Biomarkery v časném stadiu spondyloartrózy

V současné době neexistuje žádný laboratorní test ani biomarker, který by umožnil odlišit pacienty s časnou fází axSpA a přetrvávající bolestí dolní části zad z jiných příčin. Lidský leukocytární antigen (HLA) B27 není akutní biomarker, ale prognostický marker pro rozvoj axSpA.

C-reaktivní protein (CRP) se běžně používá jako akutní biomarker u různých zánětlivých stavů. Předchozí studie ukázaly, že pouze 40–60 % pacientů s ankylozující spondylitidou (AS) s klinickými známkami aktivního onemocnění má zvýšené hladiny CRP.

Dřívější studie týkající se komplementového C3 split produktu C3d ukázaly korelaci mezi zánětlivými onemocněními, jako je AS, a zvýšením C3d. Tyto studie byly založeny na malém počtu případů, ale novější studie z roku 2016 prokázala korelaci mezi různými biomarkery, včetně C3 a nových tukových lézí na MRI u pacientů s AS léčených golimumabem.

Cíl Zkoumat prediktivní hodnotu výchozích hladin C3d a hsCRP identifikujících edém kostní dřeně (BME) na MRI sakroiliakálních kloubů (SIJ) na počátku.

Design:

Studie je prospektivní kohortová studie zahrnující pacienty ve věku 18-45 let s nespecifickou bolestí dolní části zad registrovanou v kohortě Spines of Southern Denmark (SSD), včetně pacientů odeslaných do Spine Center of Southern Denmark.

Na začátku všichni pacienti vyplnili standardizovaný dotazník a byli dotazováni na zjištění zánětlivých symptomů, po nichž následovalo klinické vyšetření zaměřené na symptomy související se SIJ. Byly odebrány vzorky krve a analyzovány na HLA-B27 (prognostický biomarker). Dále všichni pacienti podstoupili MRI páteře včetně SIJ.

Celkem bylo zařazeno 1037 pacientů, u 696 byly provedeny krevní testy a souhlas k dalšímu využití pro výzkumné účely.

Pro výzkumné účely byly vzorky krve uloženy v molekulární biologii infekčních agens v biobance časné diagnostiky spondyloartritidy (MICSA). Biobanku provozuje výzkumná skupina v revmatologické nemocnici Graasten. Z 696 pacientů, kteří dali souhlas, bylo 188 pacientů vyšetřeno revmatologem na začátku studie. Z těchto 96 pacientů splňovalo kritéria pro axSpA podle kritérií The Assessment of SpondyloArthritis international Society (ASAS), 38 pacientů mělo zánětlivé změny na MRI nebo mělo jeden znak spočívající v spondylartritidě, ale nesplňovalo kritéria ASAS. Jako kontrolní skupina bylo zahrnuto 82 náhodně vybraných pacientů s bolestmi v kříži.

Celkem bylo v této studii definováno 216 pacientů jako kohorta zahrnutá pro další analýzu.

Data:

Oddělení klinické biochemie nemocnice Vejle již dříve asistovalo při odběru a skladování vzorků MICSA. Je technicky možné použít uskladněné zmrazené vzorky MICSA pro analýzu C3d.

Celkem bylo k dispozici pro další analýzu 184 (z 216) výchozích vzorků. Základní vzorky budou analyzovány na C3d s použitím plazmy EDTA (kyselina ethylendiamintetraoctová) a zpracovány podle místního protokolu pro takové analýzy.

MRI

Všichni pacienti v kohortě MICSA měli na začátku vyšetření MRI páteře včetně SIJ. Dva zkušení radiologové systematicky popsali MRI s ohledem na známky zánětlivých změn včetně BME.

Statistika:

Pro statistickou analýzu bude použit STATA (verze 15.0). Parametrická data budou uváděna jako průměr a standardní derivace (SD) nebo jednosměrná analýza rozptylu (ANOVA). V meziskupinovém srovnání pro spojité a kategorické demografické proměnné bude provedeno nezávislý výběrový t-test a Pearsonův Chi-kvadrát test nebo Fisherův exaktní test. K popisu neparametrických dat bude použit Kruskal-Wallisův test a mezikvartilové rozmezí. Logistická regresní analýza bude použita k testování nezávislých proměnných jako prediktivních faktorů pro BME detekované MRI, což povede k poměrům šancí, citlivosti, specificitě a ploše pod křivkou (AUC). Poté bude následovat vícerozměrná logistická regrese k vyhodnocení potenciálního vlivu dalších proměnných. Za statisticky významnou se považuje p-hodnota < 0,05.

Velikost vzorku a výpočet výkonu:

Předchozí studie s pacienty s podezřením na spondyloartrózu zjistila významný rozdíl v průměrných hladinách C3 mezi skupinami s 23 a 22 účastníky.

S použitím průměrů a SD z výše uvedené studie a alfa= 0,05, beta= 0,2, síla 0,8 a poměr zápisu 1:2 je velikost vzorku v naší studii vypočítána na n:10, respektive n:20.

Proto se očekává, že významný rozdíl v hladinách C3d mezi třemi skupinami v této studii může být detekován na základě velikosti každé skupiny v kohortě MISCA.