Reattività all'istamina nella sindrome di McCune-Albright

Gli obiettivi di questo studio sono determinare se:

1. I pazienti con sindrome di McCune-Albright differiscono dai controlli non affetti nella risposta di pomfi e riacutizzazioni all'istamina e alla codeina.
2. La pelle colpita differirà dalla pelle sana nella risposta di pomfi e riacutizzazioni all'istamina e alla codeina.
3. I livelli di IgE e IL-4 nei pazienti con MAS differiscono dai controlli normali.

Obiettivi specifici:

1. Confrontare la risposta cutanea dei pazienti con MAS rispetto ai controlli normali utilizzando test cutanei standard per istamina e codeina.
2. Confronta la risposta ai test cutanei nei pazienti con MAS con gli standard noti per i test cutanei. Confrontare la risposta ai test cutanei di istamina e codeina nella pelle affetta (café-au-lait) del paziente MAS con la pelle non affetta (normale).
3. Confronta i livelli di IgE e IL-4 nei pazienti con MAS rispetto ai controlli.

Sfondo:

La sindrome di McCune-Albright (MAS) è una malattia genetica caratterizzata dall'attivazione costitutiva delle proteine ​​Gαs coinvolte nell'enzima adenilato ciclasi. La malattia è ora nota per essere causata da una mutazione genetica, comunemente una sostituzione di istadina o cisteina per arginina all'amminoacido 201 nella proteina Gαs. L'adenilato ciclasi, con la sua formazione di AMP ciclico (cAMP), funziona come un secondo messaggero per molti eventi cellulari e ormonali. Clinicamente, la MAS è caratterizzata classicamente da pubertà precoce, segni cutanei caffè-latte e lesioni ossee denominate displasia fibrosa poliostotica. Altre condizioni che rappresentano l'iperattività dell'adenilato ciclasi accoppiata al recettore includono ipertiroidismo derivante dall'attivazione del recettore del TSH, ipercortisolismo (attivazione del recettore CRH e ACTH), acromegalia (attivazione del recettore GHRH), tra gli altri. L'eterozigosi clinica degli individui affetti è spiegata dal mosaicismo della mutazione.

Il recettore dell'istamina H2 è anche accoppiato alla proteina Gαs. Il rilascio di istamina dai mastociti è il principale responsabile della reazione di ipersensibilità immediata della pelle. Le osservazioni cliniche dei nostri pazienti con MAS suggeriscono una maggiore reattività all'istamina. Ipotizziamo che ciò derivi dalla sovraregolazione di Gαs accoppiata al recettore H2. Nei nostri pazienti identificati, questo si è manifestato come asma, orticaria cronica, dermatografismo, ipersensibilità da contatto, reazioni ai farmaci, ulcere, nonché reazioni anafilattiche a frutti di mare, coloranti e lattice. Circa il 75% dei nostri pazienti con MAS presenta una o più delle suddette reazioni. L'anafilassi si è verificata in tre pazienti separati.

L'interleuchina-4 (IL-4) viene anche rilasciata dalle cellule immunitarie in risposta all'istamina. Questa risposta citochinica è mediata dall'attivazione del recettore H2 e dall'attivazione di Gαs. IL-4 è necessario per la funzione e la produzione di IgE, un altro importante mediatore delle reazioni di ipersensibilità. Due dei nostri pazienti con MAS con sintomi allergici hanno inoltre dimostrato livelli di IgE marcatamente elevati.

La codeina è un agente molto efficace nel provocare il rilascio di istamina dai mastociti ed è comunemente usata in aggiunta all'istamina. Abbiamo in programma di utilizzare la codeina e il test cutaneo dell'istamina per valutare la risposta dell'istamina. Verrà effettuato il confronto delle risposte alla codeina tra i pazienti con MAS ei controlli non affetti. L'età e il sesso non esercitano effetti importanti sulla reattività all'istamina. È stato notato che solo i neonati e gli adulti di età superiore ai 50 anni hanno una minore reattività rispetto ad altri gruppi di età. È stato notato che i cicli mestruali nelle femmine causano una leggera variazione con una maggiore reattività cutanea intorno all'ovulazione e una minore reattività durante le mestruazioni. Poiché la maggior parte delle ragazze con McCune-Albright ha mestruazioni irregolari, sarà difficile cronometrare il test cutaneo con il ciclo mestruale. Pertanto, registreremo la data dell'ultimo periodo mestruale per ogni paziente e controllo femminile.

L'eccessiva reattività all'istamina non è stata un'associazione segnalata del complesso MAS. Anche se i dati sono disponibili, si potrebbe prevedere che i pazienti con MAS siano a rischio di una vigorosa risposta istaminica, poiché l'istamina agisce tramite Gαs.

Disegno dello studio:

Questo sarà uno studio controllato da un singolo centro sulla risposta all'istamina nei bambini con MAS rispetto ai soggetti non affetti. Non verrà impiegato alcun farmaco/dispositivo/agente biologico sperimentale.

Criteri di selezione del soggetto:

1. Dimensione prevista del campione: 10 pazienti McCune-Albright e 20 controlli.
2. I pazienti saranno reclutati per lo studio durante le visite cliniche di endocrinologia. La maggior parte dei pazienti con MAS viene visitata almeno ogni 6 mesi. Le famiglie dei pazienti con MAS tendono ad essere sofisticate dal punto di vista medico, poiché la MAS può essere una malattia grave, cronica e multisistemica. Stimiamo che almeno l'80% dei nostri 13-14 pazienti noti acconsentirà a partecipare. Verrà reclutato anche un gruppo di controllo.

3. Criteri di inclusione: bambini con MAS che vanno dai bambini ai giovani adulti. La diagnosi di MAS sarà effettuata su base clinica. Gli esami del sangue non sono utili in questa condizione, poiché le cellule progenitrici del midollo osseo con la mutazione Gαs mostrano uno svantaggio di sopravvivenza. Tutti i pazienti sono chimere miste, poiché questa mutazione è letale se si verifica nelle cellule germinali. I pazienti che presentano due o più dei seguenti reperti clinici si adattano alla diagnosi di MAS:

   1. Pubertà precoce indipendente dal GnRH
   2. Displasia fibrosa poliostotica
   3. Spot café-au-lait con bordi della costa del Maine e rispetto per la linea mediana.
   4. Ipertiroidismo non autoimmune. Verranno inoltre reclutati dieci controlli da familiari di pazienti con MAS senza allergie note. Un ulteriore gruppo di controllo di dieci soggetti non imparentati, anch'essi senza allergie note, sarà reclutato dalla Clinica Endocrina per il confronto.

4. Criteri di esclusione:

   1. Qualsiasi paziente o controllo MAS che non ha o non può interrompere alcun regime domiciliare di antistaminici o glucocorticoidi (compresi gli steroidi per via inalatoria) almeno sette giorni prima del test cutaneo.
   2. Qualsiasi paziente MAS o controllo su antidepressivi triciclici entro due settimane prima del test cutaneo.

Gruppi di studio:

Nessun trattamento specifico è in fase di studio in questo studio.

Osservazioni/Misurazioni:

Ai pazienti verrà chiesto di aver interrotto qualsiasi normale regime domiciliare di antistaminici e/o glucocorticoidi per sette giorni prima del test cutaneo. Innanzitutto ogni partecipante verrà sottoposto a un singolo prelievo di sangue per ottenere i livelli di IgE e IL-4. Utilizzeremo kit ELISA disponibili in commercio per IL-4 umana. Abbiamo pubblicato ampiamente utilizzando metodi ELISA. I livelli quantitativi di IgE saranno eseguiti nel nostro laboratorio.

I bambini con MAS e i controlli saranno sottoposti a procedure standard di test cutaneo con puntura di spillo con diluizioni di istamina, codeina e una soluzione di controllo salina per valutare la risposta del ponfo e della riacutizzazione della pelle al fine di valutare obiettivamente l'ipersensibilità e/o la reattività. Il test cutaneo prevede specificamente il posizionamento di una goccia di soluzione di istamina sulla superficie della pelle. Un ago viene quindi penetrato delicatamente nell'epidermide. La stessa procedura verrà utilizzata per la codeina e la soluzione salina. I test saranno distanziati di almeno 2 cm l'uno dall'altro per evitare false reazioni. I test includeranno due siti standard per i test cutanei, ovvero braccio e schiena, per tutti i partecipanti. Un'area di pelle con formazione caffè-latte e la sua controparte cutanea normale saranno testate sui pazienti con MAS. I controlli normali saranno sottoposti a test cutanei in un'area corrispondente. I test saranno eseguiti nella Clinica per le allergie da un borsista specializzato in allergologia o da un partecipante. Le risposte di pomfi e riacutizzazioni saranno documentate 20 minuti dopo la somministrazione dei test cutanei. La risposta del pomfo e del bagliore sarà delineata con l'inchiostro e l'immagine verrà trasferita su nastro trasparente ipoallergenico e posizionata su un foglio di raccolta dati per la misurazione. Vengono misurati e sommati i diametri dell'eritema più lunghi e ortogonali. La somma dei diametri dei pomfi sarà determinata in modo simile. Precedenti studi hanno dimostrato che una risposta standard di pomfi e riacutizzazioni produce una somma di 7,0 cm ± 1,25 cm.

Al termine del test, ai partecipanti verrà quindi somministrata una dose di antistaminico (Zyrtec) e lozione topica alla calamina per pungere le aree per ridurre l'irritazione. Ci sarà un attento monitoraggio per l'estrema ipersensibilità o anafilassi come è il solito standard di cura quando si testano i bambini per le allergie. Tuttavia, le classiche reazioni allergiche sistemiche sono causate da allergeni proteici. Poiché l'istamina e la codeina non sono composti proteici, non ci si aspetterebbe una reazione allergica sistemica. Una penna epinefrina sarà a portata di mano per l'uso se si verifica una reazione così insolita.

Significato:

Attualmente non esiste letteratura che affermi che i bambini con la sindrome di McCune-Albright mostrino una maggiore reattività all'istamina. Se questo studio mostra che i pazienti con MAS hanno effettivamente una maggiore risposta all'istamina, si potrebbe prevedere il rischio di gravi reazioni allergiche. Gli eventi potenzialmente letali potrebbero essere potenzialmente evitati facendo trasportare ai pazienti con MAS penne epinefrina e/o trattando questi pazienti con antistaminici.

Analisi di potenza:

Un rapporto pubblicato sulle risposte standard di pomfo e riacutizzazione all'istamina dimostra che la somma del diametro più lungo (A) e ortogonale (B) (determinato dal punto medio di A, etichettato con X) [Σ = A+B] del pomfo e della riacutizzazione la risposta all'istamina era di 7,0 cm ± 1,25 cm. (media ± D.S.) Supponendo che i pazienti McCune-Albright mostreranno una risposta media di pomfi e riacutizzazioni del 50% in più di diametro rispetto ai controlli e utilizzando un livello alfa di 0,05; il test su 10 pazienti fornirà una potenza dell'84% per rilevare le differenze tra pazienti e controlli.