Prospektywne pobieranie próbek na raka urotelialnego pęcherza moczowego (ProCSUCaB)

ProCSUCaB (Prospective Collection of Samples for Urothelial Cancer of Bladder) to monocentryczny, nieinterwencyjny, prospektywny rejestr, który będzie rekrutował nowo zdiagnozowanych pacjentów z NMIBC średniego i wysokiego ryzyka w ośrodku trzeciego stopnia we Flandrii.

Dane kliniczne i biopróbki (krew, mocz i tkanka BC) zostaną pobrane od każdego pacjenta podczas wstępnej diagnozy przed operacją i będą przechowywane w temperaturze -80°C w BioBanku UZ Leuven po odpowiednim przetworzeniu zgodnie z protokołem. Na tych próbkach zostaną przeprowadzone wysokowydajne analizy multiomiczne (genomika, epigenomika, transkryptomika, proteomika, lipidomika, metabolomika) i immunohistopatologiczne.

Do badania kwalifikują się pacjenci obojga płci iw wieku ≥18 lat, z sygnałem klinicznego rozpoznania BC (objawy i/lub badania obrazowe). Pacjenci, którzy wyrażą świadomą zgodę na pobranie materiału biologicznego przed operacją, zostaną włączeni do badania po tym, jak rozpoznanie histopatologiczne próbki TURBT wykaże NMIBC średniego lub wysokiego ryzyka. Analizowane będą tylko dane pacjentów z TCC, z uwzględnieniem dowolnego wariantu podtypu histopatologicznego.

Wszyscy pacjenci będą leczeni i monitorowani zgodnie ze standardem opieki opartym na zaleceniach wytycznych EAU zgodnie z ich grupami ryzyka. Wszystkie wizyty kontrolne będą zaplanowane na 5 lat, ponieważ większość nawrotów lub progresji ma miejsce w tym okresie.

Aby zachować zgodność z lokalnymi przepisami dotyczącymi prywatności, wszystkie dane demograficzne i kliniczne (do celów wstępnej diagnozy oraz kolejnych nawrotów i/lub progresji) będą prospektywnie przechowywane w specjalnej bazie danych, która jest wdrożona w elektroniczny system akt pacjentów szpitala i chroniona zaporami [24]. ]. Wszyscy pacjenci otrzymają numer identyfikacyjny badania, a nazwiska (lub inne dane identyfikujące) zostaną usunięte z pobranych próbek biologicznych; dlatego wszystkie laboratoria -omiki i patologii nie będą znać tożsamości i danych klinicznych pacjentów. Korespondencja między numerami identyfikacyjnymi badań a nazwiskami pacjentów będzie przechowywana wyłącznie przez oddział urologiczny w zabezpieczonej bazie danych.

Próbki krwi, moczu i tkanki BC będą pobierane podczas wstępnej diagnozy od każdego pacjenta. Krew i mocz będą pobierane przez pielęgniarki na oddziale szpitalnym rano przed zabiegiem TURBT. Po przetworzeniu przez dedykowany personel zostaną one wysłane do BioBanku UZ Leuven, który stale monitoruje i alarmuje zamrażarki, zrobotyzowany system obsługi i przechowywania oraz wdrożył standardowy kod przedanalityczny (SPREC).

Pobieranie krwi: Rano przed TURBT (między 07:00 a 11:00) od pacjentów zostanie pobrana krew do pięciu oddzielnych probówek (4x 10 ml probówki z EDTA do genomiki, epigenomiki, transkryptomiki i proteomiki; 1x 6 ml probówka z EDTA do lipidomiki i metabolomiki). Data i godzina pobrania zostaną zapisane przez pielęgniarkę w „Formularzu pobierania próbek moczu/krwi”. Wszystkie probówki z krwią zostaną delikatnie odwrócone 10 razy po pobraniu krwi. Wszystkie probówki z EDTA należy natychmiast umieścić w lodówce w temperaturze +4°C w pozycji pionowej do czasu wirowania. Wszystkie próbki krwi zostaną odwirowane w ciągu 4 godzin od pobrania, a data i godzina wirowania zostaną zapisane w „Formularzu przetwarzania i przechowywania krwi”. Po przetworzeniu wszystkich próbek krwi zgodnie z określonym protokołem każdej analizy, wszystkie próbki osocza/granulek/pełnej krwi w kriofiolkach zostaną przesłane do BioBank UZ Leuven w celu przechowywania w temperaturze -80°C, a data i godzina przyjęcia próbki również zostanie nagrany.

Pobieranie moczu: Łącznie 230 ml moczu ze środkowego strumienia zostanie pobrane do pięciu probówek z drugiego moczu rano (między 07:00 a 11:00) przed TURBT. Pacjent powinien być dobrze nawodniony. Data i godzina pobrania zostaną zapisane przez pielęgniarkę w „Formularzu pobierania próbek moczu/krwi”. Próbki moczu będą natychmiast przechowywane w temperaturze +4°C w lodówce i przetwarzane w ciągu 2 godzin po pobraniu, a data i godzina wirowania zostaną zapisane w „Formularzu przetwarzania i przechowywania moczu”. Po przetworzeniu wszystkich próbek moczu zgodnie z określonym protokołem każdej analizy, wszystkie próbki w kriofiolkach zostaną przesłane do BioBanku UZ Leuven w celu przechowywania w temperaturze -80 °C, a data i godzina przyjęcia próbki zostaną również odnotowane.

Pobieranie tkanek: Podczas TURBT, jeśli guz jest wystarczająco duży (>10 mm średnicy), za pomocą resektoskopu zostanie wycięty duży chip zawierający łodygę guza. Próbka zostanie umieszczona w kriofiolce i niezwłocznie wysłana do BioBanku. Data i godzina pobrania i przyjęcia zostaną zapisane w „Formularzu pobierania i przechowywania tkanek”. Kriosekcja zostanie przeprowadzona z zamrożonych próbek przez uropatologa przed analizami -omicznymi w celu sprawdzenia obecności i obszaru NMIBC średniego i wysokiego ryzyka. Po raporcie uropatologa z zamrożonych próbek zostanie wypreparowana część wzbogacona w komórki nowotworowe. Rozpoznanie histopatologiczne pacjentów zostanie przeprowadzone na podstawie barwienia hematoksyliną-eozyną (HE) preparatów z utrwalonych w formalinie bloczków zatopionych w parafinie (FFPE), które określą ostateczne włączenie NMIBC średniego i wysokiego ryzyka pacjenci.