Pré-tratamento com hormônio do crescimento em Poseidon tipo IV submetido a ICSI usando protocolo de indução mínima: um estudo controlado randomizado (Growth hormone)

Os pacientes são recrutados entre os participantes da clínica de infertilidade e da unidade de fertilização in vitro na maternidade Ain Shams University que são elegíveis para o teste.

Procedimento será feito pelo Prof. Dr. Mostafa Fouad. e o palestrante Dr. Ebtihal ElTaieb

* Histórico adequado, exame e investigações para:

• excluir outras causas de infertilidade.
• Histórico menstrual: para avaliação de oligo ou anovulação.
• Histórico médico: .
• História pregressa: tentativas anteriores de tratamento de infertilidade ou síndrome de hiperestimulação ovariana.
• História obstétrica: para perdas gestacionais recorrentes.
• Exame clínico, incluindo:
• Medição da pressão arterial
• Avaliação do hirsutismo por meio do escore de Ferriman-Gallwey modificado
• Avaliação de alopecia e acne.
• Avaliação do perfil hormonal: FSH sérico basal, LH, E2, progesterona, AMH, testosterona sérica total, SHBG (para cálculo do IFA), DHEA, DHEAS, TSH, prolactina e cortisol livre urinário de 24 horas (para descartar síndrome de Cushing).
• Análise do sêmen: para descartar a causa masculina da infertilidade como teratospermia ou azospermia.
• Ultrassonografia transvaginal: pelo mesmo ultrassonografista ginecológico experiente usando uma máquina de ultrassom Voluson E6 Expert (General Electric®, Fairfield, CT, EUA) para critérios U/S de SOP, AFC e exclusão de quaisquer patologias uterinas ou pélvicas.
• Histerossalpingografia (HSG): para excluir qualquer anormalidade uterina, tubária ou peritoneal.

Os pacientes que se encaixam nos critérios de inclusão e exclusão serão randomizados para os dois grupos de estudo. Será utilizada uma lista gerada por computador via Software MedCalc ® versão 13.2.2, atribuindo cada número de participante a um dos grupos de estudo. A atribuição será feita por envelopes selados (SNOSE) numerados sequencialmente, caso contrário, idênticos, cada um contendo um papel de 2 polegadas por 2 polegadas com um código escrito que designa o grupo designado. Esses papéis serão colocados em uma folha de papel alumínio dobrada encaixada dentro do envelope. Serão envidados esforços para garantir a ausência de quaisquer diferenças detectáveis ​​em tamanho ou peso entre os envelopes de intervenção e de controle. Os envelopes serão escolhidos para serem opacos e forrados internamente com papel carbono. Os envelopes serão abertos sequencialmente somente após escrever as informações de rastreamento do sujeito no envelope para que o papel carbono sirva como uma trilha de auditoria.

Após a inscrição, cada paciente escolhe aleatoriamente um envelope contendo um número, para que as pacientes não saibam da atribuição (técnica simples-cega), em seguida, o protocolo de estimulação ovariana controlada será aplicado de acordo com a letra anexa (A ou B) guiada pelo computador tabela de randomização baseada.

Os pacientes foram aleatoriamente designados para um dos dois grupos paralelos:

• Grupo A: protocolo de estimulação leve + adjuvante de hormônio de crescimento
• Grupo B: protocolo de estimulação leve

Intervenções do estudo: Os pacientes de ambos os grupos receberam protocolo de estimulação leve:

O protocolo de hiperestimulação ovariana controlada será realizado de acordo com um protocolo flexível de antagonista de GnRH + citrato de clomofina.

A estimulação ovariana começará com uma dose diária fixa de 100 mg de citrato de clomifeno diariamente e o FSH recombinante (Gonal-F®) será iniciado no dia 2 do ciclo menstrual em uma dose de 150 UI a ser ajustada posteriormente de forma gradual a cada 2 a 4 dias de acordo com a resposta ovariana (Kolibianakis et al., 2011).

. Para as do grupo GH, serão administradas 8 UI de GH humano recombinante a partir do dia 14 do ciclo anterior até a administração de HCG para desencadeamento da ovulação, enquanto as do grupo controle receberão o mesmo protocolo de estimulação sem o tratamento adjuvante com GH.

• O acompanhamento de TVU/S será feito em dias alternados, começando no dia 6 da estimulação.
• Cetrotide® 0,25 mg será iniciado quando pelo menos um dos seguintes critérios for atendido: LH >10 UI/L, presença de folículo com diâmetro médio >12 mm e nível sérico de E2 >150 pg/mL e continuado até a administração de HCG .
• Quando o folículo líder atingir 16 mm, o TV U/S será realizado diariamente até que o maior folículo atinja um diâmetro > 18 mm. A duração máxima da estimulação rFSH não poderá exceder o dia 16.
• RECUPERAÇÃO DE OÓCITOS, FERTILIZAÇÃO E TRANSFERÊNCIA DE EMBRIÕES
• A coleta ovariana será feita 36 horas após a injeção de HCG, o transdutor será conectado ao sistema de ultrassom. A direção do feixe guia será verificada. A agulha de punção será conectada a um aparelho de aspiração preso por um anel de fixação nas extremidades anterior e posterior do transdutor vaginal, definindo assim a direção da punção correspondente ao feixe guia na imagem ultrassonográfica. Os oócitos serão aspirados pela técnica de aspiração padrão utilizando cateter Wallace® 101 (Smiths medical®, Minnesota, EUA) utilizando pressão de aspiração 90-100mmHg utilizando a técnica de flushing.

Para maximizar o número de oócitos recuperados, aspiração folicular seguida de uma única descarga de 2 mL usando meio de cultura de embriões. Após a aspiração inicial, os folículos foram lavados e aspirados três vezes cada um com 2 mL de meio de lavagem.

• A injeção intracitoplasmática de espermatozoides será realizada em oócitos em metáfase II utilizando a técnica de penetração direta. Os resultados da fertilização serão avaliados 16 a 19 horas após a ICSI. A fecundação será considerada normal pela presença de dois pronúcleos. A degeneração oocitária foi identificada pelo colapso do conteúdo citoplasmático e separação da zona. A falha na fertilização será definida pela ausência dos pronúcleos.
• A transferência embrionária será realizada no 3º dia de ICSI, guiada por ultrassom na parte médio-corpórea da cavidade uterina, utilizando cateter de transferência soft Wallace® (Smiths medical®, Minnesota, EUA).
• A fase lútea será suportada por progesterona natural na forma de supositórios vaginais 400 mg duas vezes ao dia, começando no dia da coleta do oócito até o teste de gravidez.