Odporność wrodzona w eozynofilowym zapaleniu przełyku (CLOE)

Do badania zostaną włączone dzieci (w wieku od 1 do 18 lat) z objawami sugerującymi EoE i wymagające wykonania endoskopii górnego odcinka przewodu pokarmowego z biopsją błony śluzowej przełyku w celu potwierdzenia lub wykluczenia rozpoznania EoE.

Dzieci dobrane w pary ze względu na wiek, u których endoskopia przeprowadzona w celu zbadania objawów EoE ujawniła inny stan (zapalenie trawienne przełyku, achalazja) lub dzieci sparowane ze względu na wiek, u których wykonano endoskopię z biopsją w celu zbadania przewlekłego bólu brzucha lub nadbrzusza lub podejrzenia przewlekłego zapalenia jelit choroby, zostaną włączone jako osobniki kontrolne.

Endoskopia zostanie przeprowadzona w znieczuleniu ogólnym przy użyciu endoskopu giętkiego o średnicy zewnętrznej od 4,9 do 9,2 mm, w zależności od wielkości dziecka. Zgodnie z wytycznymi zostanie pobranych osiem biopsji z proksymalnego, środkowego i dystalnego odcinka przełyku w celu rutynowej analizy przebudowy przełyku i stanu zapalnego. Trzy z tych biopsji zostaną wykorzystane w kontekście tego badania do analizy wrodzonych komórek odpornościowych za pomocą cytometrii przepływowej i do określenia profilu ekspresji cytokin. Dwie biopsje zostaną umieszczone w sterylnych probówkach Nunc o pojemności 0,5 ml zawierających bufor do przechowywania (MACS® Tissue Storage Solution), a następnie będą przechowywane w lodzie do czasu ekstrakcji komórek do analizy cytometrycznej. Trzecia próbka zostanie umieszczona w sterylnej probówce i natychmiast zamrożona w ciekłym azocie do analizy mikrobiomu przełyku.

ILC1, 2 i 3 oraz ich podtypy zostaną zidentyfikowane za pomocą kryteriów strukturalnych (wielkość i ziarnistość) oraz zróżnicowanego znakowania błonowego i wewnątrzkomórkowego przy użyciu specyficznych markerów przedstawionych poniżej. Wszystkie akwizycje i analizy zostaną przeprowadzone przy użyciu 13-kolorowego cytometru NovoCyte (AACEA) i powiązanego z nim oprogramowania (NovoAxpressTM), które są dostępne w laboratorium.