Mitochondriale DNA in Glaskörperflüssigkeit und Blut bei Patienten mit Augenerkrankungen oder Augentrauma.

Ziel der Studie ist es, die Korrelation zwischen dem Vorhandensein der mitochondrialen DNA in der Glaskörperflüssigkeit und im Blut von Patienten zu testen, die in die Augenklinik des UTMB aufgenommen wurden. Ziel der Studie ist es, 4 Gruppen von 30 Proben jeder größeren Augenerkrankung und -verletzung zu analysieren: altersbedingte Makuladegeneration, Glaukom und diabetische Retinopathie und Augentrauma. Bis zu 300 Probanden können zu dieser Studie zugelassen werden, um die Rekrutierungsziele zu erreichen. In dieser Studie verwenden wir nur den ansonsten entsorgten Glaskörper des Auges zusammen mit einer Blutprobe, die während der Operation entnommen wird. Patienten mit geplanten Augenoperationen, bei denen Glaskörperflüssigkeit verworfen werden kann, werden anhand des Klinikplans oder vom Arzt in der Notaufnahme identifiziert. Die Möglichkeit einer Glaskörpersammlung in einer Operation kann ungewiss sein. Wenn ein Proband keinen Glaskörper aus einer bestimmten Operation verworfen hat, wird er ab diesem Moment vor der Blutentnahme oder der Datenerfassung aus der elektronischen Krankenakte fehlgeschlagen. Die Probanden werden bei Bedarf von ihrem klinischen Fakultätschirurgen auf Interesse an der Teilnahme an der Studie angesprochen. Der klinische Forschungskoordinator wird eine Einverständniserklärung nach Aufklärung geben, mit der Möglichkeit, sowohl dem Koordinator als auch dem Chirurgen der klinischen Fakultät und dem Hauptforscher Fragen zu stellen. Kopien der Einverständniserklärung werden dem Patienten mit nach Hause gegeben. Zusätzliche Gelegenheit für Fragen am Morgen der Operation wird zur Verfügung gestellt. Eine Einwilligungsunterschrift wird vor jeder Medikamentenverabreichung bei der Aufnahme zur Operation eingeholt. Falls verfügbar, werden während der Augenoperation Proben entnommen. Von jedem Patienten werden bis zu 1 ml Glaskörperflüssigkeit und bis zu 10 ml Blut entnommen. Die Proben werden bei Raumtemperatur gelagert und direkt in das Labor von Dr. Szczesny überführt. Glaskörperflüssigkeit wird zur weiteren Analyse eingefroren und Blutplasma wird vor dem Einfrieren mit Histopaque und Zentrifugation verarbeitet. Mit gesammelten Bioproben werden zwei Arten von Analysen durchgeführt.1) Die Gesamt-DNA wird isoliert, gefolgt von einer Analyse mit quantitativer Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RTq-PCR) unter Verwendung eines Satzes von Primern, um das Vorhandensein der mitochondrialen DNA und der Kern-DNA als Kontrolle zu identifizieren. 2) Extrazelluläre Vesikel werden mittels Ultrazentrifugation oder eines im Handel erhältlichen Kits isoliert, gefolgt von einer Analyse der mitochondrialen und nuklearen DNA und/oder Plasmamembranmarker mittels RTq-PCR und/oder Western Blot. Auf elektronische Krankenakten wird zugegriffen, um demografische und ophthalmologische Diagnoseinformationen sowie Informationen zu anderen Komorbiditätsdiagnosen zu sammeln.

Diese Datenpunkte umfassen Alter in Jahren, Geschlecht, Rasse, ethnische Zugehörigkeit, Vorhandensein einer altersbedingten Makuladegeneration (AMD) (j/n), Art und Stadium der AMD, Verwendung von AREDs-Vitaminen, Behandlungen von AMD, Glaukom (j/n ), Art und Stadium des Glaukoms, Diabetes, Blutzucker, diabetische Retinopathie (j/n), Art und Stadium der diabetischen Retinopathie, Behandlungen der diabetischen Retinopathie und Zeitdauer vor dieser geplanten Operation, Art und Stadium der Hypertonie, Art der Nierenerkrankung und Stadium, Raucheranamnese, Krebs, Krebstyp, Behandlung oder Operation, virale Diagnosen (HIV, CMV, HCV), Anamnese stumpfes Augentrauma, Anamnese Katarakt, Operation zur Linsenentfernung, Ursache der Vitrektomie, begleitende Medikamente und Verfahren, Augenuntersuchungsbeobachtungen relevant zu entzündlichen Prozessen, Daten der optischen Kohärenztomographie. IOD, Gesichtsfeld [VF] Daten, Sehschärfe, gonioskopische Befunde,.