Биодоступность и полезные свойства биоактивных соединений кофе и какао (P4L)

Для достижения вышеописанных целей будет проведено исследование биодоступности у человека. Исследование с участием человека будет состоять из краткосрочного рандомизированного перекрестного исследования, направленного на измерение среднесуточных концентраций каждого циркулирующего метаболита, полученного из кофе/какао (CCDCM), для четырех основных групп фитохимических веществ кофе/какао (метилксантины, тригонеллин). фенолы, дитерпены). На основе различных моделей потребления в этом свободном исследовании (хотя некоторые минимальные диетические ограничения будут предоставлены за два дня до времени отбора проб) также будет учитываться влияние повторных доз на биодоступность биоактивных веществ кофе/какао.

Исследование будет проходить по перекрестному дизайну с повторными дозами в 3 группах. Этот дизайн был выбран в соответствии с рекомендациями ILSI по интервенционным испытаниям диетических продуктов.

Субъектам было назначено принимать следующие препараты в случайном порядке в течение 1 месяца:

1. 1 чашка кофе эспрессо в день («низкие потребители») в 9:00.
2. 3 чашки кофе эспрессо в день («высокие потребители») в 9:00, 12:00 и 15:00.
3. 1 чашка кофе эспрессо за завтраком в 9:00. и 2 продукта на основе какао, содержащие кофе, два раза в день (в 12:00 и 15:00). Группа будет называться «средние потребители», учитывая содержание кофеина в продуктах на основе какао, содержащих кофе.

Минимальные рекомендации по избеганию других источников фитохимических веществ кофе/какао, помимо тех, что попадают в результате назначенной обработки, и по стандартизации времени потребления кофе будут предоставлены за два дня до каждого дня отбора проб и в день отбора проб. Время и состав ужина также будут стандартизированы за день до дня отбора проб. Ночью можно было пить только воду. В день отбора проб (т. е. в последний день каждого периода вмешательства) субъекты будут направлены утром в амбулаторное отделение, где будут собраны исходные образцы крови и мочи натощак. Тогда потребители с низким и высоким уровнем выпивают соответственно одну или три чашки кофе эспрессо (без сахара, подсластителей и молока для первого кофе; с 5 г сахара для двух последних), а потребители среднего уровня выпивают чашку кофе эспрессо соответственно. кофе эспрессо и 2 продукта на основе какао, содержащих кофе, два раза в день в соответствии с описанным выше временем. После приема первого кофе вместе с завтраком без фитохимических веществ (выпечка) образцы крови и мочи будут собираться в выбранные моменты времени в течение следующих 24 часов. Через пять часов после употребления первого кофе участники получат стандартизированный смешанный обед (бутерброд с ветчиной и сыром), не содержащий соединений, связанных с фитохимическими свойствами кофе/какао. Вода будет доступна вволю. Через двадцать четыре часа после получения лечения также будут взяты образцы крови и мочи, чтобы оценить возвращение к исходному уровню. Кроме того, будут измеряться антропометрические характеристики и артериальное давление (АД).

Социально-демографические переменные будут оцениваться с помощью общей анкеты, заполняемой при приеме на работу. Анкета также будет содержать вопросы, полезные для определения возможных критериев исключения (например, диагностика заболеваний, регулярный прием лекарств, пищевая аллергия). Диетические привычки добровольцев также будут оцениваться во время регистрации с помощью полуколичественного вопросника частоты приема пищи (FFQ) для оценки общей антиоксидантной способности рациона. Кроме того, потребление пищи участниками и соответствие требованиям исследования будут оцениваться с помощью 3-дневных записей о питании, которые будут вестись в течение каждого периода вмешательства в двух временных точках: i) в середине каждого периода вмешательства в течение двух будних дней и выходных. день, и ii) в конце каждого периода вмешательства, за 2 дня до дня отбора проб и дня отбора проб. Привычный уровень физической активности каждого участника будет измеряться с помощью утвержденных международных опросников физической активности.

Забор крови будет осуществляться в амбулаторном отделении Медико-хирургического отделения. Забор крови проводит врач. Венозный катетер будет вставлен в локтевую вену, и образцы крови от каждого субъекта будут собраны в специальные пробирки в течение 24 часов. Забор крови через 24 часа после первого употребления кофе будет осуществляться путем венепункции. Образцы мочи будут собираться в разные периоды времени с помощью сборщиков мочи.

Образцы крови будут центрифугированы, а мононуклеарные клетки плазмы, сыворотки и периферической крови (PBMC) будут собраны, разделены на аликвоты и сохранены при температуре -80 ° C для дальнейшей обработки. Образцы мочи будут разделены на аликвоты и сохранены при температуре -80°C для дальнейшей обработки.

Первичной выбранной конечной точкой исследования является количественная оценка среднесуточной концентрации циркулирующих фенольных метаболитов в плазме, полученных из кофе, тогда как исследование биодоступности других циркулирующих биоактивных веществ, полученных из кофе, биодоступность циркулирующих фитохимических веществ, полученных из какао, и оценка кардиометаболических маркеров будут считаться вторичными конечными точками.