Врожденный иммунитет при эозинофильном эзофагите (CLOE)

В исследование будут включены дети (в возрасте от 1 до 18 лет) с симптомами, указывающими на ЭоЭ, которым требуется эндоскопия верхних отделов желудочно-кишечного тракта с биопсией слизистой оболочки пищевода для подтверждения или исключения диагноза ЭоЭ.

Дети, совмещенные по возрасту, у которых эндоскопия, проведенная для изучения симптомов ЭоЭ, выявила другое состояние (пептический эзофагит, ахалазия), или дети, совмещенные по возрасту, которым была проведена эндоскопия с биопсией для выявления хронической боли в животе или эпигастрии или подозрения на хроническое воспаление кишечника болезнь, будут включены в качестве субъектов контроля.

Эндоскопия будет проводиться под общей анестезией с использованием гибкого эндоскопа с внешним диаметром от 4,9 до 9,2 мм, в зависимости от роста ребенка. В соответствии с рекомендациями будет взято восемь биопсий из проксимального, срединного и дистального отделов пищевода для рутинного анализа ремоделирования и воспаления пищевода. Три из этих биопсий будут использоваться в контексте данного исследования для анализа врожденных иммунных клеток с помощью проточной цитометрии и для определения профиля экспрессии цитокинов. Две биопсии помещают в стерильные пробирки Nunc объемом 0,5 мл, содержащие буфер для хранения (раствор для хранения тканей MACS®), а затем хранят во льду до извлечения клеток для цитометрического анализа. Третий образец будет помещен в стерильную пробирку и немедленно заморожен в жидком азоте для анализа микробиома пищевода.

ILC1, 2 и 3 и их подтипы будут идентифицированы с помощью структурных критериев (размер и гранулярность) и дифференциальной мембранной и внутриклеточной маркировки с использованием специфических маркеров, показанных ниже. Все сборы и анализы будут выполняться с использованием 13-цветного цитометра NovoCyte (AACEA) и связанного с ним программного обеспечения (NovoAxpressTM), которые доступны в лаборатории.