La telecitologia come strumento di triage nei LMIC

Lo studio si svolgerà nell'arco di quattro mesi. La consultazione in cui il medico esegue la colposcopia e preleva il campione citologico aggiuntivo sarà l'unica visita necessaria per il paziente in relazione allo studio.

Avremo bisogno di trenta campioni cervicali utilizzabili dalla clinica di colposcopia della Maternità di Ginevra. La spatola utilizzata per prelevare lo striscio deve essere immediatamente trasferita in un contenitore per campioni da 10 ml e la testa della spatola deve essere staccata e lasciata all'interno. Accetteremo solo campioni che hanno seguito le suddette condizioni e prevediamo di reclutare più dei 30 partecipanti necessari se il campionamento è insufficiente. I campioni saranno preparati da uno dei 3 tecnici di laboratorio presso lo stesso ospedale utilizzando il metodo di preparazione manuale a base liquida Surepath®. Ciò include la randomizzazione delle cellule, il pipettaggio e l'arricchimento delle cellule cervicali diagnostiche mediante centrifugazione utilizzando una camera di sedimentazione per creare una preparazione di vetrini cellulari in un cerchio di 13 mm di diametro. La procedura di colorazione Pap viene quindi applicata all'interno della camera.

Tutti e trenta i vetrini saranno scansionati e digitalizzati con uno scanner portatile compatto (Ocus, ®40 di Grundium, Finlandia). Lo stesso tecnico di laboratorio che ha preparato il campione cervicale eseguirà la scansione del vetrino. Ocus ®40 ha una capacità di 1 vetrino e consente l'acquisizione di un'immagine dell'intero vetrino così come la microscopia robotica. Lo scanner è dotato di un sensore di immagine da 12 megapixel con obiettivo 40x (apertura numerica: 0,75) e può essere collegato a un computer portatile tramite una connessione WLAN (Wireless Local Area Network). Per evitare che le aree risultino sfocate, utilizzeremo la modalità di acquisizione Z-stack a tre livelli del piano focale con un intervallo di 1 µ. In Europa, Ocus®40 è certificato IVDR per uso diagnostico.

La facilità del metodo di preparazione manuale e scansione dei vetrini verrà valutata chiedendo al tecnico di laboratorio di valutare la difficoltà da molto facile a molto difficile su una scala di valutazione a 5 punti (punteggio 1=molto difficile, 5=molto facile) per ogni fase di preparazione. Anche il tempo impiegato per la preparazione manuale e la scansione dei vetrini sarà misurato con un cronometro e registrato dal tecnico.

Le caratteristiche di qualità delle trenta diapositive digitalizzate saranno classificate come eccellenti, buone, discrete o scarse (in base alla nitidezza e alla visualizzazione attraverso cluster di cellule spesse) da due citopatologi che leggono le diapositive. Verrà calcolato il tempo impiegato per vagliare i vetrini digitalizzati.

Inoltre, la cellularità sarà valutata nell'area di preparazione del vetrino. Con un obiettivo 40× e un oculare con un numero di campo di 20, il numero totale di celle verrà calcolato utilizzando la seguente formula: N=n(acd/amf), dove N=conta totale delle celle, n=conta media delle celle di 10 campi visivi adiacenti lungo il diametro orizzontale al centro del cerchio, acd=area di deposito cellulare e amf=area di campo microscopico.

Per ogni paziente verranno registrati e conservati i seguenti dati

• il numero compreso tra 1 e 30 che è stato dato al paziente più la precedente diagnosi citologica
• la valutazione della facilità per ogni passaggio della preparazione manuale del vetrino (tecnico di laboratorio)
• Il rating di facilità per la scansione/digitalizzazione dei vetrini (tecnico di laboratorio)
• la valutazione della qualità basata sulla nitidezza e la visualizzazione attraverso cluster di cellule spesse per ogni vetrino (citopatologi)
• la cellularità di ogni vetrino (citopatologi)
• il tempo impiegato per preparare (tecnico di laboratorio), digitalizzare (tecnico di laboratorio) e leggere (citopatologi) i vetrini

Ci sarà un modulo separato per i fornitori di laboratorio e i citopatologi. I dati del tecnico di laboratorio e dei citopatologi saranno successivamente unificati.