Ácidos graxos monoinsaturados e tecido adiposo marrom/bege em humanos

HIPÓTESE Os efeitos do consumo de ácidos graxos no tecido adiposo marrom/bege ainda não foram explorados em humanos. No entanto, estudos que avaliaram os efeitos da substituição de ácidos graxos saturados por ácidos graxos monoinsaturados (MUFAs) ou ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs) em modelos animais e humanos observaram uma melhora nos fatores de risco cardiovascular, como redução da inflamação subclínica, melhora da perfil e aumento da sensibilidade à insulina. Os mecanismos pelos quais esses ácidos graxos atuam na melhora dos fatores de risco não foram totalmente esclarecidos e é possível que haja associação entre a redução dos fatores de risco cardiovascular e a ativação do tecido adiposo marrom/bege.

Nossa hipótese é que consumir azeite de oliva extra virgem em grandes quantidades por um mês promoverá aumento da atividade do tecido adiposo marrom (BAT) dos participantes e melhorará o perfil de risco cardiovascular, conforme avaliado por marcadores inflamatórios. É possível que a resposta de indivíduos magros e obesos à intervenção dietética seja diferente e que o comportamento do BAT não seja igual em ambos os grupos.

OBJETIVO Avaliar o impacto do consumo de grandes quantidades de azeite de oliva extra virgem (fonte de ácidos graxos monoinsaturados) na atividade do tecido adiposo marrom/bege em humanos magros e obesos.

2.1 Objetivos específicos • Investigar a atividade do tecido adiposo marrom e bege por FDG PET/RMI, antes e após quatro semanas de intervenção com elevada quantidade de azeite de oliva extra virgem; • Avaliar a expressão de marcadores de atividade BAT: proteína de desacoplamento 1 (UCP-1), domínio PR contendo 16 (PRDM16), receptor gama ativado por proliferador de peroxissoma 1-alfa (PGC-1α), iodotironina deiodinase 2 (Dio2) em células mononucleares em toda a amostra;

• Avaliar os níveis de ácidos graxos no sangue por cromatografia gasosa, antes e após a intervenção para avaliar alterações na ingestão de ácidos graxos;
• Avaliar as concentrações de citocinas pró e anti-inflamatórias no sangue antes e após 4 semanas de intervenção: fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucina 1-beta (IL1β), proteína quimioatraente de monócitos-1 (MCP-1), interleucina-6 e interleucina-10);
• Avaliar os efeitos das intervenções nos marcadores metabólicos antes e após a intervenção: leptina, insulina, glicose, colesterol total e frações, triglicerídeos;
• Avaliar os efeitos da intervenção na antropometria (peso, circunferência abdominal) e na composição corporal avaliada por absorciometria de raios X de dupla energia (DXA);
• Avaliar os efeitos de intervenções dietéticas na atividade cerebral (pela PET/RMi) em uma subamostra de 15 indivíduos.

MATERIAIS E MÉTODOS Este será um ensaio clínico aberto com duração de quatro semanas. O estudo consiste em duas coletas de dados antes e depois de uma intervenção dietética de 4 semanas, na qual os participantes serão obrigados a consumir azeite extra-virgem fornecido pelos pesquisadores.

A coleta de dados sociodemográficos, dietéticos e de atividade física, bem como o PET/RM e as coletas de sangue de 50 participantes serão realizadas no Centro de Medicina Nuclear da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. A densitometria óssea (DXA) será realizada na Faculdade de Saúde Pública da Universidade de São Paulo.

Seleção dos participantes:

O número estimado de indivíduos com tecido adiposo marrom detectável (50) é de 50%, com a proporção de indivíduos com tecido adiposo marrom detectável. Incluirá 15 indivíduos obesos (obesidade grau I) e 35 indivíduos controles (indivíduos com peso normal). Os participantes serão selecionados por meio de mídia impressa e eletrônica.

• Critérios de inclusão Para o grupo com obesidade: Ambos os sexos, idade entre 25 e 40 anos, IMC ≥ 30 e <35 kg/m2.

Para o grupo de peso normal (controle): Ambos os sexos, idade entre 25 e 40 anos, IMC <25 kg/m2.

• Critério de exclusão

  1) Residir fora de São Paulo/Campinas; 2) mulheres grávidas; 3) pacientes com problemas neurológicos ou psiquiátricos graves ou não estabilizados; 4) uso de medicação antiobesidade ou hipolipemiante; 5) uso de drogas adrenérgicas ou benzodiazepínicas; 6) portadores de neoplasias, doenças transmissíveis e reumáticas, insuficiência hepática ou renal, disfunção tireoidiana não tratada; Diabetes melito; 7) alteração de mais de 5% do peso corporal nos últimos seis meses; 8) estar realizando algum tipo de dieta ou modificação no padrão alimentar habitual; 9) possuem próteses metálicas.

• Desenho Trata-se de um ensaio clínico aberto com duração total de quatro semanas. Os participantes obesos e controles serão inscritos em uma intervenção dietética por 4 semanas com azeite de oliva extra virgem (rico em MUFA). Azeite extra virgem (2 litros) é fornecido aos participantes e os pesquisadores orientam os participantes a usar o óleo em todas as preparações durante as quatro semanas.

Antes e depois de cada período de intervenção serão recolhidos os seguintes dados:

- Consumo alimentar: recordatório de 24 horas (antes e após intervenção dietética) e diário alimentar de 3 dias;

• Dados de atividade física: Questionário Internacional de Atividade Física (IPAQ);
• Avaliação do volume e atividade do tecido adiposo marrom/bege:

Tomografia por emissão de pósitrons com fluorodesoxiglicose marcada com flúor 18 (18F-FDG) em combinação com ressonância magnética (PET/RMi).

Para o FDG PET/RMI os participantes serão alocados em sala com temperatura controlada (19 graus), com roupas leves e colete de resfriamento por 2 horas.

- Avaliação da composição corporal: Peso (balança digital) e estatura (estadiômetro fixo); circunferência abdominal; composição corporal: por absorciometria de raios X de dupla energia (DXA);

- Dosagens bioquímicas: glicose plasmática, triglicerídeos, colesterol total e HDL-c serão determinados rotineiramente e marcadores inflamatórios serão determinados por ensaio imunoenzimático (ELISA);

- A expressão de UCP-1, PGC-1α, PRDM16 e Dio2 será realizada por reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR);

- A composição dos ácidos graxos no plasma será determinada por cromatografia gasosa;

- Atividade cerebral: será realizada em uma subamostra de 15 indivíduos utilizando 18F-FDG PET/RMi.

• Análise estatística Os dados serão expressos como média e desvio padrão e as variáveis ​​comparadas pelo teste t de Student ou ANOVA para medidas repetidas.