Czynniki genetyczne, antropometryczne i biochemiczne wpływające na subkliniczną miażdżycę wysokiego ryzyka

To badanie przekrojowo oceniało kolejnych pacjentów w ambulatorium dyslipidemii oraz sekcji medycznych nadciśnienia tętniczego i nefrologii Instytutu Kardiologii im. Dantego Pazzanese, trzeciego stopnia kardiologicznego szpitala w São Paulo w Brazylii. Po spełnieniu kryteriów włączenia i podpisaniu świadomej zgody zebrano krótką historię medyczną i dane antropometryczne (obwód brzucha, wzrost i wagę do obliczenia wskaźnika masy ciała). W ciągu miesiąca od włączenia u wszystkich pacjentów wykonano pobranie krwi w celu oznaczenia szybkiego pomiaru glukozy i insuliny w osoczu oraz 2 godziny po 75 g dekstrozy oznaczenia glukozy i insuliny, szybkiego oznaczenia triglicerydów w surowicy, cholesterolu całkowitego, cholesterolu HDL, kreatyniny, wysokoczułego białka c-reaktywnego. (hs-CRP), HbA1c, hormon tyreotropowy (TSH), wolna tyroksyna (fT4), kinaza kreatynowa, adiponektyna, rezystyna, leptyna, czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF-α), fosfolipaza A2 związana z lipoproteinami (Lp-PLA2). Próbkę krwi przechowywano również dla DNA (rs2383206, rs10757274, rs10757278, rs1051931, rs16874954 i rs1799724) i RNA PLA2G7 (2-ΔCT), TNF-α (2-ΔCT), LEP (2-ΔCT), LEPR (2-ΔCT ) ekstrakcja i analizy.

Subkliniczną miażdżycę oceniano czterema metodami: ultrasonografią dopplerowską tętnic szyjnych, tomografią komputerową serca, próbą wysiłkową oraz wskaźnikiem kostka-ramię (ABI). Wszystkie powyższe testy wykonano tego samego dnia.

Doppler tętnic szyjnych wykonano ultrasonografem wysokiej rozdzielczości Vivid 7 (GE, USA) oraz głowicą liniową wysokiej częstotliwości typu 9 MHz z automatycznym pomiarem. Oceniono grubość błony środkowej tętnicy szyjnej (cIMT) 1 cm dystalnie od tylnej ściany lewej i prawej tętnicy szyjnej wspólnej oraz oceniono obecność blaszek miażdżycowych w tętnicach szyjnych wspólnych, wewnętrznych i zewnętrznych. Płytka szyjna została zdefiniowana przez obecność ogniskowego pogrubienia ściany co najmniej o 50% większego niż otaczająca ściana naczynia lub jako obszar ogniska z IMT większym niż 1,5 mm, który wystaje do światła i który różni się od sąsiedniej granicy.

Wykonano tomografię komputerową serca w celu określenia stopnia uwapnienia wieńcowego (CAC) i dystrybucji wapnia. Gęstość wątroby wykonano w celu oceny obecności stłuszczenia wątroby za pomocą aparatu Aquilion (Toshiba Medical, Tochigi, Japonia) z 64 rzędami detektorów. Akwizycja danych tomograficznych była reprezentowana przez obrazy o średniej grubości (3 mm) i niskiej intensywności (50 miliamperów, 120 kV) i sprzężona z elektrokardiogramem. Wynik wapnia uznawano za obecny, gdy jego gęstość w tętnicy wieńcowej przekraczała 130 jednostek Housfielda (HU) dla co najmniej 3 ciągłych pikseli (> 1 mm2) tej samej tętnicy wieńcowej. Ocena wapnia obejmowała sumę poszczególnych ocen lewej i prawej tętnicy wieńcowej.

Próbę wysiłkową wykonano według jednego z protokołów: Bruce, zmodyfikowana bieżnia Bruce lub Ellestad. Test przerywano w przypadku osiągnięcia maksymalnego tętna lub pojawienia się objawów klinicznych, w tym wyczerpania. Badanie uznano za pozytywne, gdy stwierdzono: ujemne wychylenie odcinka ST w poziomie/w dół mierzone w punkcie J ≥1 mm, ból sugerujący chorobę wieńcową, złożone i utrzymujące się komorowe zaburzenia rytmu, plateau lub spadek ciśnienia skurczowego podczas wysiłku i/ lub wydolność funkcjonalna niższa niż 5 METS.

Testy ABI wykonywano u pacjenta w pozycji leżącej po 5 minutach odpoczynku. Wykonywano badanie palpacyjne obustronnych tętna na tętnicy podudziowej, piszczelowej tylnej, podkolanowej i ramiennej. Pomiary ciśnienia skurczowego wykonano za pomocą ultrasonografii 5 MHz. Do obliczenia ABI wykorzystano zależność pomiędzy ciśnieniem skurczowym i rozkurczowym kończyn górnych i dolnych. Test uznawano za pozytywny, gdy przynajmniej jedna z zależności była mniejsza niż 0,9.

Charakterystyka osobowa i kliniczna pacjentów zostanie opisana według grupy przy użyciu częstości bezwzględnych i względnych dla cech jakościowych oraz miar sumarycznych (średnia, odchylenie standardowe, mediana, minimum i maksimum) dla cech ilościowych. Rozkłady zmiennych zostaną zbadane za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Analizy porównawcze dla danych nienormalnych zostaną przeprowadzone przy użyciu testu Kruskala-Wallisa i wyrażone jako mediana (rozstęp międzykwartylowy). Normalne dane zostaną ocenione za pomocą analizy wariancji (ANOVA) i wyrażone jako średnia ± odchylenie standardowe. Do oceny powiązań między zmiennymi kategorialnymi wykorzystany zostanie test chi-kwadrat oraz dokładny test Fishera. Analiza kowariancji (ANCOVA) dostosowana do wieku i płci zostanie wykorzystana do porównania pomiarów klinicznych i biochemicznych między grupami (glukoza, insulina, Homa-R, hs-PCR, HDL-c, trójglicerydy, LDL-c, HbA1c, TNF-α , leptyna, 2 godziny glukozy i regularne przyjmowanie leków). Porządkowa regresja logistyczna zostanie wykorzystana do oceny subklinicznej miażdżycy. Dwustronna wartość P < 0,05 zostanie uznana za istotną statystycznie.