Biotilgjengelighet og fordelaktige egenskaper til kaffe og kakao bioaktive forbindelser (P4L)

En human biotilgjengelighetsstudie vil bli utført for å nå de ovenfor beskrevne målene. Den menneskelige intervensjonsstudien vil bestå av en kortsiktig randomisert cross-over-studie, rettet mot å måle de daglige gjennomsnittskonsentrasjonene av hver kaffe/kakao-avledet sirkulerende metabolitt (CCDCM) for de fire hovedgruppene av kaffe/kakao fytokjemikalier (metylxanthiner, trigonelline). , fenoler, diterpener). På grunnlag av ulike forbruksmønstre vil denne frittlevende studien (selv om noen minimale diettbegrensninger vil bli gitt to dager før prøvetakingstider) også ta hensyn til effektene av gjentatte doser på biotilgjengeligheten til kaffe/kakao bioaktive stoffer.

Studien vil følge en gjentatt dose, 3-arm, cross-over design. Dette designet er valgt i henhold til ILSIs retningslinjer for intervensjonsforsøk med kostholdsprodukter.

Forsøkspersonene ble gitt til å konsumere følgende behandlinger i tilfeldig rekkefølge i 1 måned:

1. 1 kopp espressokaffe/dag ("lavforbrukere") kl. 9.00
2. 3 kopper espressokaffe/dag ("høyforbrukere") kl. 9.00, 12.00 og 15.00.
3. 1 kopp espressokaffe til frokost kl. 9.00 og 2 kakaobaserte produkter som inneholder kaffe to ganger om dagen (kl. 12.00 og 15.00). Gruppen vil bli kalt "middels forbrukere", med tanke på koffeininnholdet i de kakaobaserte produktene som inneholder kaffe.

Minimumsanbefalinger for å unngå andre kilder til kaffe/kakao-fytokjemikalier enn det som ble introdusert gjennom den tildelte behandlingen, og for å standardisere tidspunktet for kaffeforbruket, vil bli gitt for de to dagene før hver prøvedag og på prøvetakingsdagen. Middagstidspunkt og sammensetning vil også bli standardisert dagen før prøvetakingsdagen. Bare vann kunne drikkes om natten. På prøvetakingsdagen (dvs. den siste dagen i hver intervensjonsperiode) vil forsøkspersonene henvise til ambulatoriet om morgenen hvor fastende baseline-blod- og urinprøver vil bli tatt. Deretter vil lave og høye forbrukere drikke henholdsvis en eller tre kopper espressokaffe (uten sukker, søtningsmidler og melk til den første kaffen; med 5 g sukker for de to siste kaffene), mens middels forbrukere vil drikke en kopp espressokaffe og 2 kakaobaserte produkter som inneholder kaffe to ganger i løpet av dagen, etter den ovenfor beskrevne timingen. Etter inntak av den første kaffen sammen med en fytokjemikaliefri frokost (et bakverk), vil blod- og urinprøver bli samlet inn på utvalgte tidspunkter i løpet av de påfølgende 24-t. Fem timer etter inntak av den første kaffen vil deltakerne motta et standardisert blandet måltid (smørbrød med skinke og ost) uten kaffe/kakao fytokjemikalierelaterte forbindelser. Vann vil være tilgjengelig ad libitum. Tjuefire timer etter mottatt behandling vil det også bli tatt blod- og urinprøver for å vurdere retur til baseline. I tillegg vil antropometriske egenskaper og blodtrykk (BP) bli målt.

Sosiodemografiske variabler vil bli vurdert gjennom et generisk spørreskjema fylt ut ved rekruttering. Spørreskjemaet vil også inneholde spørsmål som er nyttige for å identifisere mulige eksklusjonskriterier (f. diagnose for sykdommer, regelmessig inntak av medisiner, matallergi). Kostvaner til frivillige vil også bli evaluert under påmeldingen, gjennom et semi-kvantitativt spørreskjema for matfrekvens (FFQ) for vurdering av kostholdets totale antioksidantkapasitet. I tillegg vil deltakernes matinntak og overholdelse av studiekravene bli vurdert ved hjelp av 3-dagers kostholdsjournaler, administrert gjennom hver intervensjonsperiode på to tidspunkt: i) midt i hver intervensjonsperiode i løpet av to ukedager og en helg dag, og ii) ved slutten av hver intervensjonsperiode, 2 dager før prøvetakingsdagen og prøvetakingsdagen. Det vanlige fysiske aktivitetsnivået til hver deltaker vil bli målt gjennom et validert internasjonalt spørreskjema for fysisk aktivitet.

Blodprøvetaking vil bli utført i ambulatorisk enhet ved Avdeling for medisin og kirurgi. Blodprøvetaking vil bli utført av en lege. Et venekateter vil bli satt inn i den antecubitale venen og blodprøver fra hvert individ vil bli samlet i spesifikke rør over 24 timer. Blodprøvetaking på tidspunktet 24 timer etter første kaffeinntak vil bli utført ved venepunktur. Urinprøver vil bli tatt i ulike tidsperioder ved hjelp av urinsamlere.

Blodprøver vil bli sentrifugert og plasma-, serum- og mononukleære celler fra perifert blod (PBMC-er) vil bli samlet, alikvotert og lagret ved -80 °C for videre prosessering. Urinprøver vil bli alikvotert og lagret ved -80°C for videre behandling.

Det primære utvalgte endepunktet for studien er kvantifiseringen av den daglige gjennomsnittlige konsentrasjonen av kaffeavledede plasmasirkulerende fenoliske metabolitter, mens studiet av biotilgjengeligheten til andre kaffeavledede sirkulerende bioaktive stoffer, biotilgjengeligheten til sirkulerende fytokjemikalier av kakao, og vurderingen. av kardiometabolske markører vil bli betraktet som sekundære endepunkter.