Risco cardiovascular em bebês expostos à pré-eclâmpsia no útero

Desenho do estudo Este será um estudo prospectivo de caso-controle envolvendo bebês nascidos de gestantes com pré-eclâmpsia (casos) como caso e bebês nascidos de mães normotensas (controle). As mães serão recrutadas no Hospital Acadêmico Nelson Mandela, Mthatha, Província do Cabo Oriental da África do Sul. Este é um hospital terciário para o qual são encaminhados todos os casos especializados dos hospitais periféricos. Embora a prevalência de EP na África do Sul seja de pouco mais de 5% nacionalmente, 18% de todos os casos obstétricos consultados no Nelson Mandela Academic Hospital em Mthatha são casos de EP (dados não publicados). Portanto, não será um grande desafio recrutar o número desejado de pacientes com EP durante o período do estudo.

Cálculo do tamanho da amostra O estudo realizado por Amini et al, (2010) mostrou diferenças na pressão arterial (PA) entre neonatos de mães normotensas e pré-eclâmpticas5. A diferença na PA sistólica sanguínea (PAS) foi muito alta (normotensos: 49,85±5,49 versus pré-eclâmptica: 68,2±149). Como a variância e o desvio padrão da PAS foram muito altos no grupo pré-eclâmptica, optamos por usar os valores da pressão arterial diastólica (normotensa: 30,17±11,89 versus pré-eclâmptica: 42,11±11,49) para cálculo do tamanho da amostra. O software - R foi usado: alfa = 0,01, diferença média = 11,94 e padrão = 0,05, respectivamente. Os resultados mostraram que o tamanho total da amostra é de 97 (48 casos e 49 controles). Assumimos que nem todos os participantes retornariam para o acompanhamento. Assim, ajustamos nosso tamanho amostral em 20% para compensar possíveis perdas de seguimento. Portanto a amostra total será de 97 + (97x20/100) = 117 neonatos. No entanto, o estudo começará com o recrutamento de 117 gestantes (58 gestantes com pré-eclâmpsia e 59 gestantes normotensas que atendem aos critérios de seleção).

Aprovação ética A aprovação ética e a permissão para realizar o projeto de pesquisa foram solicitadas ao Comitê de Ética e Pesquisa da Faculdade de Ciências da Saúde (HRSEC) da Walter Sisulu University (WSU). Quando o projeto for aprovado, os Departamentos Provinciais e Distritais de Saúde serão abordados para liberação e aprovação.

Consentimento informado O propósito do estudo será explicado minuciosamente aos potenciais participantes que frequentam a clínica pré-natal no Nelson Mandela Academic Hospital, Mthatha, Eastern Cape Province. As mulheres grávidas que atenderem aos critérios de seleção e estiverem dispostas a participar do estudo deverão assinar formulários de consentimento informado para participar do estudo e permitir que seus filhos participem do estudo desde o nascimento.

Protocolo de pesquisa As mulheres grávidas que atenderem aos critérios de seleção serão recrutadas entre as semanas 20 e 26 de gestação, enquanto os dados serão coletados na semana 30 de gestação. Os participantes serão lembrados da visita ao hospital para coleta de dados com antecedência para que possam fazer toda a preparação necessária para passar algum tempo extra no hospital.

1. Informações básicas: O histórico demográfico, obstétrico e médico da mãe será coletado da participante por meio de um questionário.
2. Medidas antropométricas: Altura e peso serão determinados de acordo com as recomendações do NHANES, recomendações 2009-201024
3. Confirmação do estado de pré-eclâmpsia: Os arquivos do hospital serão usados ​​para confirmar o estado de pré-eclâmpsia.
4. Medições da pressão arterial: A pressão arterial do consultório será medida conforme descrito por Putner et al., (2019)25
5. Dilatação mediada por fluxo. Será utilizado um aparelho de ultrassom portátil Mobile Esaote MyLabTM Five (Gênova, Itália) com uma sonda Esaote Doppler (LA523, 12 MHz) conectado a um software computadorizado com tecnologia de detecção de borda (Quipu Cardiovascular Suite (CVS)™; Pisa, Itália). A função endotelial será medida conforme descrito por Strijdom et al (2017)26
6. A ultrassonografia gestacional será realizada para determinar a morfometria, arquitetura e vascularização da placenta. As artérias uterinas, umbilical e cerebral média serão avaliadas e o índice de pulsação média da artéria uterina determinado. A razão cefaloplacentária fetal e a antropometria serão calculadas quando possível.
7. Medição de marcadores de estresse oxidativo: Será coletado sangue em jejum para determinação do estresse oxidativo no ambiente materno ao qual o feto está exposto.

No nascimento: A idade gestacional no parto e o tipo de parto serão anotados. A pontuação do APGAR (1-5 minutos) será determinada, o peso e a altura/comprimento da criança serão medidos. O sangue do cordão umbilical será coletado para determinação dos títulos de risco de DCV conforme indicado abaixo.

1. Marcadores de função endotelial: Endocan e dimetilarginina assimétrica (ADMA), marcadores de função endotelial serão testados usando kits ELISA de acordo com as instruções dos fabricantes.
2. Marcadores de estresse oxidativo: Peroxidação lipídica, capacidade antioxidante total e 8-hidroxil-2-desoxiguanina (8-OHdG) serão determinados usando kits ELISA conforme protocolos do fabricante.
3. Perfil lipídico: colesterol total, triglicerídeos, colesterol LDL e colesterol HDL e colesterol LDL oxidado serão medidos de acordo com o protocolo do fabricante usando kits colorimétricos de acordo com as instruções do fabricante
4. Resistência à insulina: As concentrações de glicose em jejum, hemoglobina glicada e insulina serão determinadas de acordo com os métodos do fabricante. A fórmula HOMA-IR será usada para calcular a resistência à insulina a partir de glicose e insulina em jejum, conforme descrito por Mather et al, 1985)27.
5. Índices de função renal: taxa de filtração glomerular (GFR), creatinina e albumina serão determinados usando kits colorimétricos de acordo com as instruções dos fabricantes
6. Medidas da pressão arterial: Para a medida da PA será utilizada a técnica oscilométrica (Dinamap 8100) de acordo com o protocolo padrão para avaliação da medida da PA em recém-nascidos de Nwankwo et al. (1997)28.
7. Medidas antropométricas: Todas as medidas foram feitas conforme relatado por Meldere et al. (2013) 29.
8. A rigidez arterial será avaliada pela medição da velocidade da onda de pulso braquiofemoral (bfPWV) usando um dispositivo oscilométrico (Vicorder, Skidmore Medical) conforme relatado por Alwan et al., 201530.