Coleta Prospectiva de Amostras para Câncer Urotelial de Bexiga (ProCSUCaB)

O ProCSUCaB (Coleta Prospectiva de Amostras para Câncer Urotelial de Bexiga) é um registro prospectivo monocêntrico, não intervencional, que recrutará pacientes recém-diagnosticados com NMIBC de risco intermediário e alto em um centro terciário em Flandres.

Dados clínicos e bioamostras (sangue, urina e tecido BC) serão coletados de cada paciente no diagnóstico inicial antes da cirurgia e serão armazenados a -80 °C no BioBank UZ Leuven após processamento adequado de acordo com o protocolo. Nestas amostras serão realizadas análises multi-ômicas de alto rendimento (genômica, epigenômica, transcriptômica, proteômica, lipidômica, metabolômica) e imuno-histopatológicas.

Pacientes de ambos os sexos e com idade ≥18 anos, com sinal de diagnóstico clínico de CM (sintomas e/ou exames de imagem), são elegíveis para participar deste estudo. Os pacientes, que derem seu consentimento informado para coletar seus materiais biológicos antes da cirurgia, serão incluídos no estudo após o diagnóstico histopatológico da amostra TURBT mostrar um NMIBC de risco intermediário ou alto. Serão analisados ​​apenas os dados dos pacientes com CCT, admitindo-se qualquer subtipo histopatológico variante.

Todos os pacientes serão tratados e acompanhados com o padrão de atendimento baseado nas recomendações das Diretrizes da EAU de acordo com seus grupos de risco. Todos os acompanhamentos serão agendados para 5 anos, pois a maioria das recorrências ou progressões ocorre durante esse período.

Para cumprir as leis de privacidade locais, todos os dados demográficos e clínicos (para diagnóstico inicial e após recorrências e/ou progressões) serão armazenados prospectivamente em um banco de dados específico, que é implementado no sistema de arquivo eletrônico do paciente do hospital e protegido por firewalls [24 ]. Todos os pacientes receberão um número de identificação do estudo e os nomes (ou quaisquer outros dados de identificação) serão removidos das bioamostras coletadas; portanto, todos os laboratórios de anatomia e patologia não saberão a identidade e os dados clínicos dos pacientes. A correspondência entre os números de identificação do estudo e os nomes dos pacientes será mantida apenas pelo departamento de urologia em um banco de dados seguro.

Amostras de sangue, urina e tecido BC serão coletadas no diagnóstico inicial para cada paciente. Sangue e urina serão coletados pelas enfermeiras no departamento de internação na manhã anterior ao TURBT. Após o processamento pelo pessoal dedicado, eles serão enviados para o BioBank UZ Leuven, que monitorou e alertou continuamente freezers, manuseio robótico e sistema de armazenamento e implementou o Código Pré-analítico Padrão (SPREC).

Coleta de sangue: Na manhã anterior ao TURBT (entre 07:00 e 11:00), o sangue será coletado dos pacientes em cinco tubos separados (4 tubos de 10 mL EDTA para genômica, epigenômica, transcriptômica e proteômica; 1x 6 mL tubo EDTA para lipidômica e metabolômica). A data e a hora da coleta serão registradas no 'Formulário de Amostragem de Urina/Sangue' pela enfermeira. Todos os tubos de sangue serão invertidos suavemente 10 vezes após a coleta de sangue. Todos os tubos de EDTA serão imediatamente colocados na geladeira a +4°C na posição vertical até a centrifugação. Todas as amostras de sangue serão centrifugadas dentro de 4 horas após a coleta, e a data e hora da centrifugação serão registradas no 'Formulário de Processamento e Armazenamento de Sangue'. Após processar todas as amostras de sangue de acordo com o protocolo específico de cada análise, todas as amostras de plasma/pellet/sangue total em criotubos serão enviadas ao BioBank UZ Leuven para serem armazenadas a -80 °C, e a data e hora da aceitação da amostra também será registrado.

Coleta de urina: Um total de 230 mL de urina de jato médio será coletado em cinco tubos da segunda urina da manhã (entre 07h00 e 11h00) antes do TURBT. O paciente deve estar bem hidratado. A data e a hora da coleta serão registradas no 'Formulário de Amostragem de Urina/Sangue' pela enfermeira. As amostras de urina serão imediatamente armazenadas a +4 °C na geladeira e processadas dentro de 2 horas após a coleta, e a data e hora da centrifugação serão registradas no 'Formulário de Processamento e Armazenamento de Urina'. Após o processamento de todas as amostras de urina de acordo com o protocolo específico de cada análise, todas as amostras em criotubos serão enviadas ao BioBank UZ Leuven para serem armazenadas a -80 °C, sendo também registrada a data e hora de aceitação da amostra.

Coleta de tecido: Durante TURBT, se o tumor for grande o suficiente (> 10 mm de diâmetro), um grande chip que inclui a haste do tumor será cortado com o ressectoscópio. A amostra será colocada em um criotubo, e logo em seguida enviada ao BioBank. A data e hora da coleta e aceitação serão registradas no 'Formulário de Amostragem e Armazenamento de Tecidos'. A criossecção será realizada a partir de amostras congeladas por um uropatologista antes das análises ômicas para verificar a presença e a área de NMIBC de risco intermediário e alto. Após o laudo do uropatologista, as amostras congeladas serão dissecadas para retirada de peças enriquecidas em células tumorais. O diagnóstico histopatológico dos pacientes será feito de acordo com a coloração de hematoxilina-eosina (HE) das lâminas dos blocos fixados em formalina e embebidos em parafina (FFPE), que determinará a inclusão final do NMIBC de risco intermediário e alto pacientes.