Mikrocząsteczki i ryzyko ponownego zwężenia po angioplastyce balonowej u pacjentów z chorobą tętnic obwodowych

Tło

Tło i uzasadnienie badania:

Miażdżyca tętnic jest coraz bardziej rozpowszechnioną chorobą ogólnoustrojową, stanowiącą istotną przyczynę zachorowalności i śmiertelności osób nią dotkniętych. Dostosowana do wieku częstość występowania choroby tętnic obwodowych wynosi 12%, wzrastając do 20% u osób w wieku powyżej 70 lat. Pięć procent pacjentów z chromaniem przestankowym rozwija krytyczne niedokrwienie kończyn w ciągu pięciu lat od wczesnych objawów i uważa się, że są narażeni na ryzyko poważnej amputacji.

Podczas gdy operacja pomostowania pozostaje ważną opcją leczenia pacjentów z chorobą tętnic obwodowych i zapewnia dobrą długoterminową drożność anatomiczną oraz trwałość kliniczną, ta ciesząca się zaufaniem procedura chirurgiczna wiąże się z pewnym ryzykiem zachorowalności i śmiertelności. Ponadto drożne naczynia dobrej jakości, zwłaszcza żyły potrzebne do zabiegu pomostowania, są często niedostępne i ograniczają tę metodę. Przezskórna angioplastyka śródnaczyniowa (PTA) rozwinęła się w ostatnich latach jako ważna metoda leczenia pacjentów ze zwężonymi zmianami tętniczymi kończyn dolnych spowodowanymi chorobą tętnic obwodowych. Jednak ponowne zwężenie po PTA z powodu choroby tętnic obwodowych nie jest rzadkością i stanowi poważny problem terapeutyczny. Pomimo coraz częstszego występowania i częstości występowania choroby tętnic obwodowych w populacji, wciąż brakuje terminowego rozpoznania lub zastosowania markerów diagnostycznych i prognostycznych (nadal pozostaje w tyle za obecnymi strategiami diagnostycznymi i terapeutycznymi w chorobie wieńcowej i ostrych zespołach wieńcowych). Rzeczywiście, obecnie rozpoznano tylko kilka rozpoznawalnych czynników ryzyka rozwoju ponownego zwężenia. Należą do nich, obok zaawansowanej klinicznie choroby tętnic obwodowych i cukrzycy, również stany prozapalne i prozakrzepowe z wysokim CRP i fibrynogenem oraz pointerwencyjnie podwyższonymi poziomami czynnika von Willebranda i inhibitora plazminogenu-1. Ponadto poziomy TGF-beta1 są również znacząco podwyższone u pacjentów z ponownym zwężeniem. Rzeczywiste brakujące ogniwo między tymi „powszechnymi” markerami prozapalnymi a występowaniem ponownego zwężenia nie jest jednak znane – odpowiedź może leżeć w subkomórkowych fragmentach krążących we krwi.

Rzeczywiście, te tak zwane mikrocząstki osocza pochodzenia komórkowego (MP) to małe pęcherzyki fosfolipidowe o wielkości do 1,5 µm, które są uwalniane z płytek krwi, krążących leukocytów i komórek śródbłonka po aktywacji. Pochodzące z tratw lipidowych zawierają określone cząsteczki bioaktywne, które potencjalnie biorą udział w trombogenezie i aktywacji transkomórkowej. Ponadto w funkcjach prozapalnych mogą pośredniczyć domniemane interakcje ligand-receptor, aktywacja dopełniacza szlakiem klasycznym 11 oraz wyzwalanie lub modyfikowanie komórek docelowych i ich funkcji. Ponadto MP reprezentują populację subkomórkowych fragmentów eksponujących fosfatydyloserynę, działają jako „nośniki” krążącego czynnika tkankowego i mogą być nieocenione w utrzymaniu prawidłowej hemostazy, gdy funkcja płytek krwi jest upośledzona. Mikrocząsteczki transportują cząsteczki prozapalne, takie jak interleukiny, interferon gamma i czynnik martwicy nowotworów alfa. Coraz więcej dowodów sugeruje, że uwolnione MP to coś więcej niż tylko obojętne szczątki komórek lub nieistotny pył płytkowy. Zamiast tego są silnymi czynnikami biologicznymi występującymi u zdrowych osób, ale także zaangażowanymi w różne choroby, w tym stany zapalne naczyń po operacji krążenia pozaustrojowego, ostre zespoły wieńcowe i choroby związane z zespołem metabolicznym, np. cukrzyca. Pacjenci z chorobą tętnic obwodowych (PAD) spowodowaną cukrzycą typu 2 również wykazują podwyższony „wyjściowy” stan prozapalny i prozakrzepowy. Wydaje się, że u chorych na cukrzycę mikrocząsteczki płytkowe mogą uczestniczyć w rozwoju lub progresji miażdżycy. Ponadto u pacjentów z chorobą tętnic obwodowych opisano podwyższoną liczbę mikrocząstek, zwłaszcza pochodzących z płytek krwi.

Chociaż mikrocząstki zostały dobrze udokumentowane jako mediatory stanu zapalnego i krzepnięcia w różnych chorobach sercowo-naczyniowych, obecnie nie wiadomo, w jaki sposób PTA w chorobie tętnic obwodowych wpływa na liczbę, fenotyp i rozmieszczenie mikrocząstek przed i po interwencji oraz w jaki sposób są one powiązane z lub wpływać na częstość występowania wczesnego ponownego zwężenia - lub czy rzeczywiście można je wykorzystać do przewidywania pacjentów z ryzykiem wczesnego ponownego zwężenia.

Cel

Hipoteza i cele:

Hipoteza: Mikrocząsteczki pochodzące z osocza aktywnie wpływają na przebieg choroby i są związane z wczesnym nawrotem zwężenia/reokluzji po angioplastyce u pacjentów (mężczyzn i kobiet) z chorobą tętnic obwodowych, działając jako mediatory między odpornością wrodzoną i komórkową, a także układ krzepnięcia.

Cel 1: Pierwszym celem badania jest scharakteryzowanie i oznaczenie ilościowe mikrocząstek z próbek krwi obwodowej na początku badania i jeden dzień po angioplastyce Cel 2: Drugim celem jest scharakteryzowanie i oznaczenie ilościowe mikrocząstek w okresie obserwacji 2 tygodnie, 3 i 6 miesięcy po angioplastyce i określić, czy profil mikrocząstek można wykorzystać do określenia pacjentów z większym ryzykiem ponownego zwężenia.

Cel 3: Trzecim celem jest zajęcie się możliwymi różnicami między płciami w rozmieszczeniu i liczbie mikrocząstek w analizie podgrup. Będzie to ważna część projektu, ponieważ obecnie takie dane nie istnieją.

Metody

Projekt badania: Badanie będzie obejmowało pomiary na początku badania, jeden dzień, 2 tygodnie, 3 i 6 miesięcy po angioplastyce.

Ocena Uzyskanie świadomej zgody: dzień (d)0 Badanie fizykalne: d0, d+1, 2 tygodnie, 3 i 6 miesięcy po interwencji Pomiar wskaźnika kostka-ramię (ABI): d0, d+1, 2 tygodnie, 3 i 6 miesiące po interwencji Duplex USG: 6 miesięcy po interwencji Angioplastyka: d0 (początek badania) Procedura pobierania krwi*: d0, d+1 Badanie pobierania krwi**: d0, d+1, 2 tygodnie, 3 i 6 miesięcy po interwencja

* Glukoza na czczo, HBA1c, profil lipidowy, kreatynina, hemoglobina, profil leukocytarny, trombocyty, białko C-reaktywne

** Mikrocząsteczki, cytokiny, dopełniacz (=5 ml surowicy, 2,7 ml osocza EDTA, 10 ml cytrynianu)