Чувствительность к гистамину при синдроме МакКьюна-Олбрайта

Задачи этого исследования заключаются в том, чтобы определить:

1. Пациенты с синдромом МакКьюна-Олбрайта отличаются от здоровой контрольной группы волдырями и гиперемией в ответ на гистамин и кодеин.
2. Пораженная кожа будет отличаться от здоровой кожи волдырями и гиперемией в ответ на гистамин и кодеин.
3. Уровни IgE и IL-4 у пациентов с MAS отличаются от нормальных контролей.

Конкретные цели:

1. Сравните кожную реакцию пациентов с MAS с нормальным контролем, используя стандартные кожные тесты на гистамин и кодеин.
2. Сравните реакцию кожных проб у пациентов с MAS с известными стандартами кожных проб. Сравните реакцию на кожные пробы с гистамином и кодеином пораженной (кофе с молоком) кожи пациента с МАС и непораженной (нормальной) кожи.
3. Сравните уровни IgE и IL-4 у пациентов с MAS по сравнению с контрольной группой.

Задний план:

Синдром МакКьюна-Олбрайта (MAS) представляет собой генетическое заболевание, характеризующееся конститутивной активацией белков Gαs, участвующих в ферменте аденилатциклазе. В настоящее время известно, что заболевание вызывается генетической мутацией, обычно заменой аргинина на гистадин или цистеин в аминокислоте 201 в белке Gαs. Аденилатциклаза с образованием циклического АМФ (цАМФ) работает как вторичный мессенджер для многих клеточных и гормональных событий. Клинически MAS классически характеризуется преждевременным половым созреванием, отметинами на коже цвета «кофе с молоком» и поражениями костей, называемыми полиоссальной фиброзной дисплазией. Другие состояния, которые представляют собой гиперактивность аденилатциклазы, связанной с рецептором, включают гипертиреоз, возникающий в результате активации рецептора ТТГ, гиперкортицизм (активация рецепторов КРГ и АКТГ), акромегалию (активация рецептора GHRH) и другие. Клиническая гетерозиготность пораженных лиц объясняется мозаицизмом мутации.

Рецептор гистамина H2 также связан с белком Gαs. Высвобождение гистамина из тучных клеток в первую очередь отвечает за немедленную реакцию гиперчувствительности в коже. Клинические наблюдения наших пациентов с МАС свидетельствуют о повышенной чувствительности к гистамину. Мы предполагаем, что это происходит в результате активации Gαs, связанной с рецептором H2. У выявленных нами пациентов это проявлялось в виде астмы, хронической крапивницы, дерматографизма, контактной гиперчувствительности, реакций на лекарства, язв, а также анафилактических реакций на морепродукты, красители и латекс. Приблизительно 75% наших пациентов с MAS проявляют одну или несколько из вышеупомянутых реакций. Анафилаксия произошла у трех отдельных пациентов.

Интерлейкин-4 (ИЛ-4) также высвобождается из иммунных клеток в ответ на гистамин. Этот цитокиновый ответ опосредован активацией рецептора H2 и активацией Gαs. ИЛ-4 необходим для функционирования и продукции IgE, другого важного медиатора реакций гиперчувствительности. Два наших пациента с MAS с симптомами аллергии дополнительно продемонстрировали заметно повышенный уровень IgE.

Кодеин является очень эффективным средством, вызывающим высвобождение гистамина из тучных клеток, и обычно используется в дополнение к гистамину. Мы планируем использовать кодеин, а также кожные пробы на гистамин для оценки реакции на гистамин. Будет проведено сравнение реакции на кодеин между пациентами с MAS и здоровым контролем. Возраст и пол не оказывают существенного влияния на чувствительность к гистамину. Было отмечено, что только у младенцев и взрослых старше 50 лет снижена реактивность по сравнению с другими возрастными группами. Было отмечено, что менструальные циклы у женщин вызывают небольшие колебания с повышенной кожной реактивностью во время овуляции и более низкой реактивностью во время менструации. Поскольку у большинства девочек с болезнью МакКьюна-Олбрайта менструации нерегулярны, будет трудно сопоставить кожные пробы с менструальным циклом. Поэтому мы будем записывать дату последней менструации для каждой пациентки и контроля.

Чрезмерная чувствительность к гистамину не была связана с комплексом MAS. Несмотря на то, что данные доступны, можно предсказать, что пациенты с MAS подвержены риску сильного ответа на гистамин, поскольку гистамин действует через Gαs.

Дизайн исследования:

Это будет одноцентровое контролируемое исследование ответа на гистамин у детей с MAS по сравнению с незатронутыми субъектами. Исследуемое лекарство/устройство/биологический агент не будет использоваться.

Критерии выбора субъекта:

1. Ожидаемый размер выборки: 10 пациентов McCune-Albright и 20 контрольных.
2. Пациентов будут набирать для исследования во время визитов в эндокринологическую клинику. Большинство пациентов с MAS осматриваются не реже одного раза в 6 месяцев. Семьи пациентов с MAS, как правило, искушены в медицинском отношении, поскольку MAS может быть тяжелым, хроническим, мультисистемным заболеванием. По нашим оценкам, не менее 80% из наших 13-14 известных пациентов согласятся на участие. Также будет набрана контрольная группа.

3. Критерии включения: дети с MAS в диапазоне от малышей до молодых взрослых. Диагноз MAS будет сделан на клинической основе. Анализ крови бесполезен в этом состоянии, так как клетки-предшественники костного мозга с мутацией Gαs демонстрируют недостаток выживания. Все пациенты представляют собой смешанные химеры, поскольку эта мутация смертельна, если она возникает в клетках зародышевой линии. Диагноз MAS соответствует пациентам, у которых обнаруживаются два или более из следующих клинических признаков:

   1. Независимая от ГнРГ преждевременная половая зрелость
   2. Полиостотическая фиброзная дисплазия
   3. Места кофе с молоком с границами побережья штата Мэн и уважением к средней линии.
   4. Неаутоиммунный гипертиреоз. Десять контролей также будут набраны из членов семей пациентов с MAS без известных аллергий. Для сравнения из эндокринной клиники будет набрана дополнительная контрольная группа из десяти неродственных субъектов, также не имеющих известных аллергий.

4. Критерий исключения:

   1. Любой пациент с MAS или контрольная группа, которые не принимали или не могут прекратить какие-либо домашние схемы приема антигистаминных препаратов или глюкокортикоидов (включая ингаляционные стероиды) по крайней мере за семь дней до проведения кожных проб.
   2. Любой пациент с MAS или контрольная группа, принимающая трициклические антидепрессанты в течение двух недель до проведения кожных проб.

Учебные группы:

В этом исследовании не исследуется специфическое лечение.

Наблюдения/измерения:

Пациентов попросят прекратить любые обычные домашние схемы приема антигистаминных препаратов и/или глюкокортикоидов за семь дней до проведения кожных проб. Сначала у каждого участника будет один забор крови для определения уровней IgE и IL-4. Мы будем использовать коммерчески доступные наборы ELISA для человеческого IL-4. Мы широко публиковались с использованием методов ELISA. Количественные уровни IgE будут выполняться в нашей лаборатории.

Детям с MAS и детям из контрольной группы будут проведены стандартные процедуры кожной пробы с помощью разведения гистамина, кодеина и контрольного физиологического раствора для оценки реакции кожных волдырей и воспалений с целью объективной оценки гиперчувствительности и/или реактивности. Кожные пробы включают в себя размещение капли раствора гистамина на поверхности кожи. Затем игла осторожно проникает в эпидермис. Та же процедура будет использоваться для кодеина и физиологического раствора. Тесты будут располагаться на расстоянии не менее 2 см друг от друга, чтобы избежать ложных реакций. Тестирование будет включать в себя два стандартных участка для тестирования кожи, то есть руку и спину, для всех участников. Участок кожи с образованием цвета «кофе с молоком» и его аналог с нормальной кожей будут протестированы на пациентах с MAS. Нормальные контроли будут подвергаться кожному тестированию на соответствующем участке. Тестирование будет проводиться в Аллергической клинике обученным аллергологом или сопровождающим. Реакция на появление волдырей и воспалений будет задокументирована через 20 минут после проведения кожных тестов. Реакция на образование волдырей и покраснений будет обведена чернилами, а изображение будет перенесено на гипоаллергенную прозрачную ленту и помещено на лист сбора данных для измерения. Измеряют и суммируют самый длинный и ортогональный диаметры эритемы. Сумма диаметров волдырей определяется аналогичным образом. Предыдущие исследования показали, что стандартная реакция на волдыри и припухлости дает в сумме 7,0 см ± 1,25 см.

После завершения тестирования участникам дадут дозу антигистамина (Zyrtec) и лосьон с каламином для местного применения, чтобы уменьшить раздражение. Будет проводиться тщательный мониторинг крайней гиперчувствительности или анафилаксии, что является обычным стандартом ухода при тестировании детей на аллергию. Однако классические системные аллергические реакции вызываются белковыми аллергенами. Поскольку гистамин и кодеин не являются белковыми соединениями, нельзя ожидать системной аллергической реакции. Если возникнет такая необычная реакция, под рукой будет шприц-ручка с адреналином.

Значимость:

В настоящее время нет литературы, утверждающей, что дети с синдромом МакКьюна-Олбрайта проявляют повышенную чувствительность к гистамину. Если это исследование покажет, что пациенты с МАС действительно имеют повышенную чувствительность к гистамину, можно ожидать риска тяжелых аллергических реакций. Опасные для жизни события можно было бы потенциально предотвратить, если бы пациенты с MAS носили шприц-ручки с адреналином и/или лечили этих пациентов антигистаминными препаратами.

Анализ мощности:

Опубликованный отчет о стандартной реакции волдырей и припухлостей на гистамин демонстрирует, что сумма самого длинного (А) и ортогонального (В) (определяемого средней точкой А, обозначенной X) [Σ = А+В] диаметра волдырей и припухлостей реакция на гистамин составила 7,0 см ± 1,25 см. (среднее значение ± SD) Предполагая, что у пациентов McCune-Albright средний ответ в виде волдырей и воспалений будет на 50% больше в диаметре по сравнению с контрольной группой, и с использованием уровня альфа 0,05; тестирование 10 пациентов обеспечит мощность 84% для выявления различий между пациентами и контрольной группой.