Efekty oczne syntetycznych kannabinoidów (Bonsai)

MATERIAŁ I METODY Uczestnicy Badanie to zaprojektowano jako przekrojowe, obserwacyjne badanie kliniczno-kontrolne. Po skierowaniu z nadzorowanej przez sąd jednostki kuratorskiej Centrum Badań, Leczenia i Szkolenia Alkoholu i Substancji (AMATEM) odpowiedniego szpitala psychiatrycznego trzeciego stopnia w okresie od marca 2015 r. do stycznia 2016 r., 60 oczu 60 kolejnych mężczyzn płci męskiej zażywających w przeszłości syntetyczne kannabinoidy (SC) i 30 oczu dobranych pod względem wieku 30 zdrowych mężczyzn z grupy kontrolnej włączono do badania w 3 grupach: grupa kontrolna (n=30) obejmowała oczy osób bez historii używania jakichkolwiek substancji, w tym tytoniu, grupa seronegatywna SC (n =30) obejmowało oczy pacjentów deklarujących niestosowanie obecnie żadnej substancji, co potwierdzono trzema kolejnymi ujemnymi badaniami toksykologicznymi moczu wykonanymi w odstępie dwóch tygodni oraz grupę seropozytywną SC (n=30), obejmującą oczy pacjentów z dodatnimi wynikami badań toksykologicznych moczu potwierdzającymi obecne wykorzystanie SC.

SC i odpowiednie metabolity w próbkach moczu badano przesiewowo za pomocą bezpośredniego zestawu ELISA (K2 Enzyme Immunoassay, Immunalytic Corp., Pomona, Kalifornia, USA). Zestaw ten był w stanie wykryć odpowiednie metabolity, takie jak JWH-018, JWH-073 i AM-2201, przy poziomie odcięcia wynoszącym 20 ng/ml i więcej, aby uzyskać pozytywne wyniki. Zbadano także narażenie na klasyczne kannabinoidy, ecstasy, amfetaminę, opioidy i glikol etylenowy.

W odniesieniu do stosowania SC pacjentów pytano o czas trwania i ostatni raz stosowania. Ponadto szczegółowo kwestionowano dotychczasowe używanie innych substancji.

Ocena okulistyczna Wszystkie oczy przeszły badania okulistyczne, w tym autorefrakcję, badanie najlepiej skorygowanej ostrości wzroku (BCVA), biomikroskopię, bezdotykowy pomiar IOP i badanie rozszerzonego dna oka.

Doświadczony technik wykonał obrazowanie optycznej tomografii koherentnej w domenie widmowej (SD-OCT) wszystkich oczu po rozszerzeniu źrenic (1% tropikamid) i pomiarach skurczowego/rozkurczowego ciśnienia krwi (SBP/DBP). Wszystkie oceny SD-OCT przeprowadzono między 14:00 a 16:00, aby zminimalizować potencjalny wpływ zmienności dobowej. Do analizy przesyłano wyłącznie wysokiej jakości obrazy SD-OCT o wskaźniku siły sygnału (SSI) większym niż 50. Pomiary grubości okołodołkowej siatkówki (paradołkowej RT) i środkowej grubości dołka (CFT), tomografii komputerowej, grubości okołobrodawkowej RNFL i grubości GCC plamki wykonano za pomocą urządzenia RTVue-100 OCT (Optovue Inc., Fremont, USA), które miało 5 Osiowa rozdzielczość obrazu µm z szybkością 27 000 A-skanów na sekundę.

Do badania parametrów RNFL preferowaliśmy protokół mapy ONH. Protokół ten tworzy mapę grubości RNFL w oparciu o pomiary wokół okręgu o średnicy 3,45 mm, którego środkiem jest ONH. Protokół badania GCC opierał się na badaniu kwadratowej siatki (7 × 7 mm) na środkowej plamce po wycentrowaniu 1 mm skroniowo od plamki. Zbadano średnie, lepsze i gorsze wartości wyświetlane przez urządzenie dla średnich parametrów GCC i średnich RNFL.

Podziały segmentowe rejestrowano za pomocą protokołu MM5 wbudowanego oprogramowania, charakteryzującego się siatką 5 × 5 mm2 złożoną z 11 linii poziomych i 11 pionowych z 668 skanami typu A oraz wewnętrzną siatką 3 × 3 mm2 złożoną z 6 linii poziomych i 6 pionowych z 400 Skany A grubości siatkówki CFT o średnicy 1 mm. Tomografię komputerową mierzono poprzez przekrój przez linię środkową dołka, charakteryzującą się szerokością 8 mm, z 1024 skanami A zarejestrowanymi w trybie naczyniowo-siatkówkowym (te ustawienia umożliwiają ulepszone obrazowanie głębi wraz z dostrojeniem kontrastu i jasności). Linię obracano w poziomie i w pionie, tak aby ręcznie dokonać pomiarów najpierw w środkowym dołku, a następnie w odległości 750 µm w kierunku nosowym, skroniowym, górnym i dolnym, z funkcją linijki, przy użyciu linii rozciągającej się od tylnej krawędzi siatkówki nabłonek barwnikowy do połączenia naczyniowo-twardówkowego.

Strukturę naczyniówki analizowano metodą opisaną wcześniej przez Agrawala i wsp., a wszystkie zebrane obrazy poddano obróbce i analizie przy użyciu ogólnodostępnego oprogramowania ImageJ o otwartym kodzie źródłowym (wersja 1.50a, swobodnie dostępnego pod adresem http://imagej.nih. gov/ij/; Narodowy Instytut Zdrowia [NIH], Bethesda, Maryland). Zgodnie z tą metodą obraz został najpierw binaryzowany przy użyciu funkcji automatycznego lokalnego progowania Niblacka. Zapewniło to wyraźną wizualizację interfejsu naczyniowo-twardówkowego, a jednocześnie umożliwiło precyzyjny wybór obszaru zainteresowania, takiego jak całkowity obszar poddołkowy naczyniówki (TA). Za pomocą narzędzia do selekcji wielokątów wybrano ręcznie obszar poddołkowy naczyniówki o szerokości 1500 µm i szerokości 1500 µm, położony od nosa do skroni. Ciemne piksele reprezentujące obszar prześwitu (LA) wybrano za pomocą narzędzia progu koloru, a resztkowe jasne piksele uznano za obszar zrębu (SA). Poddołkowe CVI obliczono jako stosunek LA do TA. Pomiary ręczne (CT i CVI) przeprowadził ten sam doświadczony badacz, nie znając grup. Każdy pomiar powtórzono dwukrotnie, a w analizie wykorzystano średnią z dwóch pomiarów.

Analiza statystyczna Analizę statystyczną przeprowadzono za pomocą oprogramowania (wersja SPSS 22.0, IBM Corporation, Nowy Jork, USA). Statystyki opisowe podano jako średnią, odchylenie standardowe (SD) lub medianę (Med), rozstęp międzykwartylowy (Q1-Q3) oraz wartości częstości i stosunku (%), tam gdzie było to właściwe. Rozkład normalności dla każdego parametru oceniano za pomocą testu Kołmogorowa-Smirnowa. Stosowano odpowiednio testy parametryczne (dla rozkładu normalnego) lub nieparametryczne. Do analizy zmiennych niezależnych wykorzystano parametryczną analizę wariancji (ANOVA) za pomocą testu Tukeya post hoc lub nieparametrycznego testu Kruskala-Wallisa za pomocą testu U Manna-Whitneya skorygowanego post hoc Bonferroniego. Do analizy danych jakościowych wykorzystano test chi-kwadrat. Korelacje pomiarów grubości naczyniówki z parametrami istotnymi dla stosowania SC badano za pomocą testu Spearmana.