DNA mitocondriale nel liquido vitreo e nel sangue nei pazienti con malattie degli occhi o traumi oculari.

Lo studio mira a testare la correlazione tra la presenza del DNA mitocondriale nel fluido vitreo e nel sangue nei pazienti ricoverati presso la clinica oculistica dell'UTMB. L'obiettivo dello studio è analizzare 4 gruppi di 30 campioni di ciascuna delle principali malattie e lesioni oculari: degenerazione maculare senile, glaucoma e retinopatia diabetica e trauma oculare. Fino a 300 soggetti possono essere acconsentiti a questo studio al fine di raggiungere gli obiettivi di reclutamento. In questo studio utilizzeremo solo vitreo dell'occhio altrimenti scartato insieme a un campione di sangue raccolto durante l'intervento chirurgico. I pazienti con intervento di chirurgia oftalmica programmato che può provocare liquido vitreale scartato saranno identificati dal programma della clinica o dal medico al pronto soccorso. La possibilità di raccolta vitreale in un intervento chirurgico può essere incerta. Se un soggetto non ha scartato il vitreo da un determinato intervento chirurgico, da quel momento in poi verrà sottoposto a screening fallito prima del prelievo di sangue o della raccolta dei dati dalla cartella clinica elettronica. I soggetti saranno avvicinati quando appropriato per l'interesse alla partecipazione allo studio dal loro chirurgo della facoltà clinica. Un briefing sul consenso informato sarà fornito dal coordinatore della ricerca clinica con l'opportunità di porre domande sia al coordinatore, al chirurgo della facoltà clinica e al ricercatore principale. Copie del consenso saranno fornite al paziente da portare a casa. Verranno fornite ulteriori opportunità per porre domande la mattina dell'intervento. La firma del consenso sarà ottenuta prima di qualsiasi somministrazione di farmaci al momento del ricovero per intervento chirurgico. I campioni, se disponibili, verranno raccolti durante l'intervento chirurgico agli occhi. Verranno raccolti fino a 1 ml di liquido vitreo e fino a 10 ml di sangue da ciascun paziente. I campioni saranno conservati a temperatura ambiente e trasferiti direttamente al laboratorio del Dr. Szczesny. Il fluido vitreo sarà congelato per ulteriori analisi e il plasma sanguigno sarà processato usando l'istopaco e la centrifugazione prima del congelamento. Verranno condotti due tipi di analisi con i campioni biologici raccolti.1) Il DNA totale sarà isolato, seguito dall'analisi con reazione a catena della polimerasi quantitativa in tempo reale (RTq-PCR) utilizzando un set di primer per identificare la presenza del DNA mitocondriale e del DNA nucleare come controllo. 2) Le vescicole extracellulari saranno isolate mediante ultracentrifugazione o kit commercialmente disponibili seguite dall'analisi del DNA mitocondriale e nucleare e/o dei marcatori della membrana plasmatica mediante RTq-PCR e/o Western blot. Si accederà alle cartelle cliniche elettroniche per raccogliere informazioni demografiche e diagnostiche oftalmologiche e informazioni su altre diagnosi di comorbidità.

Questi dati includeranno età in anni, sesso, razza, etnia, presenza di degenerazione maculare legata all'età (AMD) (sì/no), tipo e stadio di AMD, uso di vitamine AREDs, trattamenti di AMD, glaucoma (sì/no ), tipo e stadio del glaucoma, diabete, glicemia, retinopatia diabetica (s/n), tipo e stadio della retinopatia diabetica, trattamenti della retinopatia diabetica e periodo di tempo prima dell'intervento programmato, tipo e stadio dell'ipertensione, tipo di malattia renale e stadio, anamnesi di fumo, cancro, tipo di cancro, trattamento o intervento chirurgico, diagnosi virali (HIV, CMV, HCV), anamnesi di trauma oculare contusivo, anamnesi di cataratta, intervento chirurgico di rimozione del cristallino, causa di vitrectomia, farmaci e procedure concomitanti, osservazioni relative all'esame oculistico ai processi infiammatori, dati di tomografia a coerenza ottica. IOP, dati del campo visivo [FV], acuità visiva, reperti gonioscopici.