Investigando os efeitos do iogurte probiótico na redução dos níveis de toxinas ambientais entre crianças em idade escolar em Mwanza, Tanzânia (PDTX)

Um grupo de 60 alunos do primeiro ano da Lake Primary School será recrutado para inclusão no estudo. Depois de obter o consentimento do cuidador da criança, cada criança receberá um número de participante e amostras de sangue, urina e fezes serão coletadas de cada criança por pessoal qualificado do NIMR. As crianças serão randomizadas em dois grupos (n=30) de acordo com idade, sexo e peso, sendo que um deles receberá 100 g de iogurte probiótico contendo Lactobacillus rhamnosus GR-1 e o outro grupo receberá uma porção equivalente de leite. Após 30 dias de consumo do iogurte ou leite, as amostras serão novamente coletadas.

As amostras serão enviadas de volta para Londres, Ontário, Canadá, em gelo seco para análise. Sangue e urina serão analisados ​​por espectrometria de massa de plasma acoplado indutivamente com setor de alta resolução (HR-SF-ICP-MS) para determinar os níveis de metais pesados ​​tóxicos (Mercúrio, Chumbo, Cádmio, Arsênico). Isso será realizado pelo laboratório London Health Sciences Trace Elements, no Canadá. A urina também será analisada por cromatografia gasosa/espectrometria de massa (GC-MS) para determinar os níveis de pesticidas na Biotron Facility (University of Western Ontario). Também examinaremos a urina via RMN para possíveis alterações metabólicas do hospedeiro em resposta à instilação de probióticos.

Amostras de DNA da comunidade bacteriana serão extraídas e analisadas para determinar a microbiota gastrointestinal das crianças antes e depois da administração do iogurte probiótico para determinar o efeito do iogurte no microbioma intestinal. Resumidamente, o DNA será extraído com o kit de extração de DNA de fezes Qiagen e os genes 16S rRNA da comunidade bacteriana serão amplificados usando iniciadores com código de barras específicos para uma região variável dentro do gene. As amostras serão reunidas e sequenciadas na plataforma Ion Torrent (London Regional Genomics Center, Canadá). As leituras são então processadas e analisadas usando scripts personalizados, bem como a ferramenta Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME), que é o pacote líder para análise de microbiota.