliação das lesões neoplásicas. A coloração Methyl Green Pyronin (MGP) tem chamado a atenção nos últimos tempos, pois tem sido utilizada para avaliar diversos parâmetros morfométricos nucleares em neoplasias mamárias. Ao usar a coloração verde de metila-pironina, não apenas as inadequações associadas à coloração AgNOR podem ser diminuídas, mas também os parâmetros morfométricos para avaliar as alterações no núcleo e nucléolo durante a carcinogênese.

Até agora, a coloração AgNOR parece ser uma ferramenta diagnóstica útil no carcinoma oral de células escamosas para exame da estrutura nucleolar e variações na atividade nucleolar. Por outro lado, a coloração MGP tem sido usada na avaliação de lesões cancerígenas da mama e da glândula tireoide e, recentemente, foi estendida para lesões orais. No entanto, ainda não foram realizados estudos para avaliar e comparar os parâmetros morfométricos usando essas duas manchas no epitélio oral normal e no carcinoma epidermóide oral. Da mesma forma, poucos estudos foram realizados sobre a aplicação da coloração verde de metil pironina em patologias orais.

Portanto, o presente estudo foi planejado para avaliar os parâmetros morfométricos entre o epitélio oral normal e o carcinoma oral de células escamosas usando coloração verde de metil pironina; além disso, esses achados também serão comparados com os da coloração AgNOR. Neste cenário atual, a coloração com verde de metil pironina e a análise morfométrica podem ser aliadas para fornecer um melhor diagnóstico e detecção precoce do câncer bucal.