Origem da Microbiota Intestinal Neonatal e da Intervenção Probiótica

Desenho do estudo e participantes Um total de 30 amostras foram obtidas de gestantes que receberam cuidados pré-natais no 1º Hospital Afiliado da Universidade de Jinan. O consentimento informado foi obtido de mulheres grávidas (pelo menos 32 semanas de gestação) que atenderam aos critérios de inclusão. Os recém-nascidos foram acompanhados até 14 dias após o parto natural. Os critérios inclusivos para gestantes foram: 1. Mulher chinesa grávida de um único feto; 2. Primeira gravidez e parto a termo. Os critérios inclusivos dos recém-nascidos foram: 1. Peso normal (>2.500 g, <4.000 g); 2. Bebê a termo (>37 semanas, <42 semanas). 3. Nascimento natural. Os critérios exclusivos para gestantes foram: 1. Doença gastrointestinal ou história familiar; 2. Vaginite antes da gravidez; 3. Uso de antibióticos durante a gravidez; 4. Hipertensão, Diabetes Mellitus, Hipertireoidismo, Hipotireoidismo, Doença Autoimune ou Outras Doenças Endócrinas e Metabólicas; 5. Doença Hipertensiva Gestacional, Diabetes Mellitus Gestacional ou Outra Doença Gestacional; 6. História de Transfusão, História de Transplante de Órgãos ou História de Imunoterapia. Os critérios exclusivos para recém-nascidos foram: 1. Peso anormal (>4.000 g, <2.500 g); 2. Com Doenças Congênitas;3. Complicação Fetal Intraparto.

Manejo de probióticos Em nosso estudo, quatorze mulheres grávidas foram designadas aleatoriamente para o grupo probiótico e o restante foi designado para o grupo controle. Após a inscrição, as mulheres grávidas no grupo probiótico receberam uma combinação de comprimidos vivos de Bifidobacterium longum (5 ∗ 106 UFC), Lactobacillus delbrueckii bulgaricus (5 ∗ 105 UFC) e Streptococcus thermophilus (5 ∗ 105 UFC) produzidos pela Neimengu Shuangqi Pharmaceutical Co., Ltda. As gestantes do grupo probiótico receberam dois comprimidos duas vezes ao dia (2 g/dia) até o parto natural, e as do grupo controle não tomaram nenhum comprimido.

Coleta de fezes, secreção vaginal, placenta e mecônio Coleta de fezes As fezes de pacientes grávidas foram coletadas duas vezes entre as semanas 32 e 34 e antes do parto natural. As fezes coletadas nas semanas 32-34 foram coletadas internamente, evitando assim a contaminação com material estranho. As fezes foram armazenadas em geladeira doméstica e transferidas para o freezer do laboratório a -80 ºC por 24 horas. As fezes coletadas antes do parto foram obtidas no hospital e transferidas para o freezer do laboratório em até 30 minutos após a coleta.

Coleta de secreção vaginal As secreções vaginais foram coletadas duas vezes entre as semanas 32 e 34 e antes do parto natural. A gestante foi orientada a não praticar comportamento sexual, limpar a vulva, limpar a vagina ou usar medicamento vaginal nas 48 horas anteriores à coleta da amostra. As secreções vaginais antes do parto natural foram coletadas antes que ocorresse a ruptura da membrana. As amostras foram transferidas para o freezer do laboratório em até 30 minutos após a coleta, evitando assim contaminação por material estranho.

Coleta de placenta Amostras de placenta variando de todo o cordão umbilical até 3 cm foram coletadas por remoção da membrana amniótica após o nascimento natural. O sangue foi enxaguado com solução salina estéril. Quatro a seis pedaços de placenta foram amostrados da superfície fetal. Cada peça tinha um volume de aproximadamente 1 cm3. A amostra de placenta foi transferida para o freezer do laboratório 30 minutos após a coleta.

Coleta de mecônio O mecônio foi coletado três vezes no 1º dia, no 3º dia e no 14º dia após o parto natural. No 1º dia e no 3º dia, o mecônio foi coletado internamente, evitando contaminação com material estranho no hospital, e foi transferido para congelador do laboratório dentro de 30 minutos após a coleta. No 14º dia, o mecônio foi coletado, armazenado em geladeira doméstica e transferido para freezer do laboratório em até 24 horas após a coleta.