Recolección prospectiva de muestras para cáncer urotelial de vejiga (ProCSUCaB)

ProCSUCaB (Prospective Collection of Samples for Urothelial Cancer of Bladder) es un registro prospectivo, no intervencionista y monocéntrico que reclutará pacientes con CVNMI de riesgo intermedio y alto recién diagnosticados en un centro terciario en Flandes.

Los datos clínicos y las biomuestras (sangre, orina y tejido BC) se recopilarán de cada paciente en el diagnóstico inicial antes de la cirugía y se almacenarán a -80 °C en el BioBank UZ Leuven después del procesamiento adecuado de acuerdo con el protocolo. En estas muestras se realizarán análisis multiómicos de alto rendimiento (genómica, epigenómica, transcriptómica, proteómica, lipidómica, metabolómica) e inmunohistopatología.

Los pacientes de ambos sexos y con edad ≥18 años, con señal de diagnóstico clínico de CM (síntomas y/o imagenología), son elegibles para participar en este estudio. Los pacientes que den su consentimiento informado para recolectar sus materiales biológicos antes de la cirugía, serán incluidos en el estudio después de que el diagnóstico histopatológico de la muestra de TURBT muestre un CVNMI de riesgo intermedio o alto. Únicamente se analizarán los datos de los pacientes con CCT, admitiéndose cualquier variante del subtipo histopatológico.

Todos los pacientes serán tratados y seguidos con el estándar de atención basado en las recomendaciones de las Guías de la EAU según sus grupos de riesgo. Todos los seguimientos se programarán durante 5 años ya que la mayoría de las recurrencias o progresiones ocurren durante este período.

Para cumplir con las leyes de privacidad locales, todos los datos clínicos y demográficos (para el diagnóstico inicial y las recurrencias y/o progresiones posteriores) se almacenarán prospectivamente en una base de datos específica, que se implementará en el sistema de archivo electrónico de pacientes del hospital y se protegerá con cortafuegos [24]. ]. Todos los pacientes recibirán un número de identificación del estudio y los nombres (o cualquier otro dato de identificación) se eliminarán de las muestras biológicas recolectadas; por lo tanto, los laboratorios de all-ómica y patología no conocerán la identidad y datos clínicos de los pacientes. La correspondencia entre los números de identificación del estudio y los nombres de los pacientes será mantenida únicamente por el departamento de urología en una base de datos segura.

Se recolectarán muestras de sangre, orina y tejido BC en el diagnóstico inicial de cada paciente. Las enfermeras del departamento de pacientes hospitalizados recolectarán sangre y orina en la mañana antes de la TURBT. Después de que el personal dedicado los procese, se enviarán al BioBank UZ Leuven, que ha monitoreado y alarmado continuamente los congeladores, el manejo robótico y el sistema de almacenamiento, y ha implementado el Código preanalítico estándar (SPREC).

Recolección de sangre: en la mañana anterior a la TURBT (entre las 07:00 y las 11:00 a. m.), se extraerá sangre de los pacientes en cinco tubos separados (4 tubos de EDTA de 10 ml para genómica, epigenómica, transcriptómica y proteómica; 1x 6 Tubo mL EDTA para lipidómica y metabolómica). La enfermera registrará la fecha y la hora de recolección en el 'Formulario de muestreo de orina/sangre'. Todos los tubos de sangre se invertirán suavemente 10 veces después de la extracción de sangre. Todos los tubos EDTA se colocarán inmediatamente en el frigorífico a +4°C en posición vertical hasta la centrifugación. Todas las muestras de sangre se centrifugarán dentro de las 4 horas posteriores a la recolección, y la fecha y la hora de la centrifugación se registrarán en el "Formulario de almacenamiento y procesamiento de sangre". Después de procesar todas las muestras de sangre de acuerdo con el protocolo específico de cada análisis, todas las muestras de plasma/semillas/sangre completa en crioviales se enviarán al BioBank UZ Leuven para que se almacenen a -80 °C, y la fecha y hora de aceptación de la muestra también se grabará.

Recolección de orina: Se recolectará un total de 230 ml de orina del chorro medio en cinco tubos de la segunda orina de la mañana (entre las 07:00 y las 11:00 a. m.) antes de la TURBT. El paciente debe estar bien hidratado. La enfermera registrará la fecha y la hora de recolección en el 'Formulario de muestreo de orina/sangre'. Las muestras de orina se almacenarán inmediatamente a +4 °C en el refrigerador y se procesarán dentro de las 2 horas posteriores a la recolección, y la fecha y hora de la centrifugación se registrarán en el "Formulario de almacenamiento y procesamiento de orina". Después de procesar todas las muestras de orina de acuerdo con el protocolo específico de cada análisis, todas las muestras en crioviales se enviarán al BioBank UZ Leuven para que se almacenen a -80 °C, y también se registrará la fecha y hora de aceptación de la muestra.

Recolección de tejido: durante la TURBT, si el tumor es lo suficientemente grande (>10 mm de diámetro), se cortará con el resectoscopio un gran fragmento que incluye el tallo del tumor. La muestra se colocará en un criovial y se enviará inmediatamente al Biobanco. La fecha y la hora de recogida y aceptación se registrarán en el 'Formulario de muestreo y almacenamiento de tejidos'. Un uropatólogo realizará una criosección a partir de muestras congeladas antes de los análisis ómicos para verificar la presencia y el área de NMIBC de riesgo intermedio y alto. Tras el informe del uropatólogo, se diseccionarán muestras congeladas para tomar piezas enriquecidas en células tumorales. El diagnóstico histopatológico de los pacientes se realizará según la tinción con hematoxilina-eosina (HE) de los portaobjetos de los bloques fijados en formol e incluidos en parafina (FFPE), que determinará la inclusión definitiva de los TVNMI de riesgo intermedio y alto. pacientes