Biomarkery we wczesnym stadium spondyloartropatii

Obecnie żaden test laboratoryjny ani biomarker nie są w stanie odróżnić pacjentów z axSpA we wczesnym stadium od utrzymującego się bólu krzyża o innych przyczynach. Ludzki antygen leukocytarny (HLA) B27 nie jest ostrym biomarkerem, ale markerem prognostycznym rozwoju axSpA.

Białko C-reaktywne (CRP) jest powszechnie stosowane jako ostry biomarker w różnych stanach zapalnych. Wcześniejsze badania wykazały, że tylko 40-60% pacjentów z zesztywniającym zapaleniem stawów kręgosłupa (ZZSK) z klinicznymi objawami czynnej choroby ma podwyższone poziomy CRP.

Wcześniejsze badania dotyczące produktu rozszczepionego C3 dopełniacza C3d wykazały korelację między chorobami zapalnymi, takimi jak AS, a podwyższeniem C3d. Badania te opierały się na niewielkiej liczbie przypadków, ale nowsze badanie z 2016 r. wykazało korelację między różnymi biomarkerami, w tym C3, a nowymi zmianami tłuszczowymi w MRI u pacjentów z AS leczonych golimumabem.

Cel: Zbadanie wartości predykcyjnej wyjściowych poziomów C3d i hsCRP identyfikujących obrzęk szpiku kostnego (BME) w MRI stawów krzyżowo-biodrowych (SIJ) na początku badania.

Projekt:

Badanie jest prospektywnym badaniem kohortowym obejmującym pacjentów w wieku 18-45 lat z niespecyficznym bólem krzyża zarejestrowanych w kohorcie Spines of Southern Denmark (SSD), w tym pacjentów skierowanych do Spine Centre of Southern Denmark.

Na początku badania wszyscy pacjenci wypełnili wystandaryzowany kwestionariusz i przeprowadzono z nimi wywiad w celu zidentyfikowania objawów zapalnych, a następnie przeprowadzono badanie kliniczne koncentrujące się na objawach związanych ze SKB. Pobrano próbki krwi i przeanalizowano je pod kątem HLA-B27 (biomarker prognostyczny). Ponadto u wszystkich pacjentów wykonano rezonans magnetyczny kręgosłupa, w tym SKB.

Łącznie uwzględniono 1037 pacjentów, u 696 wykonano badania krwi i wyrazono zgodę na dalsze wykorzystanie do celów badawczych.

W celach badawczych próbki krwi przechowywano w biobanku biologii molekularnej czynników zakaźnych we wczesnej diagnostyce spondyloartropatii (MICSA). Biobank jest prowadzony przez grupę badawczą Szpitala Reumatologicznego Graasten. Spośród 696 pacjentów, którzy wyrazili zgodę, 188 pacjentów zostało zbadanych przez reumatologa na początku badania. Spośród tych 96 pacjentów spełniało kryteria axSpA według kryteriów ASAS (Assessment of SpondyloArthritis International Society), 38 pacjentów miało zmiany zapalne w MRI lub jedną cechę obejmującą spondyloartropatię, ale nie spełniało kryteriów ASAS. Grupę kontrolną stanowiło 82 losowo wybranych pacjentów z bólami krzyża.

W sumie 216 pacjentów zostało zdefiniowanych jako kohorta włączona do dalszej analizy w tym badaniu.

Dane:

Oddział Biochemii Klinicznej Szpitala Vejle już wcześniej pomagał w pobieraniu i przechowywaniu próbek MICSA. Technicznie możliwe jest wykorzystanie przechowywanych zamrożonych próbek MICSA do analizy C3d.

W sumie 184 (z 216) próbek wyjściowych było dostępnych do dalszej analizy. Próbki wyjściowe będą analizowane na obecność C3d przy użyciu osocza zawierającego EDTA (kwas etylenodiaminotetraoctowy) i traktowane zgodnie z lokalnym protokołem dla takich analiz.

MRI

Wszyscy pacjenci w kohorcie MICSA mieli wykonane MRI kręgosłupa, w tym SKB na początku badania. Dwóch doświadczonych radiologów systematycznie opisywało MRI pod kątem objawów zmian zapalnych, w tym BME.

Statystyka:

STATA (wersja 15.0) zostanie wykorzystana do analizy statystycznej. Dane parametryczne zostaną przedstawione jako średnia i wyprowadzenie standardowe (SD) lub jednokierunkowa analiza wariancji (ANOVA). W porównaniach międzygrupowych dla ciągłych i kategorycznych zmiennych demograficznych zostaną przeprowadzone testy t dla próby niezależnej oraz test chi-kwadrat Pearsona lub dokładny test Fishera. Do opisu danych nieparametrycznych wykorzystany zostanie test Kruskala-Wallisa oraz rozstęp międzykwartylowy. Analiza regresji logistycznej zostanie wykorzystana do przetestowania zmiennych niezależnych jako czynników predykcyjnych BME wykrytych za pomocą MRI, co daje iloraz szans, czułość, swoistość i pole pod krzywą (AUC). Po tym nastąpi wielowymiarowa regresja logistyczna w celu oceny potencjalnego wpływu innych zmiennych. Wartość p < 0,05 uważa się za istotną statystycznie.

Wielkość próbki i obliczenie mocy:

Poprzednie badanie z udziałem pacjentów podejrzanych o spondyloartropatię wykazało znaczącą różnicę w średnich poziomach C3 między grupami odpowiednio 23 i 22 uczestników.

Wykorzystując średnie i SD z powyższego badania oraz alfa=0,05, beta=0,2, moc 0,8 i współczynnik zapisów 1:2, wielkość próby w naszym badaniu została obliczona odpowiednio na n:10 i n:20.

Oczekuje się zatem, że można wykryć znaczącą różnicę w poziomach C3d między trzema grupami w niniejszym badaniu na podstawie wielkości każdej grupy w kohorcie MISCA.