Mitochondrialne DNA w płynie szklistym i krwi u pacjentów z chorobą oczu lub urazem oka.

Celem pracy jest sprawdzenie korelacji między obecnością mitochondrialnego DNA w płynie szklistym i krwi u pacjentów przyjmowanych do Poradni Okulistycznej UTMB. Celem badania jest analiza 4 grup po 30 próbek każdej z głównych chorób i urazów oczu: związanego z wiekiem zwyrodnienia plamki żółtej, jaskry i retinopatii cukrzycowej oraz urazów oczu. W celu realizacji celów rekrutacyjnych można wyrazić zgodę na udział w tym badaniu do 300 osób. W tym badaniu wykorzystamy tylko wyrzucone ciało szkliste oka wraz z próbką krwi pobraną podczas operacji. Pacjenci z zaplanowaną operacją okulistyczną, która może skutkować odrzuceniem płynu szklistego, zostaną zidentyfikowani na podstawie harmonogramu kliniki lub przez lekarza w izbie przyjęć. Możliwość pobrania ciała szklistego podczas zabiegu może być niepewna. Jeśli pacjent nie wyrzucił ciała szklistego z danej operacji, od tego momentu zostanie poddany badaniu przesiewowemu przed pobraniem krwi lub zebraniem danych z elektronicznej dokumentacji medycznej. W razie potrzeby pacjenci zostaną zgłoszeni do udziału w badaniu przez ich chirurga wydziału klinicznego. Koordynator badań klinicznych udzieli informacji na temat świadomej zgody z możliwością zadawania pytań zarówno koordynatorowi, chirurgowi wydziału klinicznego, jak i głównemu badaczowi. Kopie zgody pacjent otrzyma do zabrania do domu. Zapewniona zostanie dodatkowa możliwość zadawania pytań rano w dniu operacji. Podpis zgody zostanie uzyskany przed podaniem jakiegokolwiek leku lub przy przyjęciu na zabieg. Próbki, jeśli są dostępne, zostaną pobrane podczas operacji oka. Od każdego pacjenta zostanie pobrane do 1 ml płynu szklistego i do 10 ml krwi. Próbki będą przechowywane w temperaturze pokojowej i przekazywane bezpośrednio do laboratorium dr Szczęsnego. Płyn szklisty zostanie zamrożony do dalszej analizy, a osocze krwi zostanie przetworzone przy użyciu histopaque i wirowania przed zamrożeniem. Z pobranych biopróbek zostaną przeprowadzone dwa rodzaje analiz.1) Całkowity DNA zostanie wyizolowany, po czym nastąpi analiza ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy (RTq-PCR) w czasie rzeczywistym przy użyciu zestawu starterów w celu identyfikacji obecności mitochondrialnego DNA i jądrowego DNA jako kontroli. 2) Pęcherzyki pozakomórkowe zostaną wyizolowane przy użyciu ultrawirowania lub dostępnego w handlu zestawu, a następnie przeanalizowane zostanie mitochondrialne i jądrowe DNA i/lub markery błony komórkowej przy użyciu RTq-PCR i/lub Western blot. Elektroniczna dokumentacja medyczna będzie dostępna w celu gromadzenia danych demograficznych i okulistycznych informacji diagnostycznych oraz informacji na temat innych chorób współistniejących.

Te punkty danych będą obejmować wiek w latach, płeć, rasę, pochodzenie etniczne, obecność zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem (AMD) (t/n), typ i stadium AMD, stosowanie witamin ARED, leczenie AMD, jaskrę (t/n) ), typ i stopień zaawansowania jaskry, cukrzyca, stężenie glukozy we krwi, retinopatia cukrzycowa (t/n), typ i stopień zaawansowania retinopatii cukrzycowej, leczenie retinopatii cukrzycowej oraz czas przed planowanym zabiegiem chirurgicznym, rodzaj i stopień zaawansowania nadciśnienia tętniczego, typ choroby nerek i stopień zaawansowania, palenie tytoniu, rak, typ nowotworu, leczenie lub operacja, diagnozy wirusowe (HIV, CMV, HCV), historia tępego urazu oka, historia zaćmy, operacja usunięcia soczewki, przyczyna witrektomii, towarzyszące leki i procedury, istotne obserwacje z badania okulistycznego na procesy zapalne, dane z optycznej koherentnej tomografii. IOP, dane pola widzenia [VF], ostrość wzroku, wyniki gonioskopii.