Замена переноса свежих эмбрионов (ET) на перенос замороженных эмбрионов (FET) с использованием витрификации

Все пациентки в исходной группе лечились по длинному протоколу стимуляции яичников. Для подавления гипофизарной регуляции пациентки получали ежедневное введение 0,5 мг бусерелина (супрефакт, Авентис, Франкфурт, Германия) с 21-го дня менструального цикла. Доза бусерелина была снижена до 0,25 мг в день, когда яичники были в покое на УЗИ, и была начата КГЯ с рекомбинантного ФСГ (Гонал Ф, Сероно, Обн, Швейцария) 150 МЕ/день на 2-й день кровотечения отмены. Серийные ультразвуковые исследования и оценка уровней E2 в сыворотке использовались для оценки ответа яичников, а затем по мере необходимости выполнялась коррекция дозы гонадотропина. Хорионический гонадотропин человека (прегнил, Organon, Oss, Нидерланды) 10 000 МЕ вводили, когда по крайней мере два фолликула достигали среднего диаметра 18 мм.

Извлечение ооцитов проводили через 34-36 часов после введения ХГЧ, а стандартное осеменение или ИКСИ выполняли в зависимости от клинической ситуации.

У 187 пациентов, отнесенных к группе свежей ЭТ, ЭТ была проведена на 2-й день. Эмбрионы были перенесены под ультразвуковым контролем с помощью C.C.D. катетер для переноса эмбрионов (Лаборатория C.C.D., Париж, Франция). Лютеиновая поддержка прогестероном в масле (Progesterone, Aburaihan Co., Тегеран, Иран) по 100 мг ежедневно в/м начиналась в день извлечения ооцитов и продолжалась до подтверждения сердечной деятельности плода на УЗИ.

У 187 пациентов, выделенных в группу ФЭТ, была проведена криоконсервация всех эмбрионов с витрификацией методом криотоп и через два месяца эмбрионы были перенесены.

Протокол криотопной витрификации эмбрионов был описан ранее (Kuwayama et al., 2005; Kuwayama, 2007).

После двухэтапной загрузки уравновешивающим раствором, содержащим 7,5 % (об./об.) этиленгликоля и 7,5 % (об./об.) диметилсульфоксида, и раствором для витрификации, содержащим 15 % (об./об.) этиленгликоля, 15 % (об./об.) ) диметилсульфоксида и 0,5 моль/л сахарозы эмбрионы загружали узким стеклянным капилляром на криотоп в объеме <0,1 мкл. После загрузки почти весь раствор удаляли, оставляя только тонкий слой, покрывающий зародыши, и образец быстро погружали в жидкий азот (ЖА). Затем на пленочную часть Cryotop натягивали пластиковый колпачок, а образец хранили под LN. При нагревании защитный колпачок снимали с криотопа, пока он все еще был погружен в жидкий азот, и погружали криотоп непосредственно в среду, содержащую сахарозу, при температуре 37°С. Затем эмбрионы последовательно инкубировали в растворах разбавителей перед дальнейшим культивированием in vitro для переноса.

Пациентки были подготовлены к ЭТ с пероральным введением Е2 для достижения толщины эндометрия ≥ 8 мм и трехполосного рисунка на ультразвуковом сканировании. В то время пациенты получали 100 мг прогестерона в масле в/м ежедневно, а ЭТ проводилась через три дня под контролем УЗИ брюшной полости, как описано ранее. Пероральный прием Е2 и прогестерона продолжали до подтверждения сердечной деятельности плода с помощью УЗИ.