Telecytologia jako narzędzie selekcji w LMIC

Badanie potrwa cztery miesiące. Konsultacja, na której klinicysta wykona kolposkopię i pobierze dodatkowe wycinki cytologiczne, będzie jedyną wizytą niezbędną pacjentowi w związku z badaniem.

Będziemy potrzebować trzydziestu nadających się do użytku próbek szyjki macicy z kliniki kolposkopii szpitala macierzyńskiego w Genewie. Szpatułkę użytą do pobrania rozmazu należy natychmiast przenieść do pojemnika na próbki o pojemności 10 ml, a główkę szpatułki odłamać i pozostawić w środku. Przyjmiemy tylko próbki spełniające wyżej wymienione warunki i spodziewamy się rekrutacji więcej niż potrzebnych 30 uczestników, jeśli próbkowanie będzie niewystarczające. Próbki zostaną przygotowane przez jednego z 3 techników laboratoryjnych w tym samym szpitalu przy użyciu ręcznej metody preparatyki płynnej Surepath®. Obejmuje to randomizację komórek, pipetowanie i wzbogacenie diagnostycznych komórek szyjki macicy poprzez wirowanie w komorze osadczej w celu utworzenia preparatów komórkowych w okręgu o średnicy 13 mm. Procedura barwienia Pap jest następnie stosowana w komorze.

Wszystkie trzydzieści szklanych slajdów zostanie zeskanowanych i zdigitalizowanych za pomocą kompaktowego przenośnego skanera (Ocus, ®40 firmy Grundium, Finlandia). Ten sam technik laboratoryjny, który przygotował próbkę szyjki macicy, zeskanuje preparat. Ocus ®40 ma pojemność 1 szkiełka i umożliwia akwizycję obrazu całego szkiełka, jak również mikroskopię zrobotyzowaną. Skaner jest wyposażony w 12-megapikselowy przetwornik obrazu z obiektywem o powiększeniu 40x (apertura numeryczna: 0,75) i można go podłączyć do laptopa za pośrednictwem bezprzewodowej sieci lokalnej (WLAN). Aby uniknąć nieostrych obszarów, użyjemy metody akwizycji stosu Z na trzech poziomach płaszczyzny ogniskowej z odstępem 1 µ. W Europie Ocus®40 posiada certyfikat IVDR do użytku diagnostycznego.

Łatwość metody ręcznego przygotowania i skanowania preparatów zostanie oceniona poprzez poproszenie technika laboratoryjnego o ocenę trudności od bardzo łatwej do bardzo trudnej na 5-stopniowej skali ocen (ocena 1 = bardzo trudna, 5 = bardzo łatwa) dla każdego etap przygotowania. Czas potrzebny na ręczne przygotowanie i skanowanie szkiełek będzie również mierzony stoperem i rejestrowany przez technika.

Charakterystyka jakościowa trzydziestu zdigitalizowanych preparatów zostanie oceniona jako doskonała, dobra, dostateczna lub słaba (na podstawie ostrości i wizualizacji poprzez grube skupiska komórek) przez dwóch cytopatologów czytających preparaty. Obliczony zostanie czas potrzebny do wyświetlenia zdigitalizowanych slajdów.

Ponadto oceniana będzie komórkowość w obszarze preparacji szkiełka podstawowego. Przy obiektywie 40× i okularze o numerze pola 20 całkowita liczba komórek zostanie obliczona przy użyciu następującego wzoru: N=n(acd/amf), gdzie N=całkowita liczba komórek, n=średnia liczba komórek 10 sąsiednich pól widzenia wzdłuż poziomej średnicy w środku koła, acd=powierzchnia osadu komórek i amf=powierzchnia pola mikroskopowego.

Dla każdego pacjenta zostaną zapisane i zapisane następujące dane

• numer od 1 do 30, który został nadany pacjentowi plus poprzednia diagnoza cytologiczna
• ocena łatwości dla każdego etapu ręcznego przygotowania preparatu (technik laboratoryjny)
• Ocena łatwości skanowania/digitalizacji slajdów (technik laboratoryjny)
• ocena jakości oparta na ostrości i wizualizacji przez grube skupiska komórek dla każdego szkiełka (cytopatolodzy)
• komórkowość każdego szkiełka (cytopatolodzy)
• czas potrzebny na przygotowanie (technik laboratoryjny), digitalizację (technik laboratoryjny) i przeczytanie (cytopatolodzy) preparatów

Będzie osobny formularz dla pracowników laboratoriów i cytopatologów. Dane od technika laboratoryjnego i cytopatologów zostaną następnie ujednolicone.