Effetti oculari dei cannabinoidi sintetici (Bonsai)

MATERIALI E METODI Partecipanti Questo studio è stato progettato come studio trasversale, osservazionale e caso-controllo. Su rinvio da parte dell'unità di libertà vigilata supervisionata dalla magistratura del Centro di ricerca, trattamento e formazione su alcol e sostanze (AMATEM) del relativo ospedale di psichiatria terziario tra marzo 2015 e gennaio 2016, 60 occhi di 60 pazienti maschi consecutivi con passato uso di cannabinoidi sintetici (SC) e 30 occhi di 30 soggetti maschi sani di controllo di pari età sono stati arruolati nello studio in 3 gruppi: un gruppo di controllo (n=30) includeva occhi di soggetti senza storia di uso di alcuna sostanza compreso il tabacco, un gruppo sieronegativo SC (n =30) includevano occhi di pazienti che dichiaravano di non utilizzare attualmente alcuna sostanza, come verificato da tre test tossicologici sulle urine negativi consecutivi eseguiti a due settimane di distanza, e un gruppo SC sieropositivo (n=30), inclusi occhi di pazienti con test tossicologici sulle urine positivi che dimostravano uso attuale di SC.

Le SC e i metaboliti rilevanti nei campioni di urina sono stati esaminati con un kit ELISA diretto (K2 Enzyme Immunoassay, Immunalysis Corp., Pomona, CA, USA). Questo kit è stato in grado di rilevare metaboliti rilevanti, come JWH-018, JWH-073 e AM-2201, con un livello limite di 20 ng/mL e oltre per risultati positivi. Sono state analizzate anche le esposizioni a cannabinoidi classici, ecstasy, anfetamine, oppioidi e glicole etilenico.

Per quanto riguarda l'uso SC, ai pazienti è stato chiesto quale fosse la durata e l'ultima volta in cui è stato utilizzato. Inoltre è stato messo in discussione in modo approfondito il precedente utilizzo di altre sostanze.

Valutazioni oftalmiche Tutti gli occhi sono stati sottoposti a esami oftalmici, tra cui l'autorifrazione, il test dell'acuità visiva meglio corretta (BCVA), la biomicroscopia, la misurazione della IOP senza contatto e l'esame del fondo oculare dilatato.

Un tecnico esperto ha eseguito l'imaging con tomografia a coerenza ottica del dominio spettrale (SD-OCT) di tutti gli occhi dopo la dilatazione della pupilla (1% di tropicamide) e le misurazioni della pressione sanguigna sistolica/diastolica (SBP/DBP). Tutte le valutazioni SD-OCT sono state condotte tra le 14:00 e le 16:00 per ridurre al minimo il potenziale effetto della variazione diurna. Sono state inviate per l'analisi solo le immagini SD-OCT di alta qualità con un indice di potenza del segnale (SSI) maggiore di 50. Le misurazioni dello spessore retinico parafoveale (RT parafoveale) e dello spessore foveale centrale (CFT), CT, spessore RNFL peripapillare e spessore GCC maculare sono state eseguite con un dispositivo OCT RTVue-100 (Optovue Inc., Fremont, USA), che aveva un 5 Risoluzione immagine assiale µm con una velocità di 27.000 A-scan al secondo.

Abbiamo preferito il protocollo della mappa ONH per esaminare i parametri RNFL. Questo protocollo crea una mappa di spessore RNFL basata su misurazioni attorno a un cerchio di 3,45 mm di diametro centrato sull'ONH. Il protocollo per la scansione GCC si basava sull'esame di una griglia quadrata (7 × 7 mm) sulla macula centrale dopo aver centrato 1 mm temporale rispetto alla macula. I valori medi, superiori e inferiori visualizzati dal dispositivo sono stati studiati per i parametri medi GCC e RNFL medi.

Le divisioni segmentali sono state registrate con il protocollo MM5 del software integrato, caratterizzato da una griglia 5×5 mm2 di 11 linee orizzontali e 11 verticali con 668 A-scan e una griglia interna 3×3 mm2 di 6 linee orizzontali e 6 verticali con 400 A-scansioni per lo spessore della retina di una CFT di 1 mm di diametro. La TC è stata misurata mediante sezione trasversale attraverso la linea centrale foveolare, caratterizzata da una larghezza di 8 mm, con 1024 A-scan catturati in modalità corioretinica (queste impostazioni consentono un imaging di profondità migliorato insieme alla regolazione del contrasto e della luminosità). La linea è stata ruotata orizzontalmente e verticalmente in modo che le misurazioni manuali siano state effettuate prima in corrispondenza della foveola centrale e poi a 750 µm di distanza nelle direzioni nasale, temporale, superiore e inferiore con la funzione righello, utilizzando una linea che si estende dal bordo posteriore della retina epitelio pigmentato alla giunzione coroidosclerale.

La struttura coroideale è stata analizzata utilizzando il metodo precedentemente descritto da Agrawal et al., e tutte le immagini raccolte sono state elaborate e analizzate utilizzando il software ImageJ open source e disponibile al pubblico (versione 1.50a, disponibile gratuitamente su http://imagej.nih. gov/ij/; National Institutes of Health [NIH], Bethesda, MD). Secondo questo metodo, l'immagine è stata prima binarizzata utilizzando la funzione di soglia auto-locale di Niblack. Ciò ha fornito una chiara visualizzazione dell'interfaccia coroidosclerale consentendo anche la selezione precisa di una regione di interesse, come l'area coroidale subfoveale totale (TA). Un'area coroidale subfoveale centrata sulla fovea, larga 1500 μm, da nasale a temporale è stata selezionata manualmente utilizzando lo strumento di selezione del poligono. I pixel scuri che rappresentano l'area luminale (LA) sono stati selezionati utilizzando lo strumento soglia colore e i pixel luminosi residui sono stati considerati l'area stromale (SA). Il CVI subfoveale è stato calcolato come il rapporto tra LA e TA. Le misurazioni manuali (CT e CVI) sono state eseguite dallo stesso sperimentatore esperto in cieco rispetto ai gruppi. Ciascuna misurazione è stata ripetuta due volte e nell’analisi è stata utilizzata la media delle due misurazioni.

Analisi statistica L'analisi statistica è stata condotta con un software (versione SPSS 22.0, IBM Corporation, New York, USA). Le statistiche descrittive sono state indicate come media, deviazione standard (SD) o mediana (Med), intervallo interquartile (Q1-Q3) e valori di frequenza e rapporto (%), ove appropriato. La distribuzione della normalità è stata valutata per ciascun parametro con il test di Kolmogorov-Smirnov. Sono stati applicati test parametrici (per la distribuzione normale) o non parametrici, a seconda dei casi. Per analizzare le variabili indipendenti è stata utilizzata un'analisi parametrica della varianza (ANOVA) con un test di Tukey post hoc o un test di Kruskal-Wallis non parametrico con un test U di Mann-Whitney corretto da Bonferroni post hoc. Per analizzare i dati qualitativi è stato utilizzato il test del chi quadrato. Le correlazioni delle misurazioni dello spessore coroideale con i parametri rilevanti per l'uso delle SC sono state studiate utilizzando il test di Spearman.