Nowe zastosowanie kliniczne nanocząstek ferumoksytolu: leczenie przeciwbiofilmowe

Pacjenci zgłaszający się na Wydział Endodoncji Szkoły Medycyny Stomatologicznej Uniwersytetu Pensylwanii w celu oceny i rutynowego leczenia endodontycznego zakażonych, martwiczych zębów z przewlekłym zapaleniem przyzębia wierzchołkowego zostaną poproszeni o wzięcie udziału w badaniu, jeśli spełniają kryteria włączenia i zgłoszą się na ochotnika . Po potwierdzeniu kwalifikacji pacjenta, zostanie on przydzielony do leczenia w drodze losowania z pudełka przechowywanego w zamkniętej szafce. Przed leczeniem pacjenci zostaną szczegółowo poinformowani o charakterze, potencjalnym ryzyku i alternatywach badania oraz leczeniu kanałowym. Pacjentom zostanie przedstawiony pisemny formularz zgody dotyczący wyżej wymienionych cech badania, a także standardowe formularze zgody na leczenie kanałowe, w tym formularz zgody na leczenie endodontyczne, potwierdzenie zasad ochrony prywatności oraz formularz zrozumienia i świadomej zgody pacjenta. W skrócie pacjent zostanie znieczulony, a ząb odizolowany koferdamem. Do dezynfekcji zęba i koferdamu stosuje się 30% H2O2, a następnie 3% NaOCl. Usunięcie próchnicy i dostęp endodontyczny zostaną wykonane sterylnymi wiertłami szybkotnącymi z węglików spiekanych. Po przygotowaniu dostępu sterylnymi wiertłami i płukaniu sterylnym roztworem soli założono termoplastyczną gutaperkę w celu tymczasowego zablokowania ujścia. Pole łącznie z komorą miazgi jest czyszczone i dezynfekowane zgodnie z wcześniejszym opisem. NaOCl neutralizuje się 10% tiosiarczanem sodu. Próbkę do kontroli zanieczyszczeń (S0) zostanie pobrana z wewnętrznego kąta powierzchni jamy brzusznej, w którym przypadkowo zetkną się punkty papierowe podczas pobierania próbki. Po wstępnym dostępie do ujść kanałów korzeniowych zostanie zmierzona długość robocza, a z docelowych kanałów zostanie pobrana próbka bakteriologiczna ( S1). Sterylne ćwieki papierowe zostaną umieszczone w kanale, pozostawione do nasycenia, a następnie przeniesione do fiolki zawierającej płynny dentystyczny środek transportowy (LDT). W przypadku grupy NaOCl (kontrola dodatnia) kanały będą opracowywane do rozmiaru 25/0,04 zwężać, używając 2 ml 3% NaOCl pomiędzy plikami. W przypadku grupy Ferumoksytol/H2O2 kanały będą opracowywane do rozmiaru 25/0,04 zmniejszać, stosując 2 ml mieszaniny 6 mg/ml ferumoksytolu z 3% H2O2. W przypadku grupy zawierającej wyłącznie sól fizjologiczną kanały będą opracowywane do rozmiaru 25/0,04 zmniejszyć za pomocą 2 ml soli fizjologicznej. Po osiągnięciu ostatecznego rozmiaru stożka 25/0,04 zostanie pobrana druga próbka bakteryjna (S2). Przed wszystkimi próbkami podchloryn sodu, Feramehe/H2O2 i sól fizjologiczna. Zawartość kanału zostanie dezaktywowana za pomocą tiosiarczanu sodu w celu uzyskania NaOCl, a do leczenia Fer/H2O2 i soli fizjologicznej zostanie zastosowane płukanie solą fizjologiczną. Przeprowadzono etap płukania 1 ml soli fizjologicznej w celu przemycia roztworu dezaktywującego, a do osuszenia kanałów zastosowano sączki papierowe. Pobrano drugą próbkę bakteryjną (S2) poprzez umieszczenie LDT w kanale i wymieszanie go z roztworem 25/0,02 Pilnik ręczny Hedstroma, a następnie wchłonięcie zawartości 2 papierowymi ćwiekami umieszczonymi w kanale na 30 sekund każdy. Papierowe ćwieki zostaną umieszczone wewnątrz tuby zawierającej LDT. Pozostałe etapy leczenia rutynowego leczenia kanałowego zostaną przeprowadzone po tych zabiegach, włączając dalsze powiększanie końca korzenia i końcowy protokół rutynowej irygacji. Kanały korzeniowe zostaną osuszone za pomocą ćwieków papierowych, zostanie umieszczony lek (wodorotlenek wapnia), a zęby zostaną uszczelnione tymczasowym uzupełnieniem. Pacjenci wracają po jednym do czterech tygodni w celu zakończenia wypełniania korzenia. W przypadku żadnej z grup procedury lecznicze przeprowadzone w ramach tego badania nie odbiegają od standardowego protokołu leczenia kanałowego, z wyjątkiem dodatkowego etapu płukania roztworem doświadczalnym i procedur pobierania próbek bakteriologicznych. Papierowe ćwieki użyte do pobrania próbki bakteriologicznej zostaną przeniesione do laboratorium mikrobiologicznego za pomocą fiolki zawierającej 1 ml LDT. Procedury laboratoryjne będą wykonywane na Uniwersytecie Pensylwanii Leon Levy Oral Health Sciences Budynek Szkoły Medycyny Stomatologicznej w Laboratorium Mikrobiologicznym Etykiety fiolek będą zawierać informację o numerze zęba, numerze próbki (S0-S1-S2) i grupie eksperymentalnej. Próbki zostaną rozcieńczone i umieszczone na płytkach hodowlanych. Płytki hodowlane będą inkubowane w temperaturze 37°C w beztlenowej komorze rękawicowej zawierającej 5% wodoru, 5% CO2 i uzupełnienie N2 przez 5 dni. Po inkubacji liczbę jednostek tworzących kolonię określa się za pomocą stereoskopu. Do analizy statystycznej zostanie użyta analiza ANOVA i test t-Studenta.