Dyssekcja Mikrośrodowiska Guza w Litych Guzach Pediatrycznych w Celu Poprawy Adoptywnej Terapii Komórkowej (MOST)

Pediatryczne guzy lite charakteryzują się niskim obciążeniem mutacyjnym, ograniczoną dostępnością neoantygenów oraz słabą infiltracją limfocytów naciekających guz (TIL) w mikrośrodowisku guza (TME), cechy te zmniejszają skuteczność immunoterapii u dzieci. Jednak guzy pediatryczne eksprimują podgrupę antygenów, które można wykorzystać jako cele. Stymulacja odpowiedzi limfocytów T przeciwko tym antygenom mogłaby przezwyciężyć bariery immunosupresyjne. Stosowanie terapii opartych na cytotoksycznych limfocytach T (CTL) stanowi obiecującą strategię.

Przeanalizowano łącznie 42 nowotwory, w tym: 8 neuroblastomów, 7 mięsaków, 4 nerczaki, 1 raka nerki, 2 mięśniaki prążkowanokomórkowe, 5 chłoniaków, 2 raki jajnika, 4 potworniaki, 2 guzy tarczycy oraz 7 innych rzadkich nowotworów. Pierwotne komórki z tych guzów zachowano, co doprowadziło do stabilizacji 5 linii komórkowych wykorzystanych do badań funkcjonalnych in vitro.

Obecnie rozszerzono 4 linie swoistych CTL pochodzące od zdrowych dorosłych dawców; swoiste wobec antygenów nowotworowych limfocyty T wykazały zdolność do rozpoznawania i zabijania komercyjnych linii komórek nowotworowych, a także stabilizowanych pediatrycznych linii guzów z mięsaka kościopochodnego, nerczaka i neuroblastoma. W szczególności bioreaktor G-Rex umożliwił większą ekspansję CTL przy zachowaniu szerokiego spektrum swoistości dla większości antygenów nowotworowych i fenotypu limfocytów ze zwiększonym składem wczesnych pamięciowych limfocytów T, co koreluje z większą trwałością in vivo.

Wyniki pokazują, że zastosowanie bioreaktorów stanowi znaczący postęp w produkcji CTL specyficznych dla pediatrycznych antygenów nowotworowych. Zdolność CTL pochodzących z bioreaktorów do ekspresji wczesnych markerów pamięci i aktywacji czyni je szczególnie obiecującymi dla zastosowań klinicznych, gdzie trwałość i skuteczność są kluczowymi czynnikami.

W oparciu o przedstawione wyniki, pogłębiona zostanie analiza trwałości in vivo i zdolności cytotoksycznych w modelach przedklinicznych, mając na celu potwierdzenie skuteczności wytworzonych komórek.

Głównym celem projektu jest opracowanie protokołów ekspansji CTL specyficznych dla pediatrycznych antygenów nowotworowych, proponując innowacyjne protokoły do ekspansji ex vivo CTL ukierunkowanych na pediatryczne antygeny nowotworowe.

Wreszcie, standaryzacja procesu na dużą skalę mogłaby być kolejnym niezbędnym celem, aby przełożyć te odkrycia na praktyczne zastosowania kliniczne, poprawiając immunoterapię w pediatrycznych nowotworach z oczywistymi korzyściami dla dotkniętych dzieci i opiekunów.