Biotilgængelighed og gavnlige egenskaber af kaffe og kakao bioaktive forbindelser (P4L)

En human biotilgængelighedsundersøgelse vil blive udført for at nå de ovenfor beskrevne mål. Det humane interventionsstudie vil bestå af et kortsigtet randomiseret cross-over-forsøg, rettet mod måling af de daglige middelkoncentrationer af hver kaffe/kakao-afledt cirkulerende metabolit (CCDCM) for de fire hovedgrupper af kaffe/kakao-fytokemikalier (methylxanthiner, trigonellin) phenoler, diterpener). På basis af forskellige forbrugsmønstre vil denne frilevende undersøgelse (selvom nogle minimale diætrestriktioner vil blive givet to dage før prøveudtagningstidspunkter) også tage hensyn til virkningerne af gentagne doser på biotilgængeligheden af ​​kaffe/kakao bioaktive stoffer.

Undersøgelsen vil følge en gentagen dosis, 3-arm, cross-over design. Dette design er valgt efter ILSI's retningslinjer for interventionsforsøg med diætprodukter.

Forsøgspersonerne fik tildelt følgende behandlinger i en tilfældig rækkefølge i 1 måned:

1. 1 kop espressokaffe/dag ("lave forbrugere") kl. 9.00
2. 3 kopper espressokaffe/dag ("højforbrugere") kl. 9.00, 12.00 middag og 15.00.
3. 1 kop espresso til morgenmad kl. 9.00 og 2 kakaobaserede produkter indeholdende kaffe to gange om dagen (kl. 12.00 og kl. 15.00). Gruppen vil blive udnævnt til "mellemforbrugere", i betragtning af koffeinindholdet i de kakaobaserede produkter, der indeholder kaffe.

Der vil blive givet minimale anbefalinger for at undgå andre kilder til kaffe/kakao-fytokemikalier ud over det, der indføres gennem den tildelte behandling, og for at standardisere tidspunktet for kaffeforbruget i de to dage forud for hver prøveudtagningsdag og på prøveudtagningsdagen. Middagens timing og sammensætning vil også blive standardiseret dagen før prøveudtagningsdagen. Kun vand kunne drikkes i løbet af natten. På prøvetagningsdagen (dvs. den sidste dag i hver interventionsperiode) vil forsøgspersonerne henvise om morgenen til ambulatoriet, hvor fastende baseline-blod- og urinprøver vil blive indsamlet. Så vil lav- og højforbrugere drikke henholdsvis en eller tre kopper espressokaffe (uden sukker, sødemidler og mælk til den første kaffe; med 5 g sukker til de sidste to kaffer), mens mellemforbrugere vil drikke en kop kaffe. espressokaffe og 2 kakaobaserede produkter, der indeholder kaffe to gange i løbet af dagen, efter den ovenfor beskrevne timing. Efter indtagelse af den første kaffe sammen med en fytokemikaliefri morgenmad (et wienerbrød), vil der blive indsamlet blod- og urinprøver på udvalgte tidspunkter i de følgende 24 timer. Fem timer efter indtagelse af den første kaffe vil deltagerne modtage et standardiseret blandet måltid (sandwich med skinke og ost) fri for kaffe/kakao fytokemiske relaterede forbindelser. Vand vil være tilgængeligt ad libitum. Fireogtyve timer efter modtagelse af behandlingen vil der også blive taget blod- og urinprøver for at vurdere tilbagevenden til baseline. Derudover vil antropometriske karakteristika og blodtryk (BP) blive målt.

Sociodemografiske variabler vil blive vurderet gennem et generisk spørgeskema udfyldt ved rekruttering. Spørgeskemaet vil også indeholde spørgsmål, der er nyttige til at identificere mulige eksklusionskriterier (f. diagnose for sygdomme, regelmæssigt forbrug af medicin, fødevareallergi). Frivilliges kostvaner vil også blive evalueret under tilmeldingen gennem et semi-kvantitativt spørgeskema til madfrekvens (FFQ) til vurdering af kostens samlede antioxidantkapacitet. Derudover vil deltagernes fødeindtag og overholdelse af undersøgelseskravene blive vurderet ved hjælp af 3-dages kostjournaler, administreret gennem hver interventionsperiode på to tidspunkter: i) midt i hver interventionsperiode i to hverdage og en weekend dag, og ii) ved slutningen af ​​hver interventionsperiode, 2 dage før prøveudtagningsdagen og prøveudtagningsdagen. Det sædvanlige fysiske aktivitetsniveau for hver deltager vil blive målt gennem et valideret International Physical Activity-spørgeskemaer.

Blodprøvetagning vil blive foretaget i den ambulante afdeling under Medicin og Kirurgi. Blodopsamling vil blive udført af en læge. Et venekateter vil blive indsat i den antecubitale vene, og blodprøver fra hvert individ vil blive indsamlet i specifikke rør over 24 timer. Blodprøvetagning på tidspunktet 24 timer efter første kaffeindtagelse vil blive udført ved venepunktur. Urinprøver vil blive indsamlet i forskellige tidsrum ved hjælp af urinopsamlere.

Blodprøver vil blive centrifugeret, og plasma-, serum- og mononukleære celler fra perifert blod (PBMC'er) vil blive opsamlet, fordelt i portioner og opbevaret ved -80 °C til yderligere behandling. Urinprøver uddeles i alikvoter og opbevares ved -80°C til videre behandling.

Det primære udvalgte endepunkt for undersøgelsen er kvantificeringen af ​​den daglige middelkoncentration af kaffe-afledte plasma cirkulerende phenoliske metabolitter, hvorimod undersøgelsen af ​​biotilgængeligheden af ​​andre kaffe-afledte cirkulerende bioaktive stoffer, biotilgængeligheden af ​​kakao-afledte cirkulerende fytokemikalier, og vurderingen af kardiometabolske markører vil blive betragtet som sekundære endepunkter.