DNA mitocondrial em fluido vítreo e sangue em pacientes com doença ocular ou trauma ocular.

O estudo tem como objetivo testar a correlação entre a presença do DNA mitocondrial no líquido vítreo e no sangue em pacientes internados no Ambulatório de Olhos da UTMB. O objetivo do estudo é analisar 4 grupos de 30 amostras de cada uma das principais doenças e lesões oculares: degeneração macular relacionada à idade, glaucoma e retinopatia diabética e trauma ocular. Até 300 indivíduos podem ser consentidos neste estudo, a fim de atender às metas de recrutamento. Neste estudo, usaremos apenas o vítreo do olho descartado juntamente com uma amostra de sangue coletada durante a cirurgia. Pacientes com cirurgia oftalmológica agendada que pode resultar em líquido vítreo descartado serão identificados no agendamento da clínica ou pelo médico no pronto-socorro. A possibilidade de coleção vítrea em uma cirurgia pode ser incerta. Se um indivíduo não tiver descartado o vítreo de uma determinada cirurgia, ele será reprovado na triagem antes da coleta de sangue ou coleta de dados do prontuário eletrônico a partir desse momento. Os indivíduos serão abordados quando apropriado para o interesse na participação no estudo por seu cirurgião clínico do corpo docente. Um briefing de consentimento informado será fornecido pelo coordenador da pesquisa clínica com a oportunidade de fazer perguntas ao coordenador, ao cirurgião clínico do corpo docente e ao investigador principal. Cópias do consentimento serão fornecidas para o paciente levar para casa. Oportunidade adicional para perguntas na manhã da cirurgia será fornecida. A assinatura do consentimento será obtida antes da administração de qualquer medicamento ou na admissão para cirurgia. As amostras, se disponíveis, serão coletadas durante a cirurgia ocular. Até 1ml de líquido vítreo e até 10ml de sangue serão coletados de cada paciente. As amostras serão armazenadas em temperatura ambiente e transferidas diretamente para o laboratório do Dr. Szczesny. O fluido vítreo será congelado para posterior análise e o plasma sanguíneo será processado usando histopaco e centrifugação antes do congelamento. Dois tipos de análise serão conduzidos com os bioespécimes coletados.1) O DNA total será isolado, seguido de análise com reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (RTq-PCR) utilizando um conjunto de primers para identificar a presença do DNA mitocondrial e DNA nuclear como controle. 2) As vesículas extracelulares serão isoladas por ultracentrifugação ou kit comercialmente disponível, seguido da análise do DNA mitocondrial e nuclear e/ou marcadores de membrana plasmática por meio de RTq-PCR e/ou Western blot. Registros médicos eletrônicos serão acessados ​​para coletar informações demográficas e de diagnóstico oftalmológico e informações sobre outros diagnósticos de comorbidade.

Esses pontos de dados incluirão idade em anos, sexo, raça, etnia, presença de degeneração macular relacionada à idade (DMRI) (s/n), tipo e estágio da DMRI, uso de vitaminas AREDs, tratamentos de DMRI, Glaucoma(s/n ), tipo e estágio do glaucoma, diabetes, glicemia, retinopatia diabética (s/n), tipo e estágio da retinopatia diabética, tratamentos da retinopatia diabética e tempo antes desta cirurgia planejada, tipo e estágio da hipertensão, tipo de doença renal e estágio, histórico de tabagismo, câncer, tipo de câncer, tratamento ou cirurgia, diagnósticos virais (HIV, CMV, HCV), histórico de trauma ocular contuso, histórico de catarata, cirurgia de remoção do cristalino, causa da vitrectomia, medicamentos e procedimentos concomitantes, observações de exames oftalmológicos relevantes a processos inflamatórios, dados de tomografia de coerência óptica. IOP, dados de campo visual [VF], acuidade visual, achados gonioscópicos,.