Poziomy IL-34 w różnych rodzajach zapalenia przyzębia

Nowa cytokina interleukina 34 (IL-34) jest drugim możliwym funkcjonalnym ligandem receptora czynnika 1 stymulującego tworzenie kolonii makrofagów (CSF-1R). IL-34 jest wydzielana w różnych tkankach, w tym: sercu, mózgu, płucach, wątrobie, nerkach, grasicy, jądrach, jajnikach, jelicie cienkim, prostacie, okrężnicy i śledzionie. IL-34 ma wspólne funkcje życiowe czynnika stymulującego tworzenie kolonii makrofagów -1 (CSF-1) i kontroluje przeżycie, różnicowanie i proliferację komórek szpiku. Jest wytwarzany przez płyn maziowy, fibroblasty dziąseł i ludzką tkankę tłuszczową i jest kontrolowany przez czynnik transkrypcyjny RANK i aktywację N-końcowej kinazy c-Jun (CJNK). Dodatkowo cytokiny prozapalne, czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF-α) i interleukina-1beta (IL-1β) organizują uwalnianie IL-34 z fibroblastów dziąseł, poprzez mechanizm obejmujący czynnik jądrowy -kB (NF-kB) i aktywowany mitogenem kinaza białkowa (MAPK). Ukierunkowany CSF-1 po prostu nie jest odpowiedni do hamowania efektu poprzez CSF-1R. Co więcej, ani RANKL, ani IL-34 same nie mogą powodować tworzenia się osteoklastów, co sugeruje, że IL-34 jest wymagana, ale niewystarczająca. IL-34 odgrywa kluczową rolę w osteoklastogenezie indukowanej przez RANKL; w różnicowaniu osteoklastów pośredniczy w ten sam sposób CSF-1.

Kilka badań oceniało rolę IL-34 w patogenezie przewlekłego zapalenia przyzębia (CP). Zgodnie z naszą najlepszą wiedzą, w każdym z tych badań wykazano związek między poziomem GCF IL-34 a stosunkiem GCF RANKL/OPG w innych typach zapalenia przyzębia przed i po niechirurgicznym leczeniu przyzębia. Badanie to podkreśla wpływ IL-34 na patogenezę przewlekłego zapalenia przyzębia (CP) i agresywnego zapalenia przyzębia (AgP).

Celem niniejszej pracy jest 1) identyfikacja wpływu IL-34 na patogenezę chorób przyzębia oraz określenie, czy istnieje związek między istniejącymi poziomami GCF IL-34 a GCF RANKL, OPG i RANKL/OPG, jako mediatora resorpcji kości 2) analiza wpływu niechirurgicznego leczenia periodontologicznego na poziomy GCF IL-34 u pacjentów z CP i AgP oraz 3) korelacja między markerami biochemicznymi a zapisami klinicznymi.

Badaniem objęto 60 osób: 20 zdrowych przyzębia (CTRL), 20 z przewlekłym zapaleniem przyzębia (CP) i 20 z agresywnym zapaleniem przyzębia (AgP). Pacjenci z zapaleniem przyzębia byli leczeni niechirurgiczną terapią periodontologiczną. Procedury pobierania próbek GCF i kliniczne pomiary przyzębia zostały zbadane na początku leczenia i 6 tygodni po leczeniu. Poziomy IL-34, RANKL i OPG analizowano za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA).

Uczestnicy zostali poddani ocenie periodontologicznej na początku badania i po niechirurgicznym leczeniu periodontologicznym zgodnie z następującymi kryteriami; wskaźnik płytki nazębnej (PI) (Silness i Loe, 1964), GI (Loe i Silness, 1963), PPD, poziom przywiązania klinicznego (CAL) i BOP (oceniany jako pozytywny, jeśli rozwinął się w ciągu 15 s po kontakcie). Do określenia utraty kości przyzębia wykorzystano zdjęcia rentgenowskie całej jamy ustnej. Pomiary kliniczne zostały wykonane w milimetrach przez jednego wykalibrowanego egzaminatora (ŞBD), który był zaślepiony na cały badany skład, z sześciu lokalizacji każdego zęba (mezjalno-policzkowy, dystalno-policzkowy, środkowo-policzkowy, mezjalno-językowy, dystalno-językowy i środkowo-językowy), za pomocą sondy periodontologicznej (Hu-Friedy, Chicago, IL, USA).

Wybrano dwa miejsca na uczestnika do zbierania GCF dla każdej grupy. Próbki GCF pobrano z miejsc mezjalno-policzkowych lub dystalnych zębów jednokorzeniowych. Obszary próbek izolowano wałeczkami bawełnianymi, zapewniono zanieczyszczenie śliną, usunięto całą płytkę naddziąsłową sterylną kiretą i lekko wysuszono powietrzem. Paski papieru wkładano do szczeliny aż do napotkania oporu, a następnie pozostawiano je na miejscu przez 30 sekund. Ilość GCF na paskach mierzono przez ważenie zebranej cieczy. Paski umieszczono w zamkniętych i ponumerowanych plastikowych probówkach typu Eppendorf. Ciecz ponownie zważono, bezpośrednio po pobraniu, w celu uwzględnienia parowania. Próbki składające się ze śliny i krwi odrzucono z badania. Dwie dostępne do użytku próbki od każdego osobnika połączono, aby utworzyć pojedynczą próbkę i natychmiast umieszczono w pojedynczej probówce Eppendorfa i zamrożono w temperaturze _80°C do późniejszej oceny.