O efeito da metilação do DNA leucocitário e da diversidade do microbioma nos mecanismos de defesa do hospedeiro durante a pneumonia adquirida na comunidade (BIOME ANTIGA) (ELDER-BIOME)

Justificativa:

A pneumonia adquirida na comunidade (PAC) representa um importante problema de saúde e a mortalidade e a morbidade associadas à pneumonia grave permanecem consideráveis, apesar dos cuidados de última geração.

Embora o papel da metilação alterada do DNA no câncer tenha sido amplamente estudado, o conhecimento de seu impacto na defesa antibacteriana é altamente limitado. Além disso, estudos pré-clínicos recentes mostraram que a microbiota intestinal e respiratória contribui para a defesa do hospedeiro contra a pneumonia bacteriana.

Este estudo visa explorar uma área de pesquisa completamente nova que liga a extensão da metilação do DNA em leucócitos sanguíneos (monócitos e neutrófilos) e a função da microbiota intestinal e respiratória na influência das respostas imunes inatas e da defesa do hospedeiro contra o CAP.

Objetivos primários:

1. Obter informações sobre o papel da metilação alterada do DNA em leucócitos sanguíneos (monócitos e neutrófilos) nas respostas imunes inatas e na defesa do hospedeiro em pacientes com PAC.
2. Determinar a composição e função da microbiota intestinal e respiratória em pacientes com PAC.

Objetivo Secundário:

1. Avaliar a influência da microbiota intestinal na metilação do DNA leucocitário em pacientes com PAC

Design de estudo:

Estudo observacional entre pacientes com PAC no Departamento de Emergência e Enfermaria de Medicina Interna do Centro Médico Acadêmico de Amsterdã

População do estudo:

231 pacientes com PAC e 115 indivíduos saudáveis ​​acima de 18 anos de idade.

Métodos:

Dos pacientes acima mencionados e voluntários saudáveis, um máximo de 90 ml de sangue será coletado para analisar padrões de metilação de DNA de monócitos e neutrófilos purificados, que serão analisados ​​em conexão com DNA metiltransferase e atividade de dez onze translocações (TET), expressão gênica de RNA e uma seleção de testes padrão de função imune inata. Além disso, monócitos e neutrófilos isolados de amostras de admissão serão estimulados in vitro com Streptococcus pneumoniae e Klebsiella pneumoniae. Além disso, swabs retais e nasofaríngeos serão obtidos para investigar o papel da composição e função da microbiota intestinal e respiratória. O material do paciente será obtido na inclusão e no dia 28, quando os pacientes serão atendidos no ambulatório para acompanhamento.

Natureza e extensão do ônus e riscos associados à participação, benefício e relacionamento com o grupo:

A participação neste estudo observacional não beneficiará os participantes e voluntários saudáveis. O estudo fornecerá informações sobre a influência da metilação do DNA dos leucócitos, bem como da microbiota intestinal e respiratória nos mecanismos de defesa do hospedeiro durante a PAC. O conhecimento obtido pode potencialmente beneficiar pacientes com PAC no futuro, fornecendo opções alternativas de tratamento modulador do sistema imunológico que modificam a resposta do hospedeiro. A carga e os riscos para os pacientes que participam do estudo ELDER-BIOME são mínimos. Os investigadores colherão 90 ml de sangue, 4 zaragatoas retais e 2 zaragatoas nasofaríngeas divididas em dois momentos (dia da apresentação e dia 28 após a apresentação). Voluntários saudáveis ​​serão submetidos a uma coleta de sangue (70 ml) e 2 esfregaços retais e 2 nasofaríngeos em um único momento.