Origine del microbiota intestinale neonatale e intervento probiotico

Disegno dello studio e partecipanti Sono stati ottenuti un totale di 30 campioni da donne incinte che ricevevano cure prenatali presso il primo ospedale affiliato dell'Università di Jinan. Il consenso informato è stato ottenuto da donne in gravidanza (almeno 32 settimane di gestazione) che soddisfacevano i criteri di inclusione. I neonati sono stati seguiti fino a 14 giorni dopo il parto naturale. I criteri inclusivi di gravidanza erano: 1. Donna cinese incinta di un solo feto; 2. Prima gravidanza e parto a termine. I criteri inclusivi dei neonati erano: 1. Peso normale (>2500 g, <4000 g); 2. Neonato a termine (>37 settimane, <42 settimane). 3. Nascita naturale. I criteri esclusivi per la gravidanza erano: 1. Malattia gastrointestinale o storia familiare; 2. Vaginite prima della gravidanza; 3. Utilizzo di antibiotici durante la gravidanza; 4. Ipertensione, diabete mellito, ipertiroidismo, ipotiroidismo, malattia autoimmune o altra malattia endocrina e metabolica; 5. Malattia ipertensiva gestazionale, diabete mellito gestazionale o altra malattia gestazionale; 6. Storia di trasfusioni, storia di trapianto di organi o storia di immunoterapia. I criteri esclusivi del neonato erano: 1. Peso anormale (>4000 g, <2500 g); 2. Con malattie congenite;3. Complicazioni fetali intrapartum.

Gestione dei probiotici Nel nostro studio, quattordici donne incinte sono state assegnate in modo casuale al gruppo probiotico e le restanti al gruppo di controllo. Dopo l'arruolamento, le donne incinte nel gruppo probiotico hanno ricevuto una combinazione di compresse viventi di Bifidobacterium longum (5 * 106 CFU), Lactobacillus delbrueckii bulgaricus (5 * 105 CFU) e Streptococcus thermophilus (5 * 105 CFU) prodotte da Neimengu Shuangqi Pharmaceutical Co., Ltd. Alle persone incinte del gruppo probiotico sono state somministrate due compresse due volte al giorno (2 g/giorno) fino al parto naturale, mentre quelle del gruppo di controllo non hanno assunto alcuna pillola.

Raccolta fecale, secrezione vaginale, placentare e meconio Raccolta fecale Le feci delle pazienti in gravidanza sono state raccolte due volte, tra le settimane 32 e 34 e prima del travaglio naturale. Le feci raccolte alle settimane 32-34 sono state raccolte internamente, evitando così la contaminazione con materiale estraneo. Le feci sono state conservate in un frigorifero domestico e trasferite nel congelatore del laboratorio a -80°C per 24 ore. Le feci raccolte prima del travaglio venivano ottenute in ospedale e trasferite nel congelatore del laboratorio entro 30 minuti dalla raccolta.

Raccolta delle secrezioni vaginali Le secrezioni vaginali sono state raccolte due volte tra le settimane 32 e 34 e prima del travaglio naturale. Alla donna incinta è stato chiesto di non avere rapporti sessuali, di pulire la vulva, di pulire la vagina o di non usare medicinali vaginali nelle 48 ore precedenti la raccolta del campione. Le secrezioni vaginali prima del travaglio naturale sono state raccolte prima che si verificasse la rottura della membrana. I campioni sono stati trasferiti nel congelatore del laboratorio entro 30 minuti dalla raccolta, evitando così la contaminazione da materiale estraneo.

Raccolta della placenta Campioni di placenta di dimensioni variabili dall'intero cordone ombelicale fino a 3 cm sono stati raccolti rimuovendo la membrana amniotica dopo il parto naturale. Il sangue è stato risciacquato con soluzione salina sterile. Dalla superficie fetale sono stati campionati da quattro a sei pezzi di placenta. Ogni pezzo aveva un volume di circa 1 cm3. Il campione di placenta è stato trasferito nel congelatore da laboratorio entro 30 minuti dalla raccolta.

Raccolta del meconio Il meconio è stato raccolto tre volte il 1° giorno, il 3° giorno e il 14° giorno dopo il parto naturale. Il 1° giorno e il 3° giorno, il meconio è stato raccolto internamente, evitando così la contaminazione con materiale estraneo in ospedale, ed è stato trasferito in nel congelatore da laboratorio entro 30 minuti dal prelievo. Il 14° giorno, il meconio è stato raccolto, conservato in un frigorifero domestico e poi trasferito in un congelatore da laboratorio entro 24 ore dalla raccolta.