Biodisponibilidade e propriedades benéficas dos compostos bioativos do café e do cacau (P4L)

Um estudo de biodisponibilidade humana será realizado para atingir os objetivos descritos acima. O estudo de intervenção humana consistirá em um ensaio cruzado randomizado de curto prazo, destinado a medir as concentrações médias diárias de cada metabólito circulante derivado do café/cacau (CCDCM) para os quatro grupos principais de fitoquímicos do café/cacau (metilxantinas, trigonelina , fenólicos, diterpenos). Com base em diferentes padrões de consumo, este estudo de vida livre (embora algumas restrições dietéticas mínimas sejam fornecidas dois dias antes dos horários de amostragem) também levará em consideração os efeitos de doses repetidas na biodisponibilidade dos bioativos do café/cacau.

O estudo seguirá um desenho cruzado de dose repetida, 3 braços. Este design foi escolhido de acordo com as diretrizes do ILSI para ensaios de intervenção com produtos dietéticos.

Os indivíduos foram designados para consumir os seguintes tratamentos em ordem aleatória por 1 mês:

1. 1 xícara de café expresso/dia ("baixos consumidores") às 9h00.
2. 3 xícaras de café expresso/dia ("altos consumidores") às 9h00, 12h00 e 15h00
3. 1 xícara de café expresso no café da manhã 9h00 e 2 produtos à base de cacau contendo café duas vezes ao dia (às 12h00 e às 15h00). O grupo será denominado “consumidores médios”, considerando o teor de cafeína dos produtos à base de cacau que contêm café.

Recomendações mínimas para evitar outras fontes de fitoquímicos do café/cacau além das introduzidas pelo tratamento designado e para padronizar o horário de consumo do café serão fornecidas nos dois dias anteriores a cada dia de amostragem e no dia da amostragem. O horário e a composição do jantar também serão padronizados no dia anterior ao dia da amostragem. Só água podia ser bebida durante a noite. No dia da amostragem (ou seja, o último dia de cada período de intervenção), os sujeitos serão encaminhados pela manhã ao ambulatório onde serão coletadas amostras de sangue e urina em jejum. Então, os consumidores médios e superiores beberão uma ou três xícaras de café expresso, respectivamente (sem açúcar, adoçantes e leite no primeiro café; com 5 g de açúcar nos dois últimos cafés), enquanto os consumidores médios beberão uma xícara de café expresso e 2 produtos à base de cacau contendo café duas vezes ao dia, seguindo o horário descrito acima. Após a ingestão do primeiro café juntamente com um café da manhã isento de fitoquímicos (um pastel), amostras de sangue e urina serão coletadas em pontos de tempo selecionados ao longo das 24 horas seguintes. Cinco horas após o consumo do primeiro café, os participantes receberão uma refeição mista padronizada (sanduíche com presunto e queijo) livre de compostos fitoquímicos relacionados ao café/cacau. A água estará disponível ad libitum. Vinte e quatro horas após receber o tratamento, amostras de sangue e urina também serão coletadas para avaliar o retorno à linha de base. Além disso, serão aferidas as características antropométricas e a pressão arterial (PA).

As variáveis ​​sociodemográficas serão avaliadas através de um questionário genérico preenchido no momento do recrutamento. O questionário também conterá perguntas úteis para identificar possíveis critérios de exclusão (por exemplo, diagnóstico de doenças, consumo regular de medicamentos, alergia alimentar). Os hábitos alimentares dos voluntários também serão avaliados durante o recrutamento, por meio de um questionário semi-quantitativo de frequência alimentar (QFA) para avaliação da capacidade antioxidante total da dieta. Além disso, a ingestão alimentar dos participantes e o cumprimento dos requisitos do estudo serão avaliados por meio de registros alimentares de 3 dias, administrados ao longo de cada período de intervenção em dois momentos: i) no meio de cada período de intervenção durante dois dias da semana e um fim de semana dia, e ii) no final de cada período de intervenção, 2 dias antes do dia da amostragem e do dia da amostragem. O nível de atividade física habitual de cada participante será medido através de um Questionário Internacional de Atividade Física validado.

A coleta de sangue será realizada no ambulatório do Departamento de Medicina e Cirurgia. A coleta de sangue será realizada por um médico. Um cateter venoso será inserido na veia antecubital e amostras de sangue de cada sujeito serão coletadas em tubos específicos ao longo de 24 horas. A coleta de sangue no ponto temporal 24h após o primeiro consumo de café será feita por punção venosa. Amostras de urina serão coletadas durante diferentes períodos de tempo usando coletores de urina.

Amostras de sangue serão centrifugadas e plasma, soro e células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) serão coletadas, aliquotadas e armazenadas a -80 °C para posterior processamento. As amostras de urina serão divididas em alíquotas e armazenadas a -80°C para posterior processamento.

O objetivo principal selecionado do estudo é a quantificação da concentração média diária de metabólitos fenólicos circulantes no plasma derivados do café, enquanto o estudo da biodisponibilidade de outros bioativos circulantes derivados do café, a biodisponibilidade de fitoquímicos circulantes derivados do cacau e a avaliação de marcadores cardiometabólicos serão considerados desfechos secundários.