Efeito da pioglitazona administrada a pacientes com adrenomieloneuropatia (XAMNPIOP2011)

A prova de conceito para este estudo é fornecida pelos resultados dos efeitos bioquímicos, neuropatológicos e motores da pioglitazona em dois modelos de AMN em camundongos. A pioglitazona foi administrada por via oral (9 mg/kg/dia) durante dois meses em ambos os modelos.

O modelo de camundongo Abcd1-nulo já mostra aos 3,5 meses sinais bioquímicos de estresse oxidativo que aumentam com o tempo e são então associados a alterações da homeostase energética, embora os primeiros sinais clínicos de AMN-i.e. axonopatia e comprometimento locomotor aparecem aos 20 meses. Nestes camundongos, há anomalias mitocondriais, diminuição dos níveis de PGC-1α, que é um regulador mestre da biogênese mitocondrial, e diminuição dos níveis e da atividade de SIRT1α, que ativa o PGC-1α.

O camundongo Abcd1-nulo pode ser considerado como um modelo "AMN-like", devido à ausência de lesões desmielinizantes no cérebro e na medula espinhal, a presença de axonopatia ''dying-back'' não inflamatória nos nervos periféricos e na medula espinhal e seus déficits motores de início tardio que são marcas registradas de AMN em pacientes com X-ALD. Este modelo foi usado para avaliar a eficácia da pioglitazona em vários marcadores bioquímicos na medula espinhal de camundongos Abcd1 nulo (N = 12), usando comparações com camundongos Abcd1 nulo tratados com placebo (N = 12) ou camundongos de tipo selvagem (N=12).

Em camundongos Abcd1 nulo tratados com pioglitazona aos 10,5 meses de idade e estudados aos 12 meses (1,5 meses após o início do tratamento em andamento), as anomalias mitocondriais foram corrigidas para o nível de camundongos de controle de tipo selvagem. De fato, os níveis de DNA e proteína mitocondrial (incluindo PGC-1α, NRF1 e TFAM) foram corrigidos; bem como o metabolismo mitocondrial, avaliado pela atividade da piruvato quinase, concentrações de ATP e NAD+. A pioglitazona não teve efeito na expressão de SIRT1 (mRNA e níveis de proteína). No entanto, a pioglitazona reduziu significativamente a carbonilação da proteína SIRT1, o que presumivelmente explica o resgate observado da atividade de SIRT1.

Nesses camundongos tratados com pioglitazona, as lesões oxidativas na medula espinhal foram revertidas. Os biomarcadores de estresse oxidativo estudados incluíram marcadores de lesões oxidativas em proteínas (GSA, AASA), lipídios (MDAL) e carboidratos (CEL). Além disso, a atividade e o nível de concentração das enzimas antioxidantes GPX1, que foram aumentadas em camundongos nulos para Abcd1 não tratados, mas não para SOD2, foram normalizados para o nível de camundongos selvagens.

O segundo modelo de camundongo é o nocaute duplo (DKO), no qual os transportadores Abcd1 e Abcd2 são inativados. O Abcd1-/Abcd2-/-DKO exibe maior acúmulo de VLCFA na medula espinhal (Pujol et al., 2004), níveis mais altos de dano oxidativo às proteínas e uma patologia semelhante à AMN mais grave, com início mais precoce de comprometimento motor do que o único camundongo Abcd1 nulo (12 meses no DKO em comparação com 20 meses em camundongos Abcd1 nulo). A eficácia da pioglitazona nos níveis motor e neuropatológico foi estudada em 17 camundongos Abcd1-/Abcd2-/-, comparando-os com camundongos Abcd1-/Abcd2-/- tratados com placebo (N=17) e camundongos selvagens (N=25) .

Em camundongos Abcd1-/Abcd2-/- tratados com pioglitazona aos 13 meses de idade e estudados aos 15 ou 17 meses (duração do tratamento de 2 a 4 meses), a degeneração axonal foi evitada, conforme mostrado pela normalização para o nível de controle do número de axônios positivos de APP ou sinaptofisina.

Além disso, a pioglitazona interrompeu a progressão dos déficits locomotores nesses camundongos, conforme avaliado pelo teste de esteira e pelo teste de barra cruzada. De fato, os desempenhos locomotores de pioglitazona DKO após quatro meses de tratamento em camundongos atingiram os desempenhos dos controles.

No geral, esses estudos mostram a eficácia do tratamento com pioglitazona em "camundongos semelhantes a AMN" e fornecem uma forte justificativa para a realização de um ensaio clínico aberto preliminar com pioglitazona em pacientes com AMN.