Клинико-генетический анализ врожденного гипотиреоза вследствие дисгенезии щитовидной железы. (HYPOTYGEN)

Врожденный гипотиреоз (ВГ) — редкое заболевание, поражающее 1 из 3500 новорожденных. Это состояние постоянно выявляется с конца 1970-х годов во Франции, что позволило начать лечение на раннем этапе и значительно улучшить интеллектуальный рост и прогноз этих детей. Однако нарушения нервно-психического развития сохраняются в 10-15% случаев. Почти в 10% случаев сообщалось о дополнительных сопутствующих патологиях. Эти наблюдения в большинстве случаев плохо изучены. Семейная природа HC в настоящее время общепризнанна, и в настоящее время задействована дюжина генов. Однако в большинстве случаев (ГХ не связан с нарушением организации йода) было обнаружено небольшое количество мутаций относительно числа больных (5-10%), что свидетельствует о вовлечении других генов. Некоторые гены вовлечены в такие специфические синдромальные формы, но многие патологические ассоциации остаются необъясненными. Кроме того, более полное выяснение генетического ГК позволяет лучше понять его этиологию и, таким образом, разделить риск семейного рецидива (часто задаваемые родителями детей вопросы) и, во-вторых, наличия сопутствующих заболеваний.

Основная цель: Описать популяцию с ГХ (не за счет нарушения организации йода) не только на клинико-биологическом и рентгенологическом (фенотипический анализ), но и на генетическом уровне установить корреляцию генотип/фенотип.

Второстепенные цели:

1. изучить частоту пороков развития и/или патологических ассоциаций у больных ГК
2. выявить группы больных с синдромальными формами, у которых раннее начало лечения может улучшить прогноз у детей
3. для поиска мутаций в генах, которые, как известно, вовлечены в патологию
4. для поиска новых локусов и/или вовлеченных генов
5. чтобы определить оптимальную генетическую стратегию, которую следует принять перед случаем HC.

Критерии включения:

- Пациент: Новорожденный (0-27 дней) или младенец (28 дней-23 месяца), или ребенок или взрослый с врожденным гипотиреозом (то есть с ТТГ на фильтровальной бумаге > 15 мЕд/мл и/или ТТГ в сыворотке > 10 мЕд/мл) диагностируется в первые месяцы жизни независимо от возраста, пола, массы тела и размера.

Субъекты с уровнями свободных гормонов щитовидной железы (FT3 и FT4) в крови согласно стандартам описываются как страдающие субклиническим гипотиреозом.

Если лечение L-тироксином было прекращено без рецидива (то есть всегда с уровнем ТТГ <5 мЕд/мл с различными контролями), гипотиреоз называют транзиторным, независимо от возраста прекращения.

• Отсутствие раннего или неонатального зоба при пальпации или ультразвуковом исследовании
• отрицательный перхлоратный тест (т. е. скорость йодного засоления <10% через 2 часа после инъекции перхлората), когда щитовидная железа на месте
• Отсутствие самоиммунитета против щитовидной железы у детей и/или у матери (определяется наличием антитиреопероксидазных антител и/или тиреоглобулина)
• Подпись свободного и информированного согласия пациента или его законного представителя
• Аффилированная компания или пользующаяся системой социального обеспечения

Критерии невключения:

• Наличие маркеров антитиреоидного аутоиммунитета у детей и/или матери (наличие антитиреопероксидазных антител и/или тиреоглобулина)
• Зоб у новорожденных при пальпации или ультразвуковом исследовании
• положительный перхлоратный тест (т. снижение нормы йода > 10% при 2 инъекциях перхлората)

Критерий исключения:

Пациенты иностранного происхождения, вернувшиеся в свою страну, будут исключены из исследования, даже те, кто потерял наблюдение или отказывается выполнять запрошенные дополнительные тесты.

• Действия / медицинские осмотры, проводимые при уходе, но обычно в рамках обыска, если они не проводятся при уходе:
• УЗИ щитовидной железы
• Сцинтиграфия щитовидной железы
• Данные о функции щитовидной железы: минимальные значения FT3, FT4 и ТТГ плазмы, последний анализ крови и текущее лечение (доза L-T4)
• Данные о текущем образовании (или роде занятий) и уровне психомоторного развития, установленном по шкале Денвера
• Данные сопутствующих заболеваний: эхокардиография и/или наличие заболевания сердца и почек и/или УЗИ наличие заболевания почек
• Клиническое обследование проводится врачом-клиницистом, следователем-генетиком центра.
• Стандартный кариотип
• Специфический генетический анализ: TTF1/Nkx2.1; FOXE/TTF2; PAX8, TSHR и Nkx2.5 в образце крови всех пациентов (10 мл крови с ЭДТА)

• Поиск новых генов

  1. В случае кровнородственных семей полногеномное исследование будет искать гомозиготные области, общие для пораженных членов (или картирование гомозиготности, аутозиготное картирование).

     (в родственном образце крови первой степени 10 мл ЭДТА)

  2. для пациентов с одним или несколькими заболеваниями, связанными с HC, ищущих количество вариаций (CNV) гена или локуса.

Если у пациента обнаружена аномалия, образцы крови двух родителей с 10 мл ЭДТА ищут вариации CNV, чтобы исключить наследственные CNV.

350 пациентов с ГЦ наблюдались эндокринологами и/или французскими педиатрами. Обратите внимание, что большинство пациентов были идентифицированы в базе данных более 10 лет в INSERM U845 (Госпиталь Неккер, Париж).

Планируемая продолжительность исследования: 42 месяца. Временные включения: 18 месяцев. Продолжительность наблюдения: 2 года. С пациентом можно в любое время связаться по согласованию для выполнения необходимых дополнительных анализов и/или нового образца крови для дальнейшего генетического исследования.

Многонациональное кросс-секционное исследование. В первом периоде оно точно описывает пациентов фенотипически, а во втором периоде выявляет генетическую причину. Этому будет способствовать наличие ДНК, уже собранной для большинства из них в одном национальном банке Франции, созданной в лабораторном исследовательском центре U845 (биоколлекция DC-2008-596, Факультет Неккер, Париж)

Первичная конечная точка:

• Этиологический тип врожденного гипотиреоза: атиреоз, эктопия, гемиагнезия, гипоплазия железы нормальной формы и размеров.
• Наличие и тип цитогенетических аномалий и/или генетически наличие и тип патологии, ассоциированной с ГХ
• Наличие нейропсихологических отклонений (включая задержку психомоторного развития)

Вторичные конечные точки:

В этой главе будут рассмотрены все элементы, которые могут вызвать задержку психомоторного развития (3):

• Тайм-менеджмент гипотиреоза
• Оптимизация лечения гипотиреоза: отсрочка нормализации ТТГ и Т4, количество ТТГ >15 мЕд/мл в период наблюдения, приверженность
• Наличие более раннего осложнения и/или неонатального

Статистический анализ будет включать следующие основные разделы:

• Описание популяции (анамнестические данные, клиника, гормональный статус на момент постановки диагноза и данные рентгенологического наблюдения).
• Анализ детерминант психомоторного развития (см. критерии вторичного исхода).
• Данные генетического исследования (тип мутировавшего гена и характер мутации или генетическая локализация делеции или дупликации) Анализ наблюдаемой связи между мутациями и фенотипами пациентов будет выполнен методами сравнения частот генотипов в разных группах испытуемых (критерий хи-квадрат или Пирсона 2, если необходимо, точным критерием Фишера).

Коэффициенты опасности, связанные с риском возникновения каждого события, будут оцениваться с доверительными интервалами в 95 %. Сравнение событий между различными мутациями будет проверено с использованием критерия логарифмического ранга. Все тесты будут двусторонними, и значение p <0,05 считается статистически значимым.

Через 42 месяца исследование позволит выявить ответственные гены у большой части пациентов с врожденным гипотиреозом (исключая нарушения йодорганизации), установить корреляцию генотип-фенотип и предложить ранний генетический скрининг (посредством систематического скрининга новорожденных) пациентам и их детям. семьи. Изучение частоты сопутствующих заболеваний и генетическое разъяснение также предоставит рекомендации по раннему лечению (возможно, «профилактическому») от других более поздних предсказуемых и потенциально негативных последствий, связанных с гипотиреозом.