Próba eradykacji Helicobacter Pylori „Przeszukiwanie i leczenie” u młodzieży w trzech regionach Chile

Tło: Helicobacter pylori (H. pylori) jest główną przyczyną raka żołądka (GC), a długotrwały proces zachodzi od zmian przednowotworowych do raka. Eradykacja H. pylori we wczesnych stadiach choroby u młodych dorosłych („badanie i leczenie”) znacząco wpływa na GC, sprzyjając przeżyciu, odwróceniu choroby i zmianom molekularnym. W większości badań wydaje się, że wpływ terapii eradykacyjnej na różnorodność i skład mikrobiomu jelitowego oraz zwiększenie wskaźników oporności na antybiotyki u bakterii komensalnych jest przejściowy. Badacze wykazali, że infekcja nabywa się głównie w ciągu pierwszych 5 lat życia, większość zakażonych dzieci pozostaje trwale zakażona z niskim odsetkiem samoistnej eliminacji, a uporczywie zakażone dzieci mają więcej dolegliwości brzusznych i wyższy poziom pepsynogenu (PG) II (marker żołądka szkoda). Pilotażowe badanie eradykacji u uporczywie zakażonych dzieci w wieku szkolnym wykazało, że dzięki potrójnej terapii sekwencyjnej eradykację osiągnięto u 96,8% dzieci, a u leczonych dzieci poziom PG I i II był niższy w porównaniu z nieleczonymi. Badacze proponują strategię „przeszukiwania i leczenia” ukierunkowaną na wiek przejściowy między dzieciństwem a dorosłością, na obszarach o średnio-wysokim występowaniu raka żołądka, w celu oceny skuteczności eradykacji, korzyści klinicznych i molekularnych oraz potencjalnych mikrobiologicznych skutków ubocznych. Cele: Głównym celem będzie określenie skuteczności terapii eradykacyjnej H. pylori u młodzieży w wieku 14-18 lat w trzech regionach z prawie 20-25% odsetkiem przetrwania oraz określenie wpływu eradykacji na kliniczne i surowicze biomarkery choroby żołądka /szkoda. Celem drugorzędnym będzie określenie wpływu terapii eradykacyjnej H. pylori na oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe potencjalnie patogennych bakterii jelitowych oraz na skład mikrobiomu jelitowego. Cele badawcze: Określenie obecności genów oporności na klarytromycynę u H. pylori na podstawie analizy stolca dzieci, u których nie doszło do eradykacji, oraz określenie wpływu reinfekcji na wyniki kliniczne wskazujące na chorobę żołądka i biomarkery wskazujące na „uszkodzenie żołądka”, skład mikroflory jelitowej oraz oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe H. pylori i innych potencjalnie chorobotwórczych bakterii. Metody: Badacze będą zapraszać, poprzez kontakt z władzami ds. zdrowia i edukacji w Colina, Temuco i Coyhaique, uczniów w wieku 14-18 lat, dopóki nie osiągniemy 1000 zapisanych nastolatków. Zostanie zaproponowany test przesiewowy H. pylori (Urea Breath Test; UBT), a młodzież z pozytywnym wynikiem testu zostanie poddana dwóm dodatkowym testom w odstępie 30 dni w celu potwierdzenia trwałości zakażenia (co najmniej dwa testy pozytywne). Oczekuje się, że 20-25% nastolatków poddanych badaniom przesiewowym będzie miało pozytywny wynik na obecność H. pylori, z czego ponad 90% będzie zakażonych trwale. Pacjenci zostaną następnie losowo przydzieleni w stosunku 2:1 do grupy otrzymującej kurs leczenia przeciwbakteryjnego ukierunkowanego na eradykację H. pylori (7 dni lanzoprazolu i amoksycyliny, a następnie 7 dni lanzoprazolu i klarytromycyny plus metronidazol) lub bez leczenia. Uczestnicy będą poddawani kontroli UBT (1 miesiąc po leczeniu, a następnie co 6 miesięcy przez pozostały okres obserwacji), ocenie gastroenterologicznej (2 tygodnie przed leczeniem, 1 miesiąc, 3 miesiące, 9 miesięcy i 18 miesięcy po leczeniu), krew próbki i próbki kału (2 tygodnie przed leczeniem, 1 miesiąc i 6 miesięcy po leczeniu). Podzbiór 60 niezainfekowanych uczniów z każdego ośrodka będzie obserwowany w dopasowanym czasie. Biomarkery uszkodzenia żołądka w surowicy zostaną ocenione przy użyciu komercyjnych zestawów GastroPanel® (PGI, PGII, Gastrin) i ELISA (VCAM-1, CXCL13). Escherichia coli i Enterococcus spp. zostaną wyhodowane z próbek kału, a oporność na 6 środków przeciwdrobnoustrojowych zostanie oceniona metodą dyfuzyjno-krążkową. Gen oporności H. pylori na klarytromycynę zostanie zamplifikowany z kału przy użyciu nested-qPCR. Skład mikrobiomu jelitowego zostanie scharakteryzowany poprzez amplifikację i sekwencjonowanie genu 16SrRNA z kału, a następnie analizę bioinformatyczną. Oczekiwane wyniki: Częstość przetrwałego zakażenia H. pylori wyniesie około 20-25% wśród młodzieży z Colina, Coyhaique i Temuco. Eliminacja zakończy się sukcesem u >90% uporczywie zakażonych uczniów, a odsetek reinfekcji nie przekroczy 15% w okresie 2-3 lat. Eradykacja będzie istotnie związana ze spadkiem objawów klinicznych wskazujących na chorobę żołądka oraz spadkiem poziomów biomarkerów wskazujących na „uszkodzenie żołądka”. Leczenie będzie miało przejściowy wpływ na zwiększenie wskaźników oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe potencjalnie patogennych bakterii jelitowych (Escherichia coli, Enterococcus spp.). Leczenie będzie miało przejściowy wpływ na zakłócenie składu mikroflory jelitowej na poziomie typów, klas, rzędów, rodzin i rodzajów, które zostaną przywrócone do poziomów porównywalnych z niezakażonymi zdrowymi nastolatkami pod koniec obserwacji. U tych nastolatków, u których terapia eradykacyjna zawiodła, oporność na klarytromycynę będzie bardziej rozpowszechniona w próbkach przed leczeniem w porównaniu z próbkami eradykacyjnymi H. pylori; u reinfekowanych dzieci leczenie będzie miało przejściowy wpływ na zwiększenie wykrywalności genów oporności na klarytromycynę H. pylori.