Pochodzenie mikroflory jelitowej noworodków i interwencja probiotyczna

Projekt badania i uczestnicy Ogółem pobrano 30 próbek od ciężarnych kobiet objętych opieką przedporodową w 1. Szpitalu Stowarzyszonym Uniwersytetu Jinan. Świadomą zgodę uzyskano od kobiet w ciąży (co najmniej 32. tydzień ciąży), które spełniły kryteria włączenia. Noworodki obserwowano do 14 dni po porodzie naturalnym. Kryteriami włączającymi kobiety w ciąży były: 1. Chinka w ciąży z jednym płodem; 2. Pierwsza ciąża i poród donoszony. Kryteriami włączającymi noworodków były: 1. Normalna waga (>2500 g, <4000 g); 2. Niemowlę donoszone (>37 tygodni, <42 tygodnie). 3. Poród naturalny. Wyłącznymi kryteriami ciąży były: 1. Choroba przewodu pokarmowego lub wywiad rodzinny; 2. Zapalenie pochwy przed ciążą; 3. Stosowanie antybiotyków w czasie ciąży; 4. Nadciśnienie, cukrzyca, nadczynność tarczycy, niedoczynność tarczycy, choroba autoimmunologiczna lub inna choroba endokrynologiczna i metaboliczna; 5. Nadciśnienie ciążowe, cukrzyca ciążowa lub inna choroba ciążowa; 6. Historia transfuzji, historia przeszczepiania narządów lub historia immunoterapii. Kryteriami wyłącznymi noworodków były: 1. Nieprawidłowa masa ciała (>4000 g, <2500 g); 2. Z chorobami wrodzonymi;3. Powikłania śródporodowe u płodu.

Zarządzanie probiotykami W naszym badaniu czternaście kobiet w ciąży zostało losowo przydzielonych do grupy probiotycznej, a pozostałe do grupy kontrolnej. Po włączeniu do grupy probiotyków kobiety w ciąży otrzymywały kombinację żywych Bifidobacterium longum (5 ∗ 106 CFU), Lactobacillus delbrueckii bulgaricus (5 ∗ 105 CFU) i Streptococcus thermophilus (5 ∗ 105 CFU) firmy Neimengu Shuangqi Pharmaceutical Co., Sp. z o.o. Kobietom w ciąży w grupie probiotyków podawano dwie tabletki dwa razy dziennie (2 g/d) do naturalnego porodu, natomiast kobiety z grupy kontrolnej nie przyjmowały żadnych tabletek.

Pobieranie kału, wydzieliny z pochwy, łożyska i smółki Pobieranie kału Kał od pacjentek w ciąży pobierano dwukrotnie pomiędzy 32. a 34. tygodniem oraz przed naturalnym porodem. Kał zebrany w tygodniach 32-34 zebrano wewnętrznie, unikając w ten sposób zanieczyszczenia ciałami obcymi. Kał przechowywano w domowej lodówce i przenoszono do zamrażarki laboratoryjnej w temperaturze -80°C na 24 godziny. Kał pobrany przed porodem w szpitalu i przeniesiony do zamrażarki laboratoryjnej w ciągu 30 minut od pobrania.

Pobieranie wydzieliny z pochwy Wydzielinę z pochwy pobierano dwukrotnie pomiędzy 32. a 34. tygodniem oraz przed naturalnym porodem. Kobietę w ciąży poproszono, aby w ciągu 48 godzin przed pobraniem próbki nie podejmowała zachowań seksualnych, nie oczyszczała sromu, pochwy ani nie stosowała leków dopochwowych. Wydzielinę z pochwy zebrano przed naturalnym porodem, zanim nastąpiło pęknięcie błony śluzowej. Próbki przenoszono do zamrażarki laboratoryjnej w ciągu 30 minut od pobrania, unikając w ten sposób zanieczyszczenia ciałami obcymi.

Pobieranie łożyska Próbki łożyska o długości od całej pępowiny do 3 cm pobrano poprzez usunięcie błony owodniowej po naturalnym porodzie. Krew przepłukano sterylną solą fizjologiczną. Z powierzchni płodu pobrano od czterech do sześciu kawałków łożyska. Każdy kawałek miał objętość około 1 cm3. Próbkę łożyska przenoszono do zamrażarki laboratoryjnej w ciągu 30 minut od pobrania.

Pobieranie smółki Smółkę pobierano trzykrotnie w 1., 3. dniu i 14. dniu po porodzie naturalnym. W 1. i 3. dniu smółkę pobierano wewnętrznie, unikając w ten sposób zanieczyszczenia ciałami obcymi w szpitalu, i przenoszono ją do szpitala do zamrażarki laboratoryjnej w ciągu 30 minut od pobrania. W 14. dniu zebrano smółkę, przechowywano ją w domowej lodówce, a następnie w ciągu 24 godzin od pobrania przeniesiono do zamrażarki laboratoryjnej.