Analisi clinica e genetica nell'ipotiroidismo congenito dovuto a disgenesia tiroidea. (HYPOTYGEN)

L'ipotiroidismo congenito (CH) è una malattia rara che colpisce 1 neonato su 3500. Questa condizione è rilevata costantemente dalla fine degli anni '70 in Francia, il che ha consentito un'assistenza precoce e un significativo miglioramento della statura intellettuale e della prognosi di questi bambini. Tuttavia i disturbi del neurosviluppo persistono nel 10-15% dei casi. Più patologie associate sono state riportate in quasi il 10% dei casi. Queste osservazioni sono nella maggior parte dei casi poco comprese. La natura familiare dell'HC è ora ben accettata e ora sono coinvolti una dozzina di geni. Tuttavia nella maggior parte dei casi (HC non dovuta a un disturbo dell'organizzazione dello iodio), sono state riscontrate poche mutazioni rispetto al numero di pazienti (5-10%), suggerendo il coinvolgimento di altri geni. Alcuni dei geni sono stati implicati in tali forme sindromiche specifiche, ma molte associazioni patologiche rimangono inspiegabili. Inoltre, una delucidazione più completa dell'HC genetico consente una migliore comprensione della sua eziologia e quindi condivide il rischio di recidiva familiare (richiesta frequentemente dai genitori di bambini con domande) e, in secondo luogo, la presenza di comorbidità.

Obiettivo principale: descrivere la popolazione con HC (non dovuta a un disturbo dell'organizzazione dello iodio) non solo a livello clinico, biologico e radiologico (analisi fenotipica) ma anche a livello genetico per stabilire una correlazione genotipo/fenotipo.

Obiettivi secondari:

1. studiare la frequenza di malformazioni e/o associazioni patologiche nei pazienti con HC
2. identificare gruppi di pazienti con forme sindromiche in cui il trattamento precoce può migliorare la prognosi dei bambini
3. ricercare mutazioni in geni noti per essere coinvolti nella patologia
4. ricercare nuovi loci e/o geni coinvolti
5. determinare la strategia genetica ottimale da adottare prima di un caso di HC.

Criterio di inclusione:

- Paziente: Neonato (0-27 giorni) o lattante (28 giorni-23 mesi), o bambino o adulto con ipotiroidismo congenito (vale a dire con un TSH di carta da filtro > 15 mU/ml e/o un TSH sierico > 10 mU/ml) diagnosticata nei primi mesi di vita, indipendentemente da età, sesso, peso e taglia.

I soggetti con livelli ematici di ormoni tiroidei liberi (FT3 e FT4) negli standard sono descritti come affetti da ipotiroidismo subclinico.

Se il trattamento con L-tiroxina è stato interrotto senza ricadute (vale a dire sempre con un TSH <5 mU/ml con controlli diversi), l'ipotiroidismo è definito transitorio, qualunque sia l'età dell'interruzione.

• Nessun gozzo precedente o neonatale alla palpazione o agli esami ecografici
• test del perclorato negativo (cioè tasso di salinizzazione dello iodio <10% a 2 ore dall'iniezione del perclorato) quando la ghiandola tiroidea è a posto
• Nessuna autoimmunità nei confronti della tiroide nei bambini e/o nella madre (definita dalla presenza di anticorpi antitireoperossidasi e/o tireoglobulina)
• Firma del consenso libero e informato da parte del paziente o del suo rappresentante legale
• Affiliato o godendo di un sistema di previdenza sociale

Criteri di non inclusione:

• Presenza di autoimmunità antitiroidea nei bambini e/o marcatori materni (presenza di anticorpi antitiroperossidasi e/o tireoglobulina)
• Gozzo alla palpazione neonatale o agli esami ecografici
• test perclorato positivo (es. diminuzione del tasso di iodio> 10% a 2 iniezioni di perclorato)

Criteri di esclusione:

Saranno esclusi dallo studio i pazienti di origine straniera rientrati nel proprio Paese, anche quelli che si sono persi per seguire o si rifiutano di eseguire ulteriori test richiesti.

• Atti/visite mediche effettuate in cura ma solitamente nell'ambito della ricerca se non effettuate in cura:
• Ecografia tiroidea
• Scintigrafia tiroidea
• Dati sulla funzione tiroidea: valori minimi di FT3, FT4 e TSH plasmatico ultimo esame del sangue e trattamento in corso (dose di L-T4)
• Dati sull'attuale istruzione (o occupazione) e livello di sviluppo psicomotorio stabiliti dalla scala di Denver
• Dati malattie associate: ecocardiografia e/o esistenza di malattie cardiache e renali e/o ecografia esistenza di malattie renali
• Esame clinico eseguito dal centro genetista ricercatore clinico.
• Cariotipo standard
• Analisi genetica specifica: TTF1/Nkx2.1; FOXE/TTF2; PAX8, TSHR e Nkx2.5 su campione di sangue per tutti i pazienti (10 ml di sangue EDTA)

• Cerca nuovi geni

  1. casi di famiglie consanguinee, uno studio su tutto il genoma cercherà le regioni omozigoti condivise dai membri affetti (o mappatura dell'omozigosi autozigosi).

     (nel relativo campione di sangue di primo grado di 10 ml di EDTA)

  2. per i pazienti con una o più malattie associate a HC, che richiedono una variazione numerica (CNV) di un gene o di un locus.

Se si riscontra un'anomalia nel paziente, i campioni di sangue di due genitori 10 ml di EDTA ricercano la variazione del CNV per escludere i CNV ereditari.

350 pazienti con HC seguiti da endocrinologi e/o pediatri francesi. Si noti che la maggior parte dei pazienti è stata identificata nel database di oltre 10 anni nell'INSERM U845 (Necker Hospital, Parigi).

Durata prevista del test: 42 mesi Tempo inclusi: 18 mesi Durata del follow-up: 2 anni Il paziente può essere contattato con l'accordo in qualsiasi momento per eseguire ulteriori test richiesti e/o un nuovo prelievo di sangue per ulteriori studi genetici.

Studio trasversale multinazionale In un primo periodo, descriverà accuratamente i pazienti dal punto di vista fenotipico e in un secondo periodo, troverà una causa genetica. Ciò sarà facilitato dalla presenza di DNA già raccolto per la maggior parte di essi in una banca nazionale in Francia, istituita nel centro di ricerca di laboratorio U845 (biocollection DC-2008-596, Faculty Necker, Parigi)

Punto finale principale:

• Tipo eziologico dell'ipotiroidismo congenito: atirosi, ectopia, emiagnésie, ghiandola ipoplastica al posto della forma e delle dimensioni normali
• Presenza e tipo di anomalie citogenetiche e/o geneticamente presenza e tipo di patologia associata a HC
• Presenza di anomalie neuropsicologiche (incluso sviluppo psicomotorio ritardato)

Endpoint secondari:

Verranno considerati in questo capitolo tutti gli elementi che possono causare ritardo psicomotorio (3):

• Gestione del tempo dell'ipotiroidismo
• Ottimizzazione del trattamento dell'ipotiroidismo: normalizzazione ritardata di TSH e T4, numero di TSH > 15 mU/ml durante il follow-up, aderenza
• La presenza di una complicanza precedente e/o neonatale

L'analisi statistica includerà i seguenti capitoli principali:

• Descrizione della popolazione (dati anamnestici, clinici, stato ormonale alla diagnosi e dati di imaging al follow-up).
• Analisi delle determinanti dello sviluppo psicomotorio (vedi criteri esito secondario).
• Dati dello studio genetico (tipo di gene mutato e natura della mutazione o posizione genetica di una delezione o duplicazione) Un'analisi dell'associazione osservata tra mutazioni e fenotipi di pazienti sarà eseguita mediante i metodi di confronto delle frequenze genotipiche in diversi gruppi di soggetti (test del chi-quadrato o Pearson 2 se necessario dal test esatto di Fisher).

Gli hazard ratio associati al rischio di accadimento di ciascun evento saranno stimati con intervalli di confidenza al 95%. Confronti di eventi tra diverse mutazioni saranno testati utilizzando il log-rank test. Tutti i test saranno bilaterali e un valore di p <0,05 è considerato statisticamente significativo.

Dopo 42 mesi, lo studio identificherà i geni responsabili in un'ampia percentuale di pazienti con ipotiroidismo congenito (esclusi i disturbi dell'organizzazione dello iodio), per stabilire una correlazione genotipo-fenotipo e proporre uno screening genetico precoce (attraverso lo screening neonatale sistematico) ai pazienti e ai loro famiglie. Lo studio della frequenza delle malattie associate e la delucidazione genetica forniranno anche raccomandazioni per il trattamento precoce (possibilmente "preventivo") da altre successive ripercussioni prevedibili e potenzialmente negative associate all'ipotiroidismo