Remplacement des transferts d'embryons frais (ET) par des transferts d'embryons congelés (FET) par vitrification

Toutes les patientes de la cohorte initiale ont été traitées avec un protocole long de stimulation ovarienne. Pour la régulation à la baisse de l'hypophyse, les patientes ont été traitées par l'administration quotidienne de 0,5 mg de buséréline (suprefact, Aventis, Francfort, Allemagne) à partir du jour 21 du cycle menstruel. La buséréline a été réduite à 0,25 mg par jour lorsque les ovaires étaient au repos à l'échographie, et la COH a été initiée avec de la FSH recombinante (Gonal F, Serono, Aubnne, Suisse) 150 UI/jour le jour 2 de l'hémorragie de privation. Des examens échographiques en série et une évaluation des taux sériques d'E2 ont été utilisés pour évaluer la réponse ovarienne, puis des ajustements de dose de gonadotrophine ont été effectués au besoin. La gonadotrophine chorionique humaine (pregnyl, Organon, Oss, Pays-Bas) 10 000 UI a été administrée lorsqu'au moins deux follicules ont atteint un diamètre moyen de 18 mm.

La récupération des ovocytes a été effectuée 34 à 36 heures après l'administration d'hCG et une insémination conventionnelle ou ICSI a été effectuée selon les besoins cliniques.

Chez 187 patients affectés au groupe ET frais, ET ont été réalisées le jour 2. Les embryons ont été transférés sous guidage échographique, avec un C.C.D. cathéter de transfert d'embryon (Laboratoire C.C.D., Paris, France). Un soutien lutéal avec de la progestérone dans de l'huile (Progestérone, Aburaihan Co., Téhéran, Iran) 100 mg par jour IM a commencé le jour du prélèvement des ovocytes et s'est poursuivi jusqu'à la documentation de l'activité cardiaque fœtale à l'échographie.

Chez 187 patients affectés au groupe FET, la cryoconservation de tous les embryons a été entreprise avec vitrification par la méthode Cryotop et après deux mois, les embryons ont été transférés.

Le protocole de vitrification Cryotop des embryons a été décrit précédemment (Kuwayama et al., 2005 ; Kuwayama, 2007).

Après un chargement en deux étapes avec une solution d'équilibrage contenant 7,5 % (v/v) d'éthylène glycol et 7,5 % (v/v) de diméthylsulfoxyde, et une solution de vitrification contenant 15 % (v/v) d'éthylène glycol, 15 % (v/v) ) de diméthylsulfoxyde et 0,5 mol/L de saccharose, les embryons ont été chargés avec un capillaire en verre étroit sur le Cryotop dans un volume de < 0,1 µL . Après le chargement, presque toute la solution a été retirée pour ne laisser qu'une fine couche recouvrant les embryons, et l'échantillon a été rapidement immergé dans de l'azote liquide (LN). Par la suite, le capuchon en plastique a été tiré sur la partie film du Cryotop et l'échantillon a été stocké sous LN. Lors du réchauffement, le capuchon protecteur a été retiré du Cryotop alors qu'il était encore immergé dans LN et le Cryotop a été immergé directement dans un milieu à 37 °C contenant du saccharose. Les embryons ont ensuite été séquentiellement incubés dans une solution de diluants avant une nouvelle culture in vitro pour le transfert.

Les patientes ont été préparées pour l'ET avec E2 oral pour atteindre une épaisseur endométriale ≥ 8 mm et un motif à trois lignes sur les échographies. À ce moment-là, les patientes recevaient quotidiennement 100 mg de progestérone IM dans de l'huile et une TE était réalisée trois jours plus tard sous guidage échographique abdominal, comme décrit précédemment. L'E2 oral et la progestérone ont été poursuivis jusqu'à la documentation de l'activité cardiaque fœtale par échographie.